| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语（Abbreviation) | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-23页 |
| ·多重PCR技术简介 | 第12-16页 |
| ·PCR技术的概述 | 第12页 |
| ·提高PCR反应特异性方法的概述 | 第12-13页 |
| ·PCR技术的分类 | 第13-15页 |
| ·多重PCR的原理 | 第15-16页 |
| ·多重PCR在病原检测中的应用 | 第16-17页 |
| ·禽呼吸道疾病病原概述 | 第17-21页 |
| ·新城疫病毒 | 第17-18页 |
| ·鸡传染性支气管炎病毒 | 第18-20页 |
| ·禽流感病毒 | 第20-21页 |
| ·禽呼吸道疾病病原混合感染的概述 | 第21-23页 |
| ·禽呼吸道疾病病原混合感染的传统检测方法 | 第21页 |
| ·禽呼吸道疾病病原混合感染的多重PCR检测 | 第21页 |
| ·多重RT-PCR检测禽呼吸道疾病病原混合感染的概述 | 第21-23页 |
| 2 研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 3 材料与方法 | 第24-33页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·禽呼吸道疾病病原病毒株 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要器材 | 第24-25页 |
| ·载体及菌株 | 第25页 |
| ·试剂配制 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-33页 |
| ·引物的设计以及合成 | 第26-27页 |
| ·RT-PCR模板的制备 | 第27-28页 |
| ·普通PCR体系的初步建立 | 第28-30页 |
| ·多重PCR体系的条件优化 | 第30-31页 |
| ·特异性试验 | 第31-32页 |
| ·敏感性试验 | 第32页 |
| ·临床诊断 | 第32-33页 |
| 4 实验结果 | 第33-43页 |
| ·普通PCR体系的初步建立 | 第33-35页 |
| ·退化温度的优化 | 第33页 |
| ·引物浓度优化 | 第33-34页 |
| ·PCR产物序列的测定 | 第34页 |
| ·普通PCR优化结果 | 第34-35页 |
| ·多重PCR体系的条件优化 | 第35-39页 |
| ·Mg~(2+)浓度的优化 | 第35-36页 |
| ·四种引物浓度比的优化 | 第36-37页 |
| ·Tag酶浓度的优化 | 第37页 |
| ·dNTP浓度的优化 | 第37-38页 |
| ·退火温度的优化 | 第38-39页 |
| ·多重PCR优化的结果 | 第39页 |
| ·特异性试验 | 第39-40页 |
| ·敏感性试验 | 第40-41页 |
| ·临床诊断 | 第41-43页 |
| 5 讨论 | 第43-46页 |
| ·多重RT-PCR检测方法的优势 | 第43页 |
| ·多重RT-PCR引物设计的讨论 | 第43-44页 |
| ·多重RT-PCR条件优化的讨论 | 第44页 |
| ·特异性试验和敏感性试验的讨论 | 第44-45页 |
| ·多重RT-PCR技术的应用 | 第45页 |
| ·本试验的不足之处 | 第45-46页 |
| 6 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 致谢 | 第52页 |