摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
縮略词表 | 第13-14页 |
1 前言 | 第14-27页 |
·研究问题的由来 | 第14页 |
·HOX基因家族的研究进展 | 第14-18页 |
·HOX基因的概述 | 第14-15页 |
·HOX基因的表达特点 | 第15-16页 |
·时空共线性原则 | 第15页 |
·后部优势原则 | 第15页 |
·剂量效应关系 | 第15-16页 |
·冗长作用及功能补偿性 | 第16页 |
·体节形成的特定性和相关性 | 第16页 |
·HOX基因的进化机制 | 第16-18页 |
·基因复制对HOX基因的影响 | 第16页 |
·基因突变对HOX基因的影响 | 第16-17页 |
·选择压力对HOX基因的影响 | 第17页 |
·调节元件对HOX基因的影响 | 第17-18页 |
·协同进化与HOX基因进化的关系 | 第18页 |
·HOX基因的生理作用 | 第18页 |
·HOXA11基因的研究进展 | 第18-21页 |
·HOXA11基因概述 | 第18-19页 |
·HOXA11基因的功能 | 第19-20页 |
·HOXA11基因对雄性生殖系统发育的调节 | 第19页 |
·HOXA11基因对雌性生殖系统发育的调节 | 第19页 |
·HOXA11基因对胚胎着床的影响 | 第19-20页 |
·猪中HOXA11基因功能研究现状与存在问题 | 第20-21页 |
·转基因动物的制备及检测方法 | 第21-27页 |
·转基因动物的制备方法 | 第21-24页 |
·显微注射法 | 第21页 |
·精子载体介导法 | 第21页 |
·胚胎干细胞介导法 | 第21-22页 |
·逆转录病毒感染法 | 第22-23页 |
·体细胞核移植法 | 第23页 |
·人工酵母染色体法(YAC) | 第23页 |
·转座子介导的基因转移技术 | 第23-24页 |
·RNA干涉技术 | 第24页 |
·转基因动物的检测方法 | 第24-27页 |
·DNA斑点杂交(DNA blot hybridization) | 第24页 |
·聚合酶链式反应反应(PCR,Polymerase chain reaction) | 第24-25页 |
·染色体原位杂交(In situ hybridization) | 第25页 |
·逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第25页 |
·RNase保护分析 | 第25页 |
·Western印迹分析(Western bloting) | 第25-26页 |
·免疫酶标法(ELISA) | 第26-27页 |
2 研究的目的和意义 | 第27-28页 |
3 材料与方法 | 第28-39页 |
·材料 | 第28-32页 |
·组织样品 | 第28页 |
·DNA样品 | 第28页 |
·实验小鼠 | 第28页 |
·载体、菌株、细胞系 | 第28-29页 |
·主要试剂 | 第29-30页 |
·主要试剂的配制 | 第30页 |
·主要仪器设备 | 第30-31页 |
·主要分子生物学软件 | 第31-32页 |
·方法 | 第32-39页 |
·本研究的技术路线 | 第32页 |
·细胞培养 | 第32-33页 |
·细胞复苏 | 第32-33页 |
·传代培养 | 第33页 |
·细胞冻存 | 第33页 |
·猪HOXA11基因cDNA的克隆 | 第33-34页 |
·猪HOXA11基因cDNA的电子克隆 | 第33页 |
·序列的同源性分析与鉴定 | 第33-34页 |
·引物设计 | 第34页 |
·猪HOXA11基因启动子相关研究 | 第34-36页 |
·猪HOXA11基因启动子的克隆 | 第34-36页 |
·猪HOXA11基因启动子双荧光素酶载体构建与验证 | 第36页 |
·体外孕酮注射小鼠 | 第36-39页 |
·样品准备 | 第36页 |
·总RNA的提取 | 第36-37页 |
·RNA的反转录 | 第37页 |
·实时定量PCR | 第37-39页 |
4 结果 | 第39-49页 |
·猪HOXA11基因cDNA的克隆 | 第39页 |
·猪HOXA11基因组织表达谱分析 | 第39-40页 |
·猪HOXA11基因启动子相关研究 | 第40-45页 |
·猪HOXA11基因启动子克隆 | 第40-41页 |
·猪HOXA11基因启动子载体的构建 | 第41-42页 |
·猪HOXA11基因启动子序列分析 | 第42-43页 |
·猪HOXA11基因启动子载体的验证 | 第43-44页 |
·猪HOXA11基因启动子载体在不同组织中的活性验证 | 第44-45页 |
·猪HOXA11基因在梅山和大白猪子宫内膜的表达研究 | 第45-46页 |
·孕酮注射小鼠子宫内膜HOXa11基因表达情况分析 | 第46-49页 |
·小鼠子宫内膜cDNA样品的制备 | 第46-47页 |
·小鼠子宫内膜HOXa11基因表达情况检测 | 第47-49页 |
5 讨论 | 第49-55页 |
·关于本研究的思路 | 第49页 |
·实验技术的讨论 | 第49-51页 |
·关于孕酮体外注射怀孕小鼠实验方法的分析 | 第49-50页 |
·关于荧光定量PCR方法检测基因mRNA表达的分析 | 第50-51页 |
·实验结果的讨论 | 第51-55页 |
·关于利用比较基因组学分离新基因的分析 | 第51页 |
·关于猪HOXA11基因组织表达谱的分析 | 第51-52页 |
·关于中外品种猪中HOXA11基因表达情况的分析 | 第52-53页 |
·关于猪HOXA11基因启动子研究的分析 | 第53-54页 |
·关于孕酮对小鼠HOXa11基因表达影响的分析 | 第54-55页 |
6 小结 | 第55-57页 |
·本研究取得的成果与结论 | 第55页 |
·本研究的创新点与特色 | 第55-56页 |
·本研究的不足之处及下一步工作建议 | 第56-57页 |
·本研究的不足之处 | 第56页 |
·下一步工作建议 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
致谢 | 第61页 |