| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 中英文縮略词表 | 第15-16页 |
| 第一部分：P16、PRB、C-MYC、TERC与宫颈癌的相关性研究 | 第16-38页 |
| 1 前言 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-20页 |
| ·标本来源与临床资料 | 第18页 |
| ·主要试剂和设备 | 第18-19页 |
| ·实验相关试剂配制 | 第19-20页 |
| 3 实验方法 | 第20-23页 |
| ·FISH(荧光原位杂交技术)实验方法 | 第20-22页 |
| ·免疫组化染色方法 | 第22-23页 |
| ·统计学分析 | 第23页 |
| 4 结果 | 第23-26页 |
| 5 讨论 | 第26-29页 |
| ·p16功能与肿瘤关系 | 第26-27页 |
| ·p16基因与宫颈癌 | 第27页 |
| ·宫颈癌中p16与pRb,c-myc,Terc基因的相关性 | 第27-29页 |
| 6 结论 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-33页 |
| 附图 | 第33-38页 |
| 第二部分：P16基因沉默载体构建和HELA细胞转染实验 | 第38-60页 |
| 1 前言 | 第38-40页 |
| 2 实验材料 | 第40-43页 |
| ·主要仪器设备 | 第40页 |
| ·细胞株、菌株 | 第40-41页 |
| ·载体 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41-42页 |
| ·基因表达检测引物 | 第42页 |
| ·常用试剂配制 | 第42-43页 |
| 3 实验方法 | 第43-50页 |
| ·p16 shRNA慢病毒载体构建 | 第43-47页 |
| ·Hela细胞慢病毒感染和稳定细胞株筛选 | 第47页 |
| ·p16基因表达检测 | 第47-49页 |
| ·统计学分析 | 第49-50页 |
| 4 实验结果 | 第50-54页 |
| ·p16基因发卡DNA的退火 | 第50页 |
| ·慢病毒入门载体和基因沉默载体质粒构建和鉴定 | 第50-51页 |
| ·基因沉默慢病毒质粒包装和病毒载体收获 | 第51页 |
| ·RT-PCR结果 | 第51-52页 |
| ·Westren-blot结果 | 第52-53页 |
| ·p16shRNA载体对p14ARF蛋白的影响 | 第53-54页 |
| 5 讨论 | 第54-56页 |
| ·siRNA, ShRNA, dsRNA, miRNA间的区别 | 第54-55页 |
| ·Plenti6/Block-iT-DEST shRNA慢病毒载体系统的优点 | 第55-56页 |
| ·Hela细胞的基因沉默载体转染 | 第56页 |
| 6 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 第三部分：P16基因表达对宫颈癌HELA干细胞生物学特性的影响 | 第60-86页 |
| 1 前言 | 第60-62页 |
| 2 实验材料 | 第62-63页 |
| ·主要实验设备 | 第62页 |
| ·细胞株 | 第62-63页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第63页 |
| ·实验动物 | 第63页 |
| 3 实验方法 | 第63-69页 |
| ·细胞冻存和复苏 | 第63-64页 |
| ·常规细胞培养 | 第64-65页 |
| ·肿瘤细胞球培养 | 第65页 |
| ·流式细胞检测 | 第65-66页 |
| ·RT-PCR方法和Western-blot方法检测p16基因表达情况 | 第66-68页 |
| ·RT-PCR检测 | 第66-67页 |
| ·pl6蛋白表达检测 | 第67-68页 |
| ·细胞体外侵袭实验 | 第68-69页 |
| ·裸鼠体内实验 | 第69页 |
| ·统计学分析 | 第69页 |
| 4 实验结果 | 第69-78页 |
| ·Hela细胞球细胞p16基因表达情况 | 第69-71页 |
| ·p16基因沉默的Hela干细胞标志物检测 | 第71-73页 |
| ·p16基因沉默对细胞成球能力的影响 | 第73-74页 |
| ·p16基因沉默对Hela细胞侵袭能力的影响 | 第74-76页 |
| ·p16基因沉默对Hela细胞体内成瘤的影响 | 第76-78页 |
| 5 讨论 | 第78-82页 |
| ·Hela肿瘤细胞球细胞高表达p16基因 | 第78-79页 |
| ·p16基因沉默可改变宫颈癌干细胞数量 | 第79-80页 |
| ·p16基因沉默不影响Hela细胞中CK17基因的表达 | 第80-81页 |
| ·p16基因沉默对Hela细胞体外侵袭能力的影响 | 第81-82页 |
| 6 小结 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-86页 |
| 综述 肿瘤干细胞和宫颈癌干细胞研究进展 | 第86-108页 |
| 1 肿瘤干细胞 | 第86-98页 |
| ·肿瘤干细胞的概念 | 第86-87页 |
| ·肿瘤干细胞的来源——肿瘤细胞还是成体干细胞? | 第87-88页 |
| ·肿瘤干细胞和放疗、化疗耐药的关系 | 第88-90页 |
| ·肿瘤干细胞和转移的关系 | 第90-92页 |
| ·肿瘤干细胞的标志物 | 第92-98页 |
| 2 宫颈癌干细胞研究进展 | 第98-101页 |
| ·宫颈储备细胞和宫颈癌干细胞的关系 | 第98-99页 |
| ·宫颈癌干细胞研究新展 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-108页 |
| 个人简历和在学期间发表的学术论文 | 第108-109页 |
| 个人简历 | 第108页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第108-109页 |
| 致谢 | 第109页 |
