重组唾液酸酶在转化多唾液酸神经节苷脂中的应用
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-28页 |
| ·神经节苷脂结构、分类及应用 | 第11-13页 |
| ·单唾液酸神经节苷脂(GM1)性质及作用 | 第13-15页 |
| ·GM1的制备 | 第15-18页 |
| ·GM1单体的分离纯化 | 第15页 |
| ·酸水解多唾液酸神经节苷脂 | 第15-16页 |
| ·微生物转化生成GM1 | 第16-17页 |
| ·唾液酸酶转化多唾液酸神经节苷脂 | 第17-18页 |
| ·唾液酸酶性质及纯化 | 第18-22页 |
| ·唾液酸酶简介 | 第18-20页 |
| ·唾液酸酶的活性测定 | 第20-21页 |
| ·唾液酸酶的纯化 | 第21-22页 |
| ·酶的固定化 | 第22-26页 |
| ·固定化酶的意义 | 第22-23页 |
| ·固定化酶的应用 | 第23-24页 |
| ·酶的固定化方法 | 第24-26页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第26页 |
| ·本课题研究意义及目的 | 第26-28页 |
| 第2章 产唾液酸酶细胞转化多唾液酸神经节苷脂 | 第28-40页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·菌种 | 第29页 |
| ·实验试剂 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·薄层层析试剂 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-32页 |
| ·重组大肠杆菌的构建 | 第30-31页 |
| ·微生物培养 | 第31页 |
| ·酶液的粗分 | 第31页 |
| ·唾液酸酶酶活的测定 | 第31页 |
| ·菌浓测定 | 第31页 |
| ·薄层层析 | 第31页 |
| ·重组菌产酶诱导条件优化 | 第31页 |
| ·重组菌3.7 L发酵罐发酵试验 | 第31-32页 |
| ·实验结果与分析 | 第32-39页 |
| ·重组大肠杆菌的构建 | 第32-35页 |
| ·重组大肠杆菌生长曲线 | 第35页 |
| ·荧光酶标仪荧光值线性范围 | 第35-36页 |
| ·诱导温度、诱导时间对产唾液酸酶影响 | 第36页 |
| ·诱导剂浓度、诱导时间对产唾液酸酶影响 | 第36-37页 |
| ·3.7L发酵罐发酵试验 | 第37-38页 |
| ·微生物转化多唾液酸神经节苷脂产GM1 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第3章 唾液酸酶转化多唾液酸神经节苷脂 | 第40-49页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·实验仪器 | 第40页 |
| ·实验试剂 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·唾液酸酶的分离纯化 | 第41页 |
| ·唾液酸酶酶活的测定 | 第41页 |
| ·蛋白质含量测定——Lowry法 | 第41-42页 |
| ·温度对唾液酸酶活性的影响 | 第42页 |
| ·pH对唾液酸酶活性的影响 | 第42-43页 |
| ·酶动力学性质 | 第43页 |
| ·唾液酸酶转化多唾液酸神经节苷脂 | 第43页 |
| ·实验结果与讨论 | 第43-48页 |
| ·唾液酸酶的分离纯化 | 第43-44页 |
| ·温度对唾液酸酶活性的影响 | 第44-46页 |
| ·pH对唾液酸酶活性的影响 | 第46页 |
| ·唾液酸酶的动力学常数 | 第46-47页 |
| ·唾液酸酶转化多唾液酸神经节苷脂 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 第4章 重组唾液酸酶的固定化 | 第49-62页 |
| ·引言 | 第49页 |
| ·实验仪器 | 第49页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·实验试剂 | 第49-50页 |
| ·固定化载体 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-53页 |
| ·固定化载体的处理 | 第50-51页 |
| ·固定化载体的选择 | 第51页 |
| ·固定化酶的酶活测定方法 | 第51页 |
| ·固定化条件的优化 | 第51页 |
| ·温度对固定化唾液酸酶活性的影响 | 第51-52页 |
| ·pH对固定化唾液酸酶活性的影响 | 第52页 |
| ·酶动力学性质 | 第52页 |
| ·固定化唾液酸酶转化多唾液酸神经节苷脂 | 第52-53页 |
| ·固定化唾液酸酶的使用稳定性 | 第53页 |
| ·固定化酶的贮存稳定性 | 第53页 |
| ·实验结果 | 第53-61页 |
| ·固定化载体的选择 | 第53页 |
| ·固定化条件的优化 | 第53-56页 |
| ·温度对固定化唾液酸酶活性的影响 | 第56-57页 |
| ·pH对固定化唾液酸酶活性的影响 | 第57-58页 |
| ·固定化唾液酸酶的动力学常数 | 第58-59页 |
| ·固定化唾液酸酶转化多唾液酸神经节苷脂 | 第59-60页 |
| ·固定化唾液酸酶的使用稳定性 | 第60-61页 |
| ·固定化唾液酸酶的贮存稳定性 | 第61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第5章 结论与展望 | 第62-64页 |
| ·结论 | 第62-63页 |
| ·讨论与展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 科研成果 | 第72页 |
