摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
引言 | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-30页 |
1、细胞周期调控研究进展 | 第16-22页 |
·细胞周期 | 第16-17页 |
·细胞周期调控因子 | 第17-20页 |
·细胞周期调控的分子机制 | 第20-22页 |
2、细胞周期蛋白研究进展 | 第22-28页 |
·CyclinD | 第22-23页 |
·CyclinE | 第23-24页 |
·CyclinA | 第24-25页 |
·CyclinB | 第25页 |
·细胞周期蛋白与肿瘤 | 第25-28页 |
3、家蚕细胞周期蛋白研究进展 | 第28页 |
4、研究展望 | 第28-30页 |
第二章 材料与方法 | 第30-39页 |
1、实验材料 | 第30-33页 |
·蚕品种、细胞、菌种与载体 | 第30页 |
·试剂盒与分子生物学试剂 | 第30页 |
·其他试剂 | 第30页 |
·培养基 | 第30-31页 |
·缓冲液和常用溶液 | 第31-33页 |
2、实验方法 | 第33-38页 |
·受体菌的培养 | 第33页 |
·家蚕卵巢系Bm N 的培养 | 第33-34页 |
·细胞转染 | 第34页 |
·质粒DNA 少量快速提取-碱法 | 第34页 |
·组织总RNA 的抽提 | 第34页 |
·RNA 反转录 | 第34-35页 |
·PCR 反应 | 第35页 |
·酶切反应 | 第35-36页 |
·连接反应 | 第36页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第36页 |
·感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
·连接产物的转化 | 第37-38页 |
3、实验常用仪器设备 | 第38-39页 |
第三章 家蚕细胞周期蛋白家族基因的克隆及结构特征与表达分析 | 第39-49页 |
1、材料与方法 | 第40-41页 |
·材料 | 第40页 |
·方法 | 第40-41页 |
2、结果与分析 | 第41-48页 |
·家蚕细胞周期蛋白家族基因的克隆及序列结构分析 | 第41-44页 |
·家蚕细胞周期蛋白家族基因的组织表达特异性分析 | 第44-45页 |
·家蚕与其他物种细胞周期蛋白家族基因的系统发育分析 | 第45-48页 |
3、讨论 | 第48-49页 |
第四章 家蚕细胞周期蛋白E 基因在5 龄幼虫组织表达的剪切变体和表达谱特征 | 第49-58页 |
1、材料与方法 | 第50-51页 |
·材料 | 第50页 |
·方法 | 第50-51页 |
2、结果与分析 | 第51-57页 |
·家蚕 CyclinE 基因的cDNA 克隆及序列分析 | 第51-53页 |
·家蚕CyclinE 基因在幼虫组织的表达谱分析 | 第53-54页 |
·家蚕与其他物种CyclinE 基因编码的同源氨基酸序列比对及系统进化分析 | 第54-57页 |
3、讨论 | 第57-58页 |
第五章 家蚕细胞周期蛋白家族基因在丝腺细胞中的表达谱分析 | 第58-66页 |
1、材料与方法 | 第59-61页 |
·材料 | 第59页 |
·方法 | 第59-61页 |
2、结果与分析 | 第61-64页 |
·荧光定量反应的标准曲线 | 第61页 |
·Cyclin 家族基因在正常饲养家蚕5 龄3 天幼虫丝腺组织中的转录水平.. | 第61-62页 |
·家蚕CyclinA 基因在5 龄3 天幼虫各组织中的转录水平 | 第62页 |
·家蚕CyclinB 基因在5 龄3 天幼虫各组织中的转录水平 | 第62-63页 |
·家蚕CyclinB3 基因在5 龄3 天幼虫各组织中的转录水平 | 第63页 |
·家蚕CyclinL1 基因在5 龄3 天幼虫各组织中的转录水平 | 第63-64页 |
3、讨论 | 第64-66页 |
第六章 外源物质对家蚕BmN 细胞周期蛋白家族基因转录水平的影响 | 第66-74页 |
1 材料与方法 | 第67-68页 |
·材料 | 第67-68页 |
·方法 | 第68页 |
2 结果与分析 | 第68-72页 |
·BmNPV 感染不同时间段对BmN 细胞形态的影响 | 第68-70页 |
·BmNPV 感染对家蚕BmN 细胞周期蛋白家族基因在转录水平上的影响 | 第70页 |
·蛹虫草水提取液对家蚕BmN 细胞的影响 | 第70-71页 |
·蛹虫草水提取液对家蚕BmN 细胞周期蛋白家族基因在转录水平上的影响 | 第71-72页 |
3 讨论 | 第72-74页 |
·BmNPV 感染BmN 后Cyclin 家族基因转录特点 | 第72页 |
·添加蛹虫草水提取液后,BmN Cyclin 家族基因转录特点 | 第72-73页 |
·基于Cyclin 家族基因转录水平研究BmN 生物学性状的意义 | 第73-74页 |
第七章 CyclinE 基因干扰RNA 对家蚕细胞增殖的影响 | 第74-81页 |
1 材料与方法 | 第75-76页 |
·材料 | 第75页 |
·方法 | 第75-76页 |
2 结果与分析 | 第76-79页 |
·转染效率的观察 | 第76-77页 |
·siRNA 对CyclinE 表达的抑制 | 第77-78页 |
·siRNA- cyclinE 对Bm N 细胞周期的影响 | 第78-79页 |
3 讨论 | 第79-81页 |
结论 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-93页 |
在研期间科研情况 | 第93-94页 |
致谢 | 第94-95页 |