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家蚕精巢蛋白表达谱分析及精子形成的相关研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 引言第13-17页
 1. 研究的目的和意义第13-14页
 2. 主要研究内容和技术路线第14-17页
   ·主要研究内容第14-16页
   ·实验研究技术路线第16-17页
第二章 文献综述第17-44页
 1. 家蚕是重要的模式生物第17-21页
   ·家蚕是人类对动物驯化养殖的一个成功典范第17页
   ·家蚕是遗传学研究的重要模式生物第17-18页
   ·家蚕是内分泌与发育生物学研究的模式第18页
   ·家蚕是现代生物技术不可或缺的工具第18-19页
   ·家蚕是鳞翅目害虫研究的首选典型模式第19页
   ·家蚕可开发为人类疾病的研究模型第19-20页
   ·开发家蚕作为医药、毒理学简易实验动物模型第20页
   ·推进家蚕模式化研究意义重大第20-21页
 2. 家蚕蛋白组学研究进展第21-36页
   ·蛋白质与蛋白质组学第21-22页
   ·家蚕蛋白质组研究进展第22-36页
 3. 家蚕精子形成与调控的研究进展第36-44页
   ·家蚕的精巢与精子形成第37-41页
   ·精子形成调控第41-42页
   ·家蚕精巢mRNA、蛋白组表达谱研究第42页
   ·生精囊体外培养系第42-43页
   ·讨论第43-44页
第三章 一般材料及方法第44-56页
 1. 材料和试剂第44-48页
   ·材料第44页
   ·实验试剂第44-45页
   ·实验仪器第45页
   ·主要试剂的配制第45-48页
 2. 方法第48-56页
   ·家蚕精巢解剖第48页
   ·总蛋白的提取及浓度测定第48页
   ·Bradford 法蛋白质定量第48-49页
   ·蛋白质纯化处理第49-50页
   ·总蛋白双向电泳分离第50-52页
   ·凝胶扫描及分析第52-53页
   ·蛋白点酶解第53页
   ·家蚕蛋白数据库与质谱分析第53-54页
   ·Shotgun LC MS/MS 法蛋白组鉴定的一般流程第54-56页
第四章 家蚕精巢蛋白组表达谱shotgun 法鉴定第56-66页
 1. 材料与方法第57-58页
   ·材料第57-58页
   ·方法第58页
 2. 结果与分析第58-65页
   ·精巢总蛋白SDS 电泳图谱第58页
   ·精巢蛋白组鉴定第58-59页
   ·V4 和P4 精巢蛋白的差异表达第59页
   ·鉴定蛋白的理论等电点和分子量分布第59-61页
   ·蛋白功能注释第61-63页
   ·V4 和P4 特异表达蛋白GO 分析第63-65页
 3. 讨论第65-66页
第五章 家蚕精巢蛋白组双向电泳分析第66-78页
 1 材料和方法第67页
 2. 结果与分析第67-74页
   ·家蚕5 龄不同阶段精巢总蛋白表达谱第67-68页
   ·家蚕5 龄起蚕(V0)和化蛾前(P8)精巢总蛋白的差异电泳分析第68-69页
   ·双向电泳图谱的mageMaster 2D Platinum 软件分析第69-71页
   ·不同时期精巢蛋白的等点点和分子量分布第71页
   ·电泳蛋白点的MALDI-TOF/TOF 质谱分析第71-74页
 3. 讨论第74-78页
第六章 家蚕精巢中热激蛋白、细胞周期蛋白家族基因转录水平分析第78-89页
 1. 材料与方法第79-81页
   ·材料第79页
   ·试剂第79页
   ·方法第79-81页
 2. 结果与分析第81-86页
   ·家蚕饲养第81-82页
   ·荧光实时定量PCR 反应的标准曲线第82-83页
   ·Hsps 家族基因的的转录表达水平第83-86页
 3. 讨论第86-89页
第七章 双酚A(BPA)对体外培养家蚕生精囊形成精子的影响第89-102页
 1. 材料和方法第90-91页
   ·材料第90页
   ·主要试剂及培养液配制第90页
   ·家蚕血清(BH, Bombyx hemolymph)制备第90页
   ·生精囊的体外培养第90-91页
   ·培养液中BPA 的添加方法第91页
   ·精子束的观察和调查法第91页
 2. 结果与分析第91-101页
   ·家蚕的精子形成过程第91-96页
   ·家蚕生精囊体外培养系中的精子形成第96-98页
   ·BPA 对生精囊体外培养系中精子精子形成的影响第98-101页
 3. 讨论第101-102页
结论第102-104页
参考文献第104-117页
附录第117-125页
攻读博士学位期间公开发表的论文、论著第125-126页
致谢第126-127页

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