摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 引言 | 第13-17页 |
1. 研究的目的和意义 | 第13-14页 |
2. 主要研究内容和技术路线 | 第14-17页 |
·主要研究内容 | 第14-16页 |
·实验研究技术路线 | 第16-17页 |
第二章 文献综述 | 第17-44页 |
1. 家蚕是重要的模式生物 | 第17-21页 |
·家蚕是人类对动物驯化养殖的一个成功典范 | 第17页 |
·家蚕是遗传学研究的重要模式生物 | 第17-18页 |
·家蚕是内分泌与发育生物学研究的模式 | 第18页 |
·家蚕是现代生物技术不可或缺的工具 | 第18-19页 |
·家蚕是鳞翅目害虫研究的首选典型模式 | 第19页 |
·家蚕可开发为人类疾病的研究模型 | 第19-20页 |
·开发家蚕作为医药、毒理学简易实验动物模型 | 第20页 |
·推进家蚕模式化研究意义重大 | 第20-21页 |
2. 家蚕蛋白组学研究进展 | 第21-36页 |
·蛋白质与蛋白质组学 | 第21-22页 |
·家蚕蛋白质组研究进展 | 第22-36页 |
3. 家蚕精子形成与调控的研究进展 | 第36-44页 |
·家蚕的精巢与精子形成 | 第37-41页 |
·精子形成调控 | 第41-42页 |
·家蚕精巢mRNA、蛋白组表达谱研究 | 第42页 |
·生精囊体外培养系 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
第三章 一般材料及方法 | 第44-56页 |
1. 材料和试剂 | 第44-48页 |
·材料 | 第44页 |
·实验试剂 | 第44-45页 |
·实验仪器 | 第45页 |
·主要试剂的配制 | 第45-48页 |
2. 方法 | 第48-56页 |
·家蚕精巢解剖 | 第48页 |
·总蛋白的提取及浓度测定 | 第48页 |
·Bradford 法蛋白质定量 | 第48-49页 |
·蛋白质纯化处理 | 第49-50页 |
·总蛋白双向电泳分离 | 第50-52页 |
·凝胶扫描及分析 | 第52-53页 |
·蛋白点酶解 | 第53页 |
·家蚕蛋白数据库与质谱分析 | 第53-54页 |
·Shotgun LC MS/MS 法蛋白组鉴定的一般流程 | 第54-56页 |
第四章 家蚕精巢蛋白组表达谱shotgun 法鉴定 | 第56-66页 |
1. 材料与方法 | 第57-58页 |
·材料 | 第57-58页 |
·方法 | 第58页 |
2. 结果与分析 | 第58-65页 |
·精巢总蛋白SDS 电泳图谱 | 第58页 |
·精巢蛋白组鉴定 | 第58-59页 |
·V4 和P4 精巢蛋白的差异表达 | 第59页 |
·鉴定蛋白的理论等电点和分子量分布 | 第59-61页 |
·蛋白功能注释 | 第61-63页 |
·V4 和P4 特异表达蛋白GO 分析 | 第63-65页 |
3. 讨论 | 第65-66页 |
第五章 家蚕精巢蛋白组双向电泳分析 | 第66-78页 |
1 材料和方法 | 第67页 |
2. 结果与分析 | 第67-74页 |
·家蚕5 龄不同阶段精巢总蛋白表达谱 | 第67-68页 |
·家蚕5 龄起蚕(V0)和化蛾前(P8)精巢总蛋白的差异电泳分析 | 第68-69页 |
·双向电泳图谱的mageMaster 2D Platinum 软件分析 | 第69-71页 |
·不同时期精巢蛋白的等点点和分子量分布 | 第71页 |
·电泳蛋白点的MALDI-TOF/TOF 质谱分析 | 第71-74页 |
3. 讨论 | 第74-78页 |
第六章 家蚕精巢中热激蛋白、细胞周期蛋白家族基因转录水平分析 | 第78-89页 |
1. 材料与方法 | 第79-81页 |
·材料 | 第79页 |
·试剂 | 第79页 |
·方法 | 第79-81页 |
2. 结果与分析 | 第81-86页 |
·家蚕饲养 | 第81-82页 |
·荧光实时定量PCR 反应的标准曲线 | 第82-83页 |
·Hsps 家族基因的的转录表达水平 | 第83-86页 |
3. 讨论 | 第86-89页 |
第七章 双酚A(BPA)对体外培养家蚕生精囊形成精子的影响 | 第89-102页 |
1. 材料和方法 | 第90-91页 |
·材料 | 第90页 |
·主要试剂及培养液配制 | 第90页 |
·家蚕血清(BH, Bombyx hemolymph)制备 | 第90页 |
·生精囊的体外培养 | 第90-91页 |
·培养液中BPA 的添加方法 | 第91页 |
·精子束的观察和调查法 | 第91页 |
2. 结果与分析 | 第91-101页 |
·家蚕的精子形成过程 | 第91-96页 |
·家蚕生精囊体外培养系中的精子形成 | 第96-98页 |
·BPA 对生精囊体外培养系中精子精子形成的影响 | 第98-101页 |
3. 讨论 | 第101-102页 |
结论 | 第102-104页 |
参考文献 | 第104-117页 |
附录 | 第117-125页 |
攻读博士学位期间公开发表的论文、论著 | 第125-126页 |
致谢 | 第126-127页 |