| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 本文部分缩写的中英文对照 | 第15-17页 |
| 引言 | 第17-19页 |
| 第一篇 文献综述 | 第19-55页 |
| 第一章 益生乳酸杆菌研究进展 | 第19-31页 |
| 1 乳酸杆菌的粘附作用 | 第19-22页 |
| ·乳酸杆菌与粘附有关的生物活性成分 | 第19-20页 |
| ·表面蛋白(surface layer protein,SLP) | 第19-20页 |
| ·其它表面粘附成分 | 第20页 |
| ·乳酸杆菌粘附机制 | 第20-21页 |
| ·乳酸杆菌粘附生物学效应 | 第21-22页 |
| 2 乳酸杆菌的免疫调节作用 | 第22-24页 |
| ·乳酸杆菌的黏膜屏障功能 | 第22页 |
| ·乳酸杆菌对免疫细胞的影响 | 第22-24页 |
| ·乳酸杆菌对树突状细胞的影响 | 第22-23页 |
| ·乳酸杆菌对其它免疫细胞的影响 | 第23-24页 |
| ·乳酸杆菌对黏膜免疫分子的影响 | 第24页 |
| 3 乳酸杆菌作为药物与抗原分子载体 | 第24-25页 |
| ·乳酸杆菌作为载体的特点 | 第24-25页 |
| ·重组乳酸杆菌在消化道、呼吸道及生殖道疾病的治疗作用 | 第25页 |
| ·重组乳酸杆菌对肠道疾病的预防与治疗作用 | 第25页 |
| 参考文献 | 第25-31页 |
| 第二章 仔猪肠道黏膜免疫系统的发育 | 第31-45页 |
| 1 仔猪消化道黏膜免疫系统的组成 | 第31-35页 |
| ·诱导部位 | 第32-33页 |
| ·肠集合淋巴结(Peyer's Patches,PP) | 第32-33页 |
| ·微皱褶细胞(microfold cell,M cell) | 第33页 |
| ·效应部位 | 第33-34页 |
| ·上皮内淋巴细胞(intraepithelial lymphocytes,IELs) | 第33-34页 |
| ·固有层淋巴细胞(1amina propria lymphocyte,LPL) | 第34页 |
| ·肠道菌群 | 第34-35页 |
| 2 肠黏膜免疫相关分子 | 第35-37页 |
| ·分泌型免疫球蛋白(secretory immunoglobulin,SIgA) | 第35页 |
| ·Toll样受体(toll-like receptor,TLRs) | 第35-36页 |
| ·防御素(defensin) | 第36-37页 |
| ·细胞因子(cytokine) | 第37页 |
| 3 仔猪肠黏膜系统的发育 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-45页 |
| 第三章 仔猪肠道菌群的定植及其功能 | 第45-55页 |
| 1 猪胃肠道菌群的组成 | 第45-47页 |
| ·胃的微生物 | 第45页 |
| ·小肠的微生物 | 第45-46页 |
| ·大肠的微生物 | 第46页 |
| ·猪肠道内具有重要作用的微生物 | 第46-47页 |
| 2 仔猪胃肠道菌群的发育 | 第47-48页 |
| ·新生仔猪的肠道菌群 | 第47-48页 |
| ·哺乳期仔猪的肠道菌群 | 第48页 |
| ·断乳仔猪肠道菌群 | 第48页 |
| 3 肠道菌群对仔猪黏膜免疫系统的影响 | 第48-50页 |
| ·天然屏障作用 | 第48-49页 |
| ·肠道菌群对黏膜免疫系统的影响 | 第49-50页 |
| ·肠道菌群对疾病的预防和治疗作用 | 第50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 第二篇 试验研究 | 第55-123页 |
| 第一章 猪源乳酸杆菌的分离与鉴定 | 第55-69页 |
| 1. 材料与方法 | 第56-59页 |
| ·样品来源与菌株的初步筛选 | 第56页 |
| ·乳酸杆菌属特异PCR鉴定 | 第56-57页 |
| ·LD-乳酸的测定 | 第57页 |
| ·抗生素敏感试验 | 第57页 |
| ·粘附试验 | 第57-58页 |
| ·PCR-DGGE检测乳酸杆菌在猪体内的分布 | 第58-59页 |
| ·猪源乳酸杆菌的分子鉴定 | 第59页 |
| 2 结果 | 第59-63页 |
| ·乳酸杆菌的筛选 | 第59-60页 |
| ·乳酸杆菌产酸能力 | 第60页 |
| ·乳酸杆菌的抗生素敏感性 | 第60-61页 |
| ·乳酸杆菌与Caco-2细胞的粘附性 | 第61页 |
| ·分离菌株在猪十二指肠黏膜的分布情况 | 第61-62页 |
| ·乳酸杆菌分子鉴定 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 第二章 L.salivarius B1对仔猪小肠发育的影响 | 第69-81页 |
| 1 材料与方法 | 第70-72页 |
| ·主要试剂 | 第70页 |
| ·试验菌株的培养和菌液安全性试验 | 第70页 |
| ·仔猪饲养与菌液饲喂 | 第70-71页 |
| ·母猪母乳抑菌作用的检测 | 第71页 |
| ·样品采集 | 第71页 |
| ·肠绒毛高度和肠上皮内淋巴细胞数量的测定 | 第71-72页 |
| ·IgA分泌细胞的检测 | 第72页 |
| ·数据分析与处理 | 第72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-76页 |
| ·菌液安全试验 | 第72-73页 |
| ·L. salivarius B1对仔猪日增重的影响 | 第73页 |
| ·L. salivarius B1对仔猪肠组织形态的影响 | 第73-74页 |
| ·L. salivarius B1对仔猪肠道IEL数量的影响 | 第74-75页 |
| ·L. salivarius B1对仔猪肠道IgA分泌细胞的影响 | 第75-76页 |
| 3 讨论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-81页 |
| 第三章 L. salivarius B1在仔猪肠道定植及对肠道菌群的影响 | 第81-93页 |
| 1 材料与方法 | 第82-85页 |
| ·选择性培养基 | 第82页 |
| ·菌液的饲喂与样品采集 | 第82页 |
| ·肠道菌活菌计数 | 第82-83页 |
| ·黏膜组织及粪便中总细菌DNA的提取 | 第83页 |
| ·DGGE分析L. salivarius在十二指肠黏膜的定植 | 第83-84页 |
| ·Real-time PCR检测L. salivarius在仔猪十二指肠上的定植 | 第84页 |
| ·数据分析 | 第84-85页 |
| 2 结果 | 第85-88页 |
| ·L. salivarius B1对仔猪粪便菌群的影响 | 第85-87页 |
| ·PCR-DGGE分析L salivarius B1在仔猪小肠黏膜定植 | 第87-88页 |
| ·Real-time PCR定量分析L. salivarius在十二指肠黏膜的定植 | 第88页 |
| 3 讨论 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-93页 |
| 第四章 L. salivarius B1早期定植对仔猪肠道β-防御素和细胞因子分泌的影响 | 第93-103页 |
| 1 材料与方法 | 第94-96页 |
| ·试验设计与样品采取 | 第94页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第94页 |
| ·肠黏膜组织中RNA的提取及反转录 | 第94页 |
| ·仔猪肠道pBD-2及细胞因子基因表达的影响 | 第94-95页 |
| ·ELISA方法测定唾液及肠黏膜组织pBD-2水平 | 第95-96页 |
| ·数据分析 | 第96页 |
| 2 结论 | 第96-98页 |
| ·L. salivarius B1对仔猪肠黏膜pBD-2表达的影响 | 第96页 |
| ·L. salivarius B1对仔猪肠黏膜细胞因子表达的影响 | 第96-97页 |
| ·L. salivarius B1对消化道中pBD-2含量的影响 | 第97-98页 |
| 3 讨论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-103页 |
| 第五章 L. salivarius B1早期定植对仔猪肠道免疫细胞TLR表达的影响 | 第103-113页 |
| 1 材料与方法 | 第104-106页 |
| ·动物试验设计 | 第104页 |
| ·样品采集 | 第104页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第104页 |
| ·组织RNA提取及反转录 | 第104页 |
| ·Real-time PCR检测仔猪小肠中TLR2和TLR9 mRNA | 第104-105页 |
| ·Western-Blot检测仔猪小肠中TLR2和TLR9蛋白表达 | 第105-106页 |
| ·数据统计与分析 | 第106页 |
| 2 结果 | 第106-108页 |
| ·L.salivariusB1对肠道TLR2基因表达的影响 | 第106页 |
| ·L.salivariusB1对肠道TLR9基因表达的影响 | 第106-107页 |
| ·L.salivarius B1对TLR2蛋白表达的影响 | 第107-108页 |
| ·L.salivarius B1对TLR9蛋白表达的影响 | 第108页 |
| 3 讨论 | 第108-110页 |
| 参考文献 | 第110-113页 |
| 第六章 L.salivarius B1对仔猪抵抗E.coli K88感染的影响 | 第113-123页 |
| 1 材料与方法 | 第114-115页 |
| ·E.coli菌液制备 | 第114页 |
| ·E.coli毒性试验 | 第114页 |
| ·仔猪断奶期粪便情况评分 | 第114页 |
| ·仔猪接种E.coli K88后粪便评分 | 第114-115页 |
| ·样品采集 | 第115页 |
| ·组织切片制备和H.E染色 | 第115页 |
| ·黏膜细胞因子基因表达测定 | 第115页 |
| ·数据统计与分析 | 第115页 |
| 2 结果 | 第115-118页 |
| ·E.coli K88毒性试验结果 | 第115-116页 |
| ·L.salivarius B1早期定植对仔猪断奶腹泻的影响 | 第116-117页 |
| ·L.salivarius B1对断奶仔猪抵抗E.coli K88感染的影响 | 第117-118页 |
| ·L.salivarius B1对E.coli K88感染仔猪细胞因子表达的影响 | 第118页 |
| 3 讨论 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-123页 |
| 全文结论 | 第123-125页 |
| 本文创新点 | 第125-127页 |
| 附录Ⅰ 部分乳酸杆菌Genbank登陆序列号 | 第127-128页 |
| 附录Ⅱ 部分乳酸杆菌图片 | 第128-129页 |
| 博士期间发表和完成的论文 | 第129-131页 |
| 致谢 | 第131页 |
