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猪链球菌对四环素耐药机制的研究及耐药基因三重PCR检测方法的建立

缩略词第1-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 引言第12-29页
   ·猪链球菌研究进展第12-18页
     ·猪链球菌的血清型第12页
     ·猪链球菌的毒力因子第12页
     ·猪球菌流行病学特征第12-18页
   ·兽医临床常用的四环素类第18-20页
     ·土霉素(Oxytetracycline)第18-19页
     ·四环素(Tetracycline)第19-20页
     ·多西环素(Doxycycline)第20页
   ·猪链球菌的耐药现状第20-21页
   ·猪链球菌对四环素类药物耐药现状第21-23页
     ·国外猪链球菌对四环素类药物耐药现状第21-22页
     ·国内猪链球菌对四环素类药物耐药现状第22-23页
   ·猪链球菌对四环素类抗生素的耐药机制第23-26页
     ·外排泵蛋白(Efflux protein)第23-24页
     ·核糖体保护蛋白(Ribosomal protection proteins,RPPs)第24-25页
     ·耐药基因的表达和调节第25页
     ·tet 基因的分布及转移第25-26页
   ·多重PCR 技术第26-29页
     ·多重PCR 的技术要素第26-27页
     ·多重PCR 技术的应用第27-29页
2 材料和方法第29-39页
   ·猪链球菌耐药性的研究第29-32页
     ·材料第29-31页
     ·方法第31-32页
       ·细菌培养与菌液制备第31页
       ·药敏试验第31-32页
   ·猪链球菌对四环素耐药机制的研究第32-35页
     ·材料第32-33页
     ·方法第33-35页
       ·最低抑菌浓度(MIC)的测定第33-34页
       ·四环素耐药基因的检测第34页
       ·PCR 产物的纯化回收第34页
       ·耐药基因的克隆、酶切鉴定第34页
       ·耐药基因的测序及序列分析第34-35页
   ·四环素耐药基因tet (M)、tet(O)、tet(L)三重PCR 检测方法的建立第35-39页
     ·材料第35-36页
     ·方法第36-39页
       ·引物设计第36页
       ·模板的制备第36页
       ·单项PCR 扩增条件的优化第36-37页
       ·测序分析第37页
       ·三重PCR 扩增条件的优化第37-38页
       ·特异性试验第38页
       ·敏感性试验第38页
       ·三重PCR 方法与药敏试验符合率检测第38-39页
3 结果与分析第39-48页
   ·猪链球菌耐药性的研究第39-41页
     ·耐药率检测结果第39页
     ·耐药率与地区统计结果第39-40页
     ·多重耐药检测结果第40-41页
   ·猪链球菌对四环素耐药机制的研究第41-43页
     ·最低抑菌浓度(MIC)结果第41页
     ·耐药基因检测结果第41页
     ·耐药性和耐药基因的关系第41-42页
     ·耐药基因序列比对和同源性分析结果第42-43页
       ·tet(M)基因序列比对结果第42-43页
       ·tet(O)基因序列比对结果第43页
   ·四环素耐药基因tet (M)、tet(O)、tet(L)三重PCR 检测方法的建立第43-48页
     ·单项PCR 方法的建立和产物序列分析第43-44页
       ·单项PCR 方法的建立第43-44页
       ·扩增产物序列分析第44页
     ·三重PCR 扩增条件的确立第44-46页
       ·最佳退火温度第44页
       ·最佳引物浓度第44-45页
       ·最佳dNTP 浓度第45-46页
     ·三重PCR 检测的特异性第46页
     ·三重PCR 检测的敏感性第46-47页
     ·三重PCR 方法与药敏试验符合率检测结果第47-48页
4 讨论第48-52页
结论第52-53页
参考文献第53-61页
致谢第61-62页
论文发表情况第62-63页
 硕士学位论文内容简介及自评第63页

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