摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
第1章 综述 | 第10-24页 |
·引言 | 第10页 |
·microRNA 基因 | 第10-12页 |
·microRNA 的发现过程 | 第10-11页 |
·miRNA 基因的结构特征 | 第11-12页 |
·miRNA 的生物合成 | 第12-16页 |
·miRNA 生物发生的基本概况 | 第12-13页 |
·miRNA 加工的核内过程 | 第13-14页 |
·microRNA 加工蛋白 | 第14-15页 |
·微处理器对 pri-miRNA 的剪切机制 | 第15页 |
·pre-miRNA 的细胞核输出 | 第15-16页 |
·microRNA 的作用机制 | 第16-18页 |
·miRNA 指导靶 mRNA 的切割 | 第16页 |
·翻译抑制 | 第16-17页 |
·靶分子的识别 | 第17页 |
·快速脱腺苷酸化 | 第17-18页 |
·miRNA 与 siRNA 的异同 | 第18页 |
·microRNA 的生物学功能 | 第18-20页 |
·miRNA 在动物中的作用 | 第18-19页 |
·miRNA 在植物中的作用 | 第19-20页 |
·与人类疾病相关的 miRNA | 第20页 |
·miRNA 的命名和界定 | 第20-21页 |
·miRNA 的界定 | 第20-21页 |
·miRNA 的命名 | 第21页 |
·microRNA 的研究方法 | 第21-22页 |
·microRNA 的实验 RNA 组学方法 | 第21-22页 |
·Northern 杂交 | 第21页 |
·原位杂交 | 第21-22页 |
·miRNA 表达谱芯片 | 第22页 |
·基于核酶保护分析技术 | 第22页 |
·microRNA 的计算机 RNA 组学方法 | 第22页 |
·本论文的研究目的与意义 | 第22-24页 |
第2章 材料与方法 | 第24-34页 |
·材料 | 第24-25页 |
·使用的数据库 | 第24页 |
·供试犬类品种 | 第24页 |
·主要仪器和设备 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-34页 |
·microRNA 的计算机分析 | 第25-26页 |
·microRNA 同源基因的搜索 | 第25页 |
·新的 microRNA 基因的预测 | 第25页 |
·microRNA 的基因组织分析 | 第25页 |
·microRNA 的进化分析 | 第25-26页 |
·microRNA 基因的靶序列预测 | 第26页 |
·狗肝中总 RNA 的提取(热酚法) | 第26-28页 |
·试剂和材料 | 第26页 |
·实验步骤 | 第26-27页 |
·甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测 RNA | 第27-28页 |
·基因组 DNA 的提取(玻璃珠法) | 第28-30页 |
·试剂 | 第28页 |
·实验步骤 | 第28-30页 |
·RNA 中的 DNA 的酶解 | 第30页 |
·RNA 的逆转录反应 | 第30-31页 |
·PCR 反应及其产物鉴定 | 第31-34页 |
第3章 结果 | 第34-89页 |
·300 个同源 microRNA 基因的发现 | 第34-50页 |
·新的 microRNA 分子的鉴定 | 第50-54页 |
·microRNA 分子的基因组织形式 | 第54-58页 |
·microRNA 分子的进化 | 第58-61页 |
·microRNA 靶序列的鉴定 | 第61-86页 |
·microRNA 的表达分析 | 第86-89页 |
·狗总 RNA 提取结果 | 第86-87页 |
·狗基因组 DNA 提取结果 | 第87-88页 |
·RT-PCR 结果 | 第88-89页 |
第4章 讨论 | 第89-93页 |
·计算机 RNA 组学是鉴定 microRNA 快速、高效的方法 | 第89-90页 |
·microRNA 具有多样的基因组织形式 | 第90-91页 |
·microRNA 进化的机制 | 第91页 |
·miR-186 与靶序列共表达的进化机制 | 第91页 |
·microRNA 的功能多样性 | 第91-92页 |
·microRNA 表达的时空特异性 | 第92-93页 |
致谢 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-99页 |
附录A: 人基因组中尚未发现同源序列的人小分子 RNA | 第99-101页 |
附录B: MICRORNA与靶序列完全互补 | 第101-103页 |
附录C:缩略词 | 第103-104页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第104页 |