| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一部分 材料与方法 | 第14-32页 |
| 1 材料 | 第14-21页 |
| ·实验材料 | 第14页 |
| ·菌株和载体 | 第14-15页 |
| ·主要试剂 | 第15-16页 |
| ·试剂配方 | 第16-21页 |
| ·细菌培养基 | 第16-17页 |
| ·油菜组培及转化培养基 | 第17-19页 |
| ·抗生素的配制 | 第19-20页 |
| ·激素的配制及其它配制 | 第20页 |
| ·碱裂解法提取质粒溶液 | 第20-21页 |
| ·植物总DNA提取溶液 | 第21页 |
| ·DNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第21页 |
| 2 方法 | 第21-32页 |
| ·植物转基因载体的构建 | 第21-24页 |
| ·目的基因片段的获得 | 第21-22页 |
| ·pBI121载体片段的获得 | 第22-24页 |
| ·重组质粒的构建 | 第24页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第24页 |
| ·根癌农杆菌 EHA105阳性转化子的获得 | 第24-28页 |
| ·pBI121-Sad重组质粒载体的获得 | 第24-26页 |
| ·转化农杆菌EHA105 | 第26-28页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第28-32页 |
| ·无菌苗的获取 | 第28页 |
| ·下胚轴的预培养 | 第28-29页 |
| ·下胚轴的浸染及共培养 | 第29页 |
| ·诱导愈伤与筛选生芽 | 第29页 |
| ·生根培养与炼苗 | 第29页 |
| ·转基因油菜的PCR检测 | 第29-32页 |
| 第二部分 结果与分析 | 第32-38页 |
| 1 pBI121载体双酶切 | 第32页 |
| 2 植物正义和反义表达载体重组质粒的鉴定 | 第32-33页 |
| 3 阳性农杆菌转化子的鉴定 | 第33-34页 |
| 4 植物叶片总DNA的提取 | 第34-35页 |
| 5 Kan抗性油菜PCR检测结果 | 第35-36页 |
| ·正向转基因苗检测结果 | 第35-36页 |
| ·反向转基因苗检测结果 | 第36页 |
| 6 炼苗、移栽大田 | 第36页 |
| 7 进一步的工作 | 第36-37页 |
| 8 图版 | 第37-38页 |
| 第三部分 讨论与结论 | 第38-45页 |
| 1 讨论 | 第38-44页 |
| ·油菜植株再生系统的优化 | 第38-39页 |
| ·最佳外植体的确定 | 第38页 |
| ·培养条件的优化 | 第38-39页 |
| ·农杆菌转化体系的优化 | 第39-41页 |
| ·农杆菌的活化 | 第39-40页 |
| ·菌液浸泡浓度与时间对转化频率的影响 | 第40页 |
| ·酚类化合物浓度对外植体抗性芽产生的影响 | 第40-41页 |
| ·AgNO_3的添加 | 第41-42页 |
| ·激素对下胚轴再生芽形成的影响 | 第42页 |
| ·卡那酶素起始浓度对油菜下胚轴抗性芽产生率的影响 | 第42-43页 |
| ·对转基因阳性植株的稳定性分析 | 第43-44页 |
| 2 结论与展望 | 第44-45页 |
| ·建立了高效的油菜转化体系 | 第44页 |
| ·获得了抗卡那霉素的再生转基因植株 | 第44页 |
| ·后续的工作及展望 | 第44-45页 |
| 文献综述 | 第45-65页 |
| 1 植物防御素的研究进展 | 第45-51页 |
| ·抗菌肽 | 第45-46页 |
| ·植物抗菌肽 | 第46页 |
| ·植物防御素 | 第46-50页 |
| ·植物防御素氨基酸的组成 | 第47页 |
| ·植物防御素的结构 | 第47页 |
| ·植物防御素的分类 | 第47-48页 |
| ·植物防御素的产生机理 | 第48页 |
| ·防御素的作用机制 | 第48-49页 |
| ·植物防御素的生理功能 | 第49-50页 |
| ·抗菌肽转基因工程局限 | 第50-51页 |
| ·抗菌肽对转基因植物生长的影响 | 第50页 |
| ·抗菌肽对转基因植物表型的影响 | 第50-51页 |
| ·存在的问题与展望 | 第51页 |
| 2 农杆菌介导的油菜转基因研究进展 | 第51-61页 |
| ·根癌农杆菌介导的基因转化机理 | 第52-54页 |
| ·Ti质拉载体系统 | 第52-53页 |
| ·T-DNA的转移及其相关基因 | 第53-54页 |
| ·影响转化效率的主要因素 | 第54-57页 |
| ·植物的基因型 | 第54-55页 |
| ·外植体及其生理状态 | 第55-56页 |
| ·农杆菌菌株对转化效果的影响 | 第56页 |
| ·外植体与农杆菌共培养条件对转化效果的影响 | 第56-57页 |
| ·抗生素对转化的影响 | 第57页 |
| ·转基因植株的筛选 | 第57-58页 |
| ·芸苔属植物转基因的遗传与表达 | 第58页 |
| ·国内外主要研究现状 | 第58-59页 |
| ·存在的主要问题及展望 | 第59-61页 |
| ·提高外源基因转化率并建立高频再生体系 | 第59页 |
| ·提高对转基因油菜中外源基因的表达的调控及其遗传稳定性 | 第59-60页 |
| ·与传统常规育种相结合 | 第60页 |
| ·转基因油菜的安全性问题 | 第60-61页 |
| 3 转基因植株鉴定 | 第61-65页 |
| ·外源基因整合的鉴定 | 第61-62页 |
| ·外源基因转录水平的鉴定 | 第62页 |
| ·外源基因表达蛋白的检测 | 第62-63页 |
| ·报告基因的酶法检测 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 在读期间的科研成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |