摘要 | 第1-3页 |
ABSTRACT | 第3-7页 |
引言 | 第7-9页 |
第一章 河豚毒素免疫检测技术研究进展 | 第9-16页 |
·河豚毒素简介 | 第9页 |
·河豚毒素检测技术研究进展 | 第9-11页 |
·传统检测技术 | 第9-10页 |
·快速检测技术 | 第10-11页 |
·免疫检测技术在河豚毒素检测中的应用现状 | 第11-16页 |
·河豚毒素免疫检测技术研究现状 | 第11-13页 |
·河豚毒素免疫检测技术的研究现状总结 | 第13-14页 |
·河豚毒素免疫检测技术的展望 | 第14-16页 |
第二章 河豚毒素完全抗原的制备 | 第16-25页 |
·材料与设备 | 第16-17页 |
·主要实验试剂 | 第16页 |
·主要实验设备 | 第16-17页 |
·主要溶液配制 | 第17页 |
·实验方法 | 第17-19页 |
·河豚毒素包被抗原(BSA‐TTX)的制备及制备条件的优化 | 第17-18页 |
·河豚毒素免疫抗原(OVA‐TTX、KLH‐TTX)的制备 | 第18页 |
·河豚毒素完全抗原的表征 | 第18-19页 |
·偶联率的确定 | 第19页 |
·结果与讨论 | 第19-24页 |
·载体蛋白(BSA)与河豚毒素偶联物的表征体系 | 第19-21页 |
·最佳偶联时间的确定 | 第21页 |
·偶联剂最佳添加量的确定 | 第21-22页 |
·最佳TTX 与BSA 质量比的确定 | 第22-23页 |
·载体蛋白OVA 与河豚毒素偶联物的表征体系 | 第23页 |
·载体蛋白KLH 与河豚毒素偶联物的表征体系 | 第23-24页 |
·偶联率的计算 | 第24页 |
·小结 | 第24-25页 |
第三章 河豚毒素单克隆抗体的制备 | 第25-44页 |
第一节 河豚毒素单克隆抗体的制备与鉴定 | 第25-40页 |
·材料与设备 | 第25-26页 |
·主要实验试剂 | 第25页 |
·实验动物和细胞 | 第25页 |
·主要实验设备 | 第25-26页 |
·主要溶液配制 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-35页 |
·河豚毒素完全抗原免疫方案 | 第26-27页 |
·免疫小鼠血清抗体效价的检测 | 第27页 |
·SP2/0 骨髓瘤细胞的培养 | 第27-28页 |
·细胞融合方法 | 第28-29页 |
·杂交瘤细胞的筛选 | 第29-30页 |
·杂交瘤细胞株的克隆(有限稀释克隆法) | 第30页 |
·单克隆抗体(细胞上清液中)特异性的检测 | 第30-31页 |
·单克隆抗体类型的鉴定 | 第31页 |
·单克隆抗体的大量制备 | 第31-32页 |
·单克隆抗体的纯化 | 第32-33页 |
·单克隆抗体浓度的测定 | 第33页 |
·河豚毒素单克隆抗体特异性抑制曲线的测定 | 第33-34页 |
·测定单克隆抗体的交叉反应 | 第34-35页 |
·结果与讨论 | 第35-39页 |
·免疫小鼠血清抗体效价的检测 | 第35页 |
·杂交瘤细胞阳性反应率的检测 | 第35-36页 |
·杂交瘤细胞筛选结果 | 第36页 |
·单克隆抗体(细胞上清液中)特异性的检测 | 第36页 |
·单克隆抗体类型的鉴定 | 第36-37页 |
·单克隆抗体浓度的测定 | 第37-38页 |
·TTX 对单克隆抗体的抑制性 | 第38页 |
·单克隆抗体特异性的检测 | 第38-39页 |
·小结 | 第39-40页 |
第二节 不同载体蛋白对单克隆抗体制备的影响 | 第40-44页 |
·载体蛋白氨基酸序列的获得 | 第40页 |
·载体蛋白氨基酸序列的分析比较 | 第40-42页 |
·不同载体蛋白对单克隆抗体制备的影响 | 第42-43页 |
·小结 | 第43-44页 |
结论和展望 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
附录 | 第48-49页 |
致谢 | 第49页 |