摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-50页 |
引言 | 第16-18页 |
·绵羊的起源、细毛羊品种分类及新疆细毛羊遗传资源现状 | 第18-20页 |
·绵羊的起源及细毛羊品种分类 | 第18-19页 |
·绵羊的起源 | 第18页 |
·绵羊品种分类 | 第18-19页 |
·新疆细毛羊的遗传资源现状 | 第19-20页 |
·绵羊的基因组研究 | 第20-35页 |
·绵羊基因组的研究 | 第21-23页 |
·绵羊的基因组图谱 | 第23-30页 |
·绵羊的遗传连锁图谱 | 第23-25页 |
·绵羊的物理图谱 | 第25-29页 |
·基因图谱在动物遗传育种中的应用 | 第29-30页 |
·比较基因组学与绵羊的比较图谱 | 第30-32页 |
·主要组织相容性复合体(MHC)基因 | 第32-35页 |
·BAC文库及其在基因组学中的应用 | 第35-45页 |
·DNA克隆载体的发展与应用 | 第35-37页 |
·质粒载体必须具备的基本条件 | 第35页 |
·质粒载体的选择记号 | 第35-36页 |
·YAC载体 | 第36-37页 |
·P1克隆和源于P1的PAC载体 | 第37页 |
·BAC载体概述 | 第37-39页 |
·BAC载体的发展历史 | 第39-42页 |
·BAC文库的构建方法 | 第42页 |
·BAC文库的筛选方法 | 第42-43页 |
·PCR筛选系统 | 第42-43页 |
·HD杂交膜筛选系统 | 第43页 |
·BAC文库的参数 | 第43-44页 |
·基因组覆盖率(genome equivalent,GE) | 第43页 |
·嵌合体比率 | 第43-44页 |
·BAC文库的应用 | 第44-45页 |
·微卫星、STS等分子遗传标记在动物遗传育种中的应用 | 第45-48页 |
·遗传标记的种类 | 第45-46页 |
·遗传标记的概念 | 第45-46页 |
·分子标记的种类 | 第46页 |
·微卫星分子遗传标记在绵羊育种中的应用 | 第46-47页 |
·微卫星DNA | 第46页 |
·微卫星在绵羊基因定位及构建基因图谱中的应用 | 第46-47页 |
·STS(Sequence Tagged Sites) | 第47-48页 |
·脉冲电场凝胶电泳 | 第48-50页 |
第二章 本项目的研究意义和立题依据 | 第50-53页 |
·研究意义 | 第50-51页 |
·立题依据 | 第51-52页 |
·总技术路线 | 第52-53页 |
第三章 材料和方法 | 第53-68页 |
·主要试剂 | 第53页 |
·常规试剂 | 第53-54页 |
·主要仪器 | 第54页 |
·新疆军垦型细毛羊基因组BAC文库的构建 | 第54-61页 |
·试验动物 | 第54-55页 |
·菌株和克隆载体 | 第55页 |
·菌株 | 第55页 |
·克隆载体 | 第55页 |
·新疆军垦型细毛羊基因组BAC文库构建试剂 | 第55-56页 |
·试验方法 | 第56-61页 |
·BAC文库的构建与鉴定 | 第57-61页 |
·新疆军垦型细毛羊2倍基因组文库PCR筛选系统的建立和使用 | 第61-63页 |
·单克隆分离和培养 | 第62页 |
·使用机械臂分装菌液 | 第62页 |
·池DNA的提取 | 第62页 |
·PCR筛选BAC文库中的阳性克隆 | 第62-63页 |
·MHC基因邻近区段相关位点的研究 | 第63-68页 |
·白细胞的分离和激化 | 第63-65页 |
·提取白细胞中的DNA,检测、定量PCR模板DNA | 第65页 |
·PCR反应条件 | 第65-66页 |
·相关位点的引物序列 | 第65页 |
·材料 | 第65-66页 |
·加样步骤 | 第66页 |
·琼脂糖凝胶检测PCR扩增产物 | 第66页 |
·使用试剂盒从胶中回收DNA | 第66-68页 |
第四章 结果与分析 | 第68-85页 |
·新疆军垦型细毛羊基因组BAC文库的构建与鉴定 | 第68-74页 |
·新疆军垦型细毛羊基因组BAC文库的构建 | 第68-74页 |
·新疆军垦型细毛羊基因组DNA大片段制备 | 第68-71页 |
·BAC载体制备 | 第71页 |
·连接和转化 | 第71页 |
·文库的管理 | 第71-72页 |
·随机挑取BAC克隆,酶切鉴定BAC文库平均插入片段大小 | 第72-74页 |
·新疆军垦型细毛羊2倍基因组文库PCR筛选系统的建立 | 第74-76页 |
·单克隆分离和培养 | 第74页 |
·使用机械臂分装菌液 | 第74页 |
·池DNA的提取 | 第74页 |
·文库结构和PCR筛选系统 | 第74-75页 |
·PCR筛选BAC文库中MHC基因邻近区段分子标记的阳性克隆 | 第75-76页 |
·MHC基因邻近区段相关位点阳性克隆的研究 | 第76-85页 |
·白细胞的分离与激化 | 第76页 |
·提取白细胞中的DNA,检测、定量PCR模板DNA | 第76-77页 |
·MHC基因邻近区段相关位点的PCR反应、检测及测序 | 第77-85页 |
·DMB_EX_2位点的研究 | 第77-79页 |
·MCMA36位点的研究 | 第79-81页 |
·CP73位点的研究 | 第81-83页 |
·BM1258位点的研究 | 第83-85页 |
第五章 结论与讨论 | 第85-91页 |
·讨论 | 第85-87页 |
·新疆军垦型细毛羊基因组文库的构建与鉴定 | 第85-87页 |
·文库的筛选系统 | 第85页 |
·文库的质量 | 第85-86页 |
·文库的构建技术 | 第86-87页 |
·MHC基因邻近区段相关位点的研究 | 第87-88页 |
·MHC基因邻近区段相关位点的比对结果 | 第87-88页 |
·结论 | 第88-89页 |
·展望 | 第89-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-101页 |
附录 | 第101-106页 |
附录1 | 第101-103页 |
附录2 | 第103-105页 |
附录3 | 第105-106页 |
缩略词 | 第106-107页 |
作者简介 | 第107页 |