1 前言 | 第1-23页 |
1.1 L-苯丙氨酸的性质和应用 | 第7页 |
1.2 L-苯丙氨酸的生产现状 | 第7-10页 |
1.2.1 L-苯丙氨酸的生产方法 | 第7-9页 |
1.2.1.1 提取法 | 第7-8页 |
1.2.1.2 化学合成法 | 第8页 |
1.2.1.3 微生物直接发酵法生产L-苯丙氨酸 | 第8-9页 |
1.2.1.4 酶法生产L-苯丙氨酸 | 第9页 |
1.2.2 各种生产方法的比较 | 第9-10页 |
1.3 苯丙氨酸解氨酶转化肉桂酸生产L-苯丙氨酸的研究 | 第10-21页 |
1.3.1 苯丙氨酸解氨酶转化肉桂酸途径研究历史沿革 | 第10-12页 |
1.3.2 微生物PAL酶源菌种选育方面的研究 | 第12-16页 |
1.3.2.1 高产PAL菌种的筛选 | 第12-13页 |
1.3.2.2 PAL酶源微生物的改良 | 第13-16页 |
1.3.3 发酵工艺及转化反应条件方面的研究 | 第16-20页 |
1.3.4 固定化技术方面的研究 | 第20-21页 |
1.4 本工作的目的和意义 | 第21-22页 |
1.5 本论文的研究内容及实验方案设计 | 第22-23页 |
1.5.1 研究内容 | 第22页 |
1.5.2 方案设计 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-31页 |
2.1 材料 | 第23-26页 |
2.1.1 菌种 | 第23页 |
2.1.2 试剂 | 第23-24页 |
2.1.3 仪器 | 第24-25页 |
2.1.4 培养基 | 第25页 |
2.1.5 主要溶液 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-31页 |
2.2.1 菌种保藏 | 第26页 |
2.2.2 培养方法 | 第26页 |
2.2.3 转化方法 | 第26页 |
2.2.4 测定方法 | 第26-31页 |
2.2.4.1 苯丙氨酸解氨酶活力的紫外分光光度法测定 | 第26-29页 |
2.2.4.2 转化反应液中肉桂酸转化率的测定 | 第29-30页 |
2.2.4.3 纸层析法测定L-苯丙氨酸 | 第30-31页 |
3 结果与讨论 | 第31-55页 |
3.1 菌种分离筛选及鉴定 | 第31-34页 |
3.1.1 菌种的分离筛选 | 第31页 |
3.1.2 菌种生理生化鉴定实验 | 第31页 |
3.1.3 在各种培养基上的生长情况 | 第31-32页 |
3.1.4 菌体生长曲线 | 第32-33页 |
3.1.5 菌体酶比活力曲线 | 第33-34页 |
3.2 产酶条件的优化 | 第34-44页 |
3.2.1 苯丙氨酸解氨酶比活力测定方法的确定 | 第34页 |
3.2.2 产酶培养基对酶比活力的影响 | 第34-39页 |
3.2.2.1 碳源对产酶的影响 | 第34-35页 |
3.2.2.2 氮源对产酶的影响 | 第35-36页 |
3.2.2.3 矿质元素对苯丙氨酸解氨酶比活力的影响 | 第36-37页 |
3.2.2.4 正交实验确定各因素的最佳水平 | 第37-39页 |
3.2.3 诱导物对苯丙氨酸解氨酶的影响 | 第39-41页 |
3.2.3.1 不同诱导物对酶比活力的影响 | 第39-40页 |
3.2.3.2 诱导物添加量对酶比活力的影响 | 第40页 |
3.2.3.3 添加L-酪氨酸的时间对酶比活力的影响 | 第40-41页 |
3.2.4 最优菌体培养条件的优化 | 第41-43页 |
3.2.5 发酵过程中菌体生长曲线及酶比活力曲线的绘制 | 第43-44页 |
3.3 粘红酵母转化肉桂酸生产苯丙氨酸条件的确定 | 第44-52页 |
3.3.1 底物浓度对转化的影响 | 第44-45页 |
3.3.2 pH值对转化的影响 | 第45页 |
3.3.3 氨浓度对转化的影向 | 第45-46页 |
3.3.4 氨水与铵盐配比对转化的影响 | 第46-47页 |
3.3.5 温度对转化的影响 | 第47页 |
3.3.6 酶量(细胞量)对转化的影响 | 第47-48页 |
3.3.7 表面活性剂对转化的影响 | 第48-49页 |
3.3.8 几种因素对PAL稳定性的影响 | 第49-51页 |
3.3.8.1 氯离子对PAL稳定性的影响 | 第49-50页 |
3.3.8.2 去氧气对PAL稳定性的影响 | 第50页 |
3.3.8.3 常温离心和低温离心的比较 | 第50-51页 |
3.3.9 转化过程时间曲线 | 第51-52页 |
3.4 流加实验 | 第52-55页 |
3.4.1 肉桂酸添加量与吸光度对应关系的确定 | 第52-53页 |
3.4.2 流加肉桂酸曲线的绘制 | 第53-54页 |
3.4.3 小结 | 第54-55页 |
4 结论与展望 | 第55-57页 |
4.1 结论 | 第55-56页 |
4.2 展望 | 第56-57页 |
5 致谢 | 第57-58页 |
6 参考文献 | 第58-62页 |