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利用粘红酵母转化反式肉桂酸生成L-苯丙氨酸的研究

1 前言第1-23页
 1.1 L-苯丙氨酸的性质和应用第7页
 1.2 L-苯丙氨酸的生产现状第7-10页
  1.2.1 L-苯丙氨酸的生产方法第7-9页
   1.2.1.1 提取法第7-8页
   1.2.1.2 化学合成法第8页
   1.2.1.3 微生物直接发酵法生产L-苯丙氨酸第8-9页
   1.2.1.4 酶法生产L-苯丙氨酸第9页
  1.2.2 各种生产方法的比较第9-10页
 1.3 苯丙氨酸解氨酶转化肉桂酸生产L-苯丙氨酸的研究第10-21页
  1.3.1 苯丙氨酸解氨酶转化肉桂酸途径研究历史沿革第10-12页
  1.3.2 微生物PAL酶源菌种选育方面的研究第12-16页
   1.3.2.1 高产PAL菌种的筛选第12-13页
   1.3.2.2 PAL酶源微生物的改良第13-16页
  1.3.3 发酵工艺及转化反应条件方面的研究第16-20页
  1.3.4 固定化技术方面的研究第20-21页
 1.4 本工作的目的和意义第21-22页
 1.5 本论文的研究内容及实验方案设计第22-23页
  1.5.1 研究内容第22页
  1.5.2 方案设计第22-23页
2 材料与方法第23-31页
 2.1 材料第23-26页
  2.1.1 菌种第23页
  2.1.2 试剂第23-24页
  2.1.3 仪器第24-25页
  2.1.4 培养基第25页
  2.1.5 主要溶液第25-26页
 2.2 实验方法第26-31页
  2.2.1 菌种保藏第26页
  2.2.2 培养方法第26页
  2.2.3 转化方法第26页
  2.2.4 测定方法第26-31页
   2.2.4.1 苯丙氨酸解氨酶活力的紫外分光光度法测定第26-29页
   2.2.4.2 转化反应液中肉桂酸转化率的测定第29-30页
   2.2.4.3 纸层析法测定L-苯丙氨酸第30-31页
3 结果与讨论第31-55页
 3.1 菌种分离筛选及鉴定第31-34页
  3.1.1 菌种的分离筛选第31页
  3.1.2 菌种生理生化鉴定实验第31页
  3.1.3 在各种培养基上的生长情况第31-32页
  3.1.4 菌体生长曲线第32-33页
  3.1.5 菌体酶比活力曲线第33-34页
 3.2 产酶条件的优化第34-44页
  3.2.1 苯丙氨酸解氨酶比活力测定方法的确定第34页
  3.2.2 产酶培养基对酶比活力的影响第34-39页
   3.2.2.1 碳源对产酶的影响第34-35页
   3.2.2.2 氮源对产酶的影响第35-36页
   3.2.2.3 矿质元素对苯丙氨酸解氨酶比活力的影响第36-37页
   3.2.2.4 正交实验确定各因素的最佳水平第37-39页
  3.2.3 诱导物对苯丙氨酸解氨酶的影响第39-41页
   3.2.3.1 不同诱导物对酶比活力的影响第39-40页
   3.2.3.2 诱导物添加量对酶比活力的影响第40页
   3.2.3.3 添加L-酪氨酸的时间对酶比活力的影响第40-41页
  3.2.4 最优菌体培养条件的优化第41-43页
  3.2.5 发酵过程中菌体生长曲线及酶比活力曲线的绘制第43-44页
 3.3 粘红酵母转化肉桂酸生产苯丙氨酸条件的确定第44-52页
  3.3.1 底物浓度对转化的影响第44-45页
  3.3.2 pH值对转化的影响第45页
  3.3.3 氨浓度对转化的影向第45-46页
  3.3.4 氨水与铵盐配比对转化的影响第46-47页
  3.3.5 温度对转化的影响第47页
  3.3.6 酶量(细胞量)对转化的影响第47-48页
  3.3.7 表面活性剂对转化的影响第48-49页
  3.3.8 几种因素对PAL稳定性的影响第49-51页
   3.3.8.1 氯离子对PAL稳定性的影响第49-50页
   3.3.8.2 去氧气对PAL稳定性的影响第50页
   3.3.8.3 常温离心和低温离心的比较第50-51页
  3.3.9 转化过程时间曲线第51-52页
 3.4 流加实验第52-55页
  3.4.1 肉桂酸添加量与吸光度对应关系的确定第52-53页
  3.4.2 流加肉桂酸曲线的绘制第53-54页
  3.4.3 小结第54-55页
4 结论与展望第55-57页
 4.1 结论第55-56页
 4.2 展望第56-57页
5 致谢第57-58页
6 参考文献第58-62页

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