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去甲肾上腺素促进卵巢癌生长和血管化的分子机制以及使用PTD4-t4EBP2逆转化疗抵抗的实验研究

缩略语表第1-10页
中文摘要第10-15页
英文摘要第15-20页
前言第20-22页
文献回顾第22-45页
正文第45-97页
 实验一 去甲肾上腺素促进卵巢癌生长和血管化的分子机制第45-65页
  1 实验材料和仪器设备第45-48页
   ·实验材料第45-46页
   ·仪器设备第46-47页
   ·试剂配置第47-48页
  2 方法第48-52页
   ·细胞培养第48-49页
   ·伤口愈合(Wound healing)实验第49页
   ·MTT 法绘制细胞生长曲线第49页
   ·流式细胞术测定细胞周期第49页
   ·流式细胞术测定细胞凋亡第49-50页
   ·DAPI 染色法测定细胞凋亡第50页
   ·ELISA 法测定VEGF 含量第50页
   ·Western Blotting 测定蛋白表达水平第50-52页
  3 结果第52-61页
   ·去甲肾上腺素抑制SKOV3 细胞迁移第52-53页
   ·去甲肾上腺素促进SKOV3 细胞增殖第53-54页
   ·去甲肾上腺素对SKOV3 细胞周期的影响第54-55页
   ·去甲肾上腺素抑制顺铂诱发的SKOV3 细胞凋亡第55-58页
   ·去甲肾上腺素可激活Akt-mTOR 信号转导通路第58页
   ·去甲肾上腺素可激活ERK-Mnk1 信号转导通路第58页
   ·去甲肾上腺素上调HIF-1α和VEGF 的表达第58-61页
   ·去甲肾上腺素上调c-myc、ODC 和MDM2 的表达第61页
   ·去甲肾上腺素上调survivin 的表达第61页
  4 讨论第61-65页
   ·去甲肾上腺素抑制SKOV3 细胞迁移第61-62页
   ·去甲肾上腺素促进SKOV3 细胞增殖第62-63页
   ·去甲肾上腺素抑制SKOV3 细胞凋亡第63页
   ·去甲肾上腺素上调促血管生成相关分子的表达第63-64页
   ·去甲肾上腺素对eIF4F 复合物活性的调控第64-65页
 实验二 使用PTD4-t4EBP2 增强SKOV3 细胞对顺铂敏感性的实验研究第65-97页
  1 试剂材料和仪器设备第65-67页
   ·试剂材料第65-66页
   ·试剂配置第66-67页
   ·仪器设备第67页
  2 方法第67-83页
   ·原核表达载体pVIP4 的构建第67-75页
   ·原核表达载体pVIP4-t4EBP2 的构建第75-78页
   ·重组融合蛋白PTD4-EGFP-t4EBP2 的诱导表达和纯化第78-82页
   ·重组融合蛋白PTD4-EGFP-t4EBP2 对SKOV3 细胞的生物学效应第82-83页
   ·重组融合蛋白PTD4-EGFP-t4EBP2 对SKOV3 细胞顺铂敏感性的影响第83页
  3 结果第83-93页
   ·pET28a-PTD4 测序结果第83页
   ·pVIP4 测序结果第83页
   ·RT-PCR 法获得截短型4E-BP2 cDNA第83-87页
   ·pVIP4-t4EBP2 鉴定和测序结果第87页
   ·PTD4-EGFP-t4EBP2 的诱导表达第87-90页
   ·PTD4-EGFP-t4EBP2 融合蛋白具有高效进入细胞的能力第90页
   ·PTD4-EGFP-t4EBP2 融合蛋白抑制SKOV3 细胞增殖第90页
   ·PTD4-EGFP-t4EBP2 增强顺铂诱发的SKOV3 细胞凋亡第90-92页
   ·PTD4-EGFP-t4EBP2 抑制VEGF 和survivin 表达第92-93页
  4 讨论第93-97页
   ·eIF4E 结合作用域的选择第93-95页
   ·蛋白转导功能域的选择第95页
   ·阻断eIF4F 复合物装配治疗恶性肿瘤的应用前景第95-97页
小结第97-99页
展望第99-100页
参考文献第100-118页
个人简历和研究成果第118-120页
致谢第120页

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