缩略语表 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-15页 |
英文摘要 | 第15-20页 |
前言 | 第20-22页 |
文献回顾 | 第22-45页 |
正文 | 第45-97页 |
实验一 去甲肾上腺素促进卵巢癌生长和血管化的分子机制 | 第45-65页 |
1 实验材料和仪器设备 | 第45-48页 |
·实验材料 | 第45-46页 |
·仪器设备 | 第46-47页 |
·试剂配置 | 第47-48页 |
2 方法 | 第48-52页 |
·细胞培养 | 第48-49页 |
·伤口愈合(Wound healing)实验 | 第49页 |
·MTT 法绘制细胞生长曲线 | 第49页 |
·流式细胞术测定细胞周期 | 第49页 |
·流式细胞术测定细胞凋亡 | 第49-50页 |
·DAPI 染色法测定细胞凋亡 | 第50页 |
·ELISA 法测定VEGF 含量 | 第50页 |
·Western Blotting 测定蛋白表达水平 | 第50-52页 |
3 结果 | 第52-61页 |
·去甲肾上腺素抑制SKOV3 细胞迁移 | 第52-53页 |
·去甲肾上腺素促进SKOV3 细胞增殖 | 第53-54页 |
·去甲肾上腺素对SKOV3 细胞周期的影响 | 第54-55页 |
·去甲肾上腺素抑制顺铂诱发的SKOV3 细胞凋亡 | 第55-58页 |
·去甲肾上腺素可激活Akt-mTOR 信号转导通路 | 第58页 |
·去甲肾上腺素可激活ERK-Mnk1 信号转导通路 | 第58页 |
·去甲肾上腺素上调HIF-1α和VEGF 的表达 | 第58-61页 |
·去甲肾上腺素上调c-myc、ODC 和MDM2 的表达 | 第61页 |
·去甲肾上腺素上调survivin 的表达 | 第61页 |
4 讨论 | 第61-65页 |
·去甲肾上腺素抑制SKOV3 细胞迁移 | 第61-62页 |
·去甲肾上腺素促进SKOV3 细胞增殖 | 第62-63页 |
·去甲肾上腺素抑制SKOV3 细胞凋亡 | 第63页 |
·去甲肾上腺素上调促血管生成相关分子的表达 | 第63-64页 |
·去甲肾上腺素对eIF4F 复合物活性的调控 | 第64-65页 |
实验二 使用PTD4-t4EBP2 增强SKOV3 细胞对顺铂敏感性的实验研究 | 第65-97页 |
1 试剂材料和仪器设备 | 第65-67页 |
·试剂材料 | 第65-66页 |
·试剂配置 | 第66-67页 |
·仪器设备 | 第67页 |
2 方法 | 第67-83页 |
·原核表达载体pVIP4 的构建 | 第67-75页 |
·原核表达载体pVIP4-t4EBP2 的构建 | 第75-78页 |
·重组融合蛋白PTD4-EGFP-t4EBP2 的诱导表达和纯化 | 第78-82页 |
·重组融合蛋白PTD4-EGFP-t4EBP2 对SKOV3 细胞的生物学效应 | 第82-83页 |
·重组融合蛋白PTD4-EGFP-t4EBP2 对SKOV3 细胞顺铂敏感性的影响 | 第83页 |
3 结果 | 第83-93页 |
·pET28a-PTD4 测序结果 | 第83页 |
·pVIP4 测序结果 | 第83页 |
·RT-PCR 法获得截短型4E-BP2 cDNA | 第83-87页 |
·pVIP4-t4EBP2 鉴定和测序结果 | 第87页 |
·PTD4-EGFP-t4EBP2 的诱导表达 | 第87-90页 |
·PTD4-EGFP-t4EBP2 融合蛋白具有高效进入细胞的能力 | 第90页 |
·PTD4-EGFP-t4EBP2 融合蛋白抑制SKOV3 细胞增殖 | 第90页 |
·PTD4-EGFP-t4EBP2 增强顺铂诱发的SKOV3 细胞凋亡 | 第90-92页 |
·PTD4-EGFP-t4EBP2 抑制VEGF 和survivin 表达 | 第92-93页 |
4 讨论 | 第93-97页 |
·eIF4E 结合作用域的选择 | 第93-95页 |
·蛋白转导功能域的选择 | 第95页 |
·阻断eIF4F 复合物装配治疗恶性肿瘤的应用前景 | 第95-97页 |
小结 | 第97-99页 |
展望 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-118页 |
个人简历和研究成果 | 第118-120页 |
致谢 | 第120页 |