| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1 核盘菌的研究进展 | 第10-11页 |
| ·核盘菌及其危害 | 第10页 |
| ·作物菌核病的防治 | 第10-11页 |
| 2 盾壳霉的研究进展 | 第11-14页 |
| ·盾壳霉的生物学特性 | 第12页 |
| ·盾壳霉的生态学特性 | 第12-13页 |
| ·盾壳霉的分子生物学研究 | 第13-14页 |
| 3 过氧化物酶体研究进展 | 第14-16页 |
| 4 农杆菌介导的真菌遗传转化研究 | 第16-17页 |
| 5 基因功能的研究方法 | 第17-18页 |
| 6 本项研究的意义 | 第18-19页 |
| 第二章 盾壳霉产孢缺陷型突变体ZS-1T16229菌株的基本生物学性状的测定 | 第19-29页 |
| 1 材料与方法 | 第19-21页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·菌株 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-21页 |
| ·突变体菌株ZS-1T16229的形态特征观察 | 第19-20页 |
| ·突变体菌株ZS-1T16229菌丝生长速度的测定 | 第20页 |
| ·突变体菌株ZS-1T16229的生物产量测定 | 第20页 |
| ·突变体菌株ZS-1T16229在PDA培养基上产抗真菌物质能力测定 | 第20-21页 |
| ·突变体菌株ZS-1T16229在PDA培养基上产抗细菌物质能力测定 | 第21页 |
| ·突变体菌株ZS-1T16229寄生致腐核盘菌菌核能力的测定 | 第21页 |
| ·数据统计分析 | 第21页 |
| 2 结果与分析 | 第21-28页 |
| ·突变体ZS-1T16229菌株的形态特征观察 | 第21-23页 |
| ·突变体ZS-1T16229菌丝的生长速度 | 第23页 |
| ·突变体ZS-1T16229的生物产量低 | 第23-24页 |
| ·突变体ZS-1T16229不具产生抗真菌物质的能力 | 第24-26页 |
| ·核盘菌促使突变体ZS-1T16229恢复产孢 | 第26页 |
| ·突变体ZS-1T16229丧失产生抗细菌物质的能力 | 第26-27页 |
| ·突变体ZS-1T16229具微弱的寄生致腐菌核能力 | 第27-28页 |
| 3 结论和讨论 | 第28-29页 |
| ·结论 | 第28页 |
| ·讨论 | 第28-29页 |
| 第三章 盾壳霉产孢相关基因的克隆 | 第29-42页 |
| 1 材料与方法 | 第29-34页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·菌株 | 第29页 |
| ·培养基、载体及抗生素 | 第29页 |
| ·质粒抽提用溶液 | 第29-30页 |
| ·其它溶液及试剂 | 第30页 |
| ·限制性内切酶及其它酶类、试剂盒及其它试剂 | 第30页 |
| ·DNA分子量标记 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-34页 |
| ·ZS-1菌株RNA的提取 | 第30-31页 |
| ·通过RACE获得3'末端cDNA | 第31-32页 |
| ·目的片段的回收及纯化 | 第32页 |
| ·回收产物与克隆载体连接 | 第32页 |
| ·利用大肠杆菌感受态细胞转化连接产物 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的筛选、提取及鉴定 | 第33-34页 |
| ·克隆序列分析 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-40页 |
| ·CMPEX2全长序列的克隆 | 第34页 |
| ·CMPEX2全长序列分析 | 第34-40页 |
| 3 结论和讨论 | 第40-42页 |
| ·结论 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 盾壳霉产孢相关基因功能的验证 | 第42-60页 |
| 1 材料和方法 | 第42-48页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·菌株、载体、抗生素及引物 | 第42页 |
| ·试剂及培养基 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-48页 |
| ·RT-PCR验证ZS-1T16229中CMPEX2基因的表达 | 第43页 |
| ·盾壳霉CMPEX2敲除载体的构建 | 第43-46页 |
| ·盾壳霉CMPEX2互补载体的构建 | 第46-47页 |
| ·含重组质粒农杆菌的获取 | 第47页 |
| ·农杆菌介导转化盾壳霉ZS-1菌株 | 第47-48页 |
| ·盾壳霉CMPEX2敲除转化子PCP鉴定 | 第48页 |
| ·盾壳霉CMPEX2敲除转化子基本生物学性状的测定 | 第48页 |
| ·农杆菌介导转化盾壳霉突变体ZS-1T16229菌株 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-58页 |
| ·ZS-1T16229中CMPEX2基因不表达 | 第48-49页 |
| ·盾壳霉CMPEX2敲除载体的构建及鉴定 | 第49-51页 |
| ·盾壳霉CMPEX2互补载体的构建及鉴定 | 第51页 |
| ·含重组质粒农杆菌的鉴定 | 第51页 |
| ·农杆菌介导介导转化盾壳霉ZS-1菌株 | 第51-53页 |
| ·盾壳霉CMPEX2敲除转化子PCR鉴定结果 | 第53页 |
| ·盾壳霉CMPEX2敲除转化子基本生物学性状的测定结果 | 第53-56页 |
| ·敲除转化子形态特征的观察 | 第53-55页 |
| ·敲除转化子生长速度的测定 | 第55页 |
| ·敲除转化子在PDA培养基上产抗真菌物质能力的测定 | 第55-56页 |
| ·农杆菌介导转化盾壳霉突变体ZS-1T16229菌株 | 第56页 |
| ·盾壳霉CMPEX2互补转化子PCR鉴定结果 | 第56-57页 |
| ·盾壳霉CMPEX2基因互补转化子基本生物学性状的测定结果 | 第57-58页 |
| ·互补转化子形态特征的观察 | 第57页 |
| ·互补转化子生长速度的测定 | 第57-58页 |
| ·互补转化子在PDA培养基上产抗真菌物质能力的测定 | 第58页 |
| 3 结论和讨论 | 第58-60页 |
| ·结论 | 第58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 结论与展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
