| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-41页 |
| 1 小麦抗赤霉病研究进展 | 第13-27页 |
| ·赤霉病的发生及危害 | 第13-14页 |
| ·禾谷镰刀菌毒素 | 第14-19页 |
| ·禾谷镰刀菌毒素的类型 | 第15页 |
| ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON) | 第15-16页 |
| ·DON的危害 | 第16-19页 |
| ·禾谷镰刀菌毒素与病菌致病力 | 第19-20页 |
| ·小麦赤霉病抗性机制研究 | 第20-25页 |
| ·禾谷镰刀菌的初侵染 | 第21-22页 |
| ·小麦抗赤霉病生理生化机制研究 | 第22-23页 |
| ·降低或解除镰刀菌毒素毒性的机制 | 第23-25页 |
| ·抗赤霉病的遗传研究 | 第25-27页 |
| 2 ABC Transporter研究进展 | 第27-40页 |
| · | 第27-29页 |
| ·跨膜域的结构 | 第27-29页 |
| ·NBD与TMD的偶联 | 第29页 |
| ·ABC转运蛋白的转运机理 | 第29-30页 |
| ·植物的ABC基因家族 | 第30-37页 |
| ·MDR亚家族 | 第31页 |
| ·MRP亚家族 | 第31-32页 |
| ·PDR亚家族 | 第32-36页 |
| ·其它的亚家族 | 第36-37页 |
| ·ABC转运蛋白与植物次生代谢产物的转运 | 第37-40页 |
| ·生物碱 | 第38-39页 |
| ·萜类 | 第39页 |
| ·酚类 | 第39-40页 |
| 3 本研究的目的意义 | 第40-41页 |
| 第二部分 研究报告 | 第41-94页 |
| 第一章 DON诱导的小麦cDNA文库的构建和噬菌体文库的筛选方法的改良 | 第41-49页 |
| 1 材料与方法 | 第42-45页 |
| ·试验材料 | 第42页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·试剂 | 第42页 |
| ·试验方法 | 第42-45页 |
| ·DON接种 | 第42页 |
| ·总RNA的提取及纯化 | 第42-43页 |
| ·文库构建过程所需的培养基和文库的构建(见附录1、附录2) | 第43页 |
| ·文库的筛选 | 第43-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-47页 |
| ·DON诱导望水白穗cDNA文库的构建及评价 | 第45页 |
| ·文库筛选 | 第45-47页 |
| ·涂板分区和液体分装方法的比较 | 第45-46页 |
| ·利用液体分装法从噬菌体文库中筛选阳性单克隆 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 第二章 DON诱导的小麦抗赤霉病相关基因—TaPDR1的克隆和功能分析 | 第49-79页 |
| 1 材料与方法 | 第50-64页 |
| ·试验材料 | 第50-52页 |
| ·植物材料 | 第50页 |
| ·抗赤霉病农家品种望水白及其感赤霉病突变体 | 第50页 |
| ·感赤霉病小麦品种Alondra's | 第50页 |
| ·普通小麦中国春缺体-四体和缺失系 | 第50页 |
| ·小麦基因组TAC文库 | 第50页 |
| ·其它菌种材料和载体 | 第50页 |
| ·主要仪器及设备 | 第50-51页 |
| ·主要生化试剂及配制 | 第51-52页 |
| ·试验方法 | 第52-64页 |
| ·TaPDR1基因的克隆 | 第52-56页 |
| ·半定量RT-PCR分析 | 第56-58页 |
| ·TaPDR1的染色体定位 | 第58-60页 |
| ·TaPDR1双链干扰载体的构建和茎尖法转化小麦 | 第60-64页 |
| 2 结果和分析 | 第64-76页 |
| ·TaPDR1基因的克隆 | 第64页 |
| ·同源性比较 | 第64-67页 |
| ·基因组结构分析 | 第67-68页 |
| ·TaPDR1的染色体定位 | 第68-69页 |
| ·诱导表达分析 | 第69-72页 |
| ·DON和禾谷镰刀菌对TaPDR1的诱导 | 第69-71页 |
| ·TaPDR1不被SA和JA以及其它胁迫诱导 | 第71页 |
| ·TaPDR1表达受到Al~(3+)和[Ca~(2+)]的诱导 | 第71-72页 |
| ·双链RNA干扰载体的构建和农杆菌茎尖转化法转化小麦 | 第72-76页 |
| ·双链RNA干扰载体的构建 | 第72-74页 |
| ·转基因植株的筛选和验证 | 第74页 |
| ·阳性转化株的赤霉病抗性验证 | 第74-76页 |
| 3 讨论 | 第76-79页 |
| 第三章 PDR1基因在多倍体二穗短柄草中的进化历史 | 第79-94页 |
| 1 材料与方法 | 第80-83页 |
| ·植物材料 | 第80-81页 |
| ·研究方法 | 第81-83页 |
| ·引物设计 | 第81页 |
| ·目标片段的克隆 | 第81-82页 |
| ·目标片段的回收与测序 | 第82页 |
| ·克隆类型的鉴定 | 第82页 |
| ·系统进化树的构建 | 第82-83页 |
| 2 结果与分析 | 第83-91页 |
| ·短柄草PDR1基因的克隆与鉴定 | 第83页 |
| ·短柄草PDR1同源基因的序列比较分析 | 第83-89页 |
| ·短柄草PDRI的系统进化分析 | 第89页 |
| ·短柄草PDRI的进化率分析 | 第89-91页 |
| ·六倍体短柄草间的进化分析 | 第91页 |
| 3 讨论 | 第91-94页 |
| ·PDR1基因的进化 | 第91-92页 |
| ·短柄草的多倍体起源 | 第92-93页 |
| ·引物TR2和CAPS标记的利用 | 第93-94页 |
| 全文结论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-112页 |
| 附录1 文库构建过程所需的培养基 | 第112-114页 |
| 附录2 SMART cDNA文库的构建 | 第114-120页 |
| 附录3 TaPDR1 基因组序列 | 第120-123页 |
| 附录4 TaPDR1 mRNA序列 | 第123-125页 |
| 附录5 TaPDR1 氨基酸序列 | 第125-126页 |
| 附录6 短柄草中39条PDR1同源基因片段 | 第126-151页 |
| 致谢 | 第151页 |
