| 缩略词 | 第1-12页 |
| 摘要 | 第12-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 第一章 综述 | 第15-33页 |
| 1. 传染性海绵状脑病概况 | 第15-19页 |
| ·传染性海绵状脑病的发现 | 第15-16页 |
| ·传染性海绵状脑病的流行病学 | 第16-17页 |
| ·传染性海绵状脑病的发病机制 | 第17-19页 |
| 2. 朊蛋白的特性 | 第19-23页 |
| ·朊蛋白基因的结构特征 | 第19-20页 |
| ·朊蛋白和朊病毒的关系 | 第20-23页 |
| 3. 叠朊的特征 | 第23-31页 |
| ·叠朊蛋白的基因结构特征 | 第23-24页 |
| ·叠朊蛋白的分布 | 第24-25页 |
| ·叠朊的功能 | 第25-29页 |
| ·朊蛋白对叠朊神经毒性的拮抗作用 | 第29-31页 |
| ·叠朊在传染性海绵状脑病发病中的作用 | 第31页 |
| 4. 展望 | 第31-32页 |
| 5. 本实验的工作目的、工作内容 | 第32-33页 |
| 第二章 牛叠朊基因缺失突变体的构建与鉴定 | 第33-60页 |
| 1. 前言 | 第33-34页 |
| 2. 材料和方法 | 第34-46页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·载体与菌株 | 第34-35页 |
| ·工具酶与主要试剂 | 第35-36页 |
| ·仪器与设备 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| ·常规溶液和缓冲液 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-46页 |
| ·引物的设计和合成 | 第37-38页 |
| ·目的基因的PCR 扩增 | 第38-39页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第39-40页 |
| ·纯化PCR 产物的双酶切 | 第40-42页 |
| ·pET-30a(+)载体质粒的提取 | 第42-43页 |
| ·pET-30a(+)载体质粒的双酶切 | 第43-44页 |
| ·目的 DNA 片段与pET-30a(+)载体连接 | 第44页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第44-45页 |
| ·连接产物的转化 | 第45页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第45-46页 |
| ·碱裂解法提取重组质粒 | 第45页 |
| ·重组质粒的双酶切鉴定 | 第45-46页 |
| ·重组质粒的测序和序列分析 | 第46页 |
| 3. 结果 | 第46-58页 |
| 4. 讨论 | 第58-60页 |
| 第三章 牛叠朊缺失突变体在大肠杆菌中的表达 | 第60-77页 |
| 1. 引言 | 第60页 |
| 2. 材料和方法 | 第60-65页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·载体与菌株 | 第60页 |
| ·工具酶与主要试剂 | 第60页 |
| ·仪器与设备 | 第60-61页 |
| ·方法 | 第61-65页 |
| ·重组菌株的诱导表达 | 第61页 |
| ·表达产物的检测 | 第61-65页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第61-64页 |
| ·间接ELISA 方法检测表达的重组蛋白 | 第64-65页 |
| ·所需溶液的配制 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-65页 |
| 3 结果 | 第65-74页 |
| ·表达产物检测 | 第65-74页 |
| ·SDS-PAGE | 第65-70页 |
| ·Western blotting 检测结果 | 第70-72页 |
| ·ELISA检测结果 | 第72-74页 |
| 4 讨论 | 第74-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 作者简介 | 第86-87页 |
| 导师简介 | 第87-88页 |