| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 绪论 | 第9-19页 |
| 一、研究背景 | 第9-10页 |
| 二、文献综述 | 第10-18页 |
| (一) 果糖-2,6-二磷酸 | 第10-13页 |
| 1.果糖-2,6-二磷酸调节碳代谢 | 第10-12页 |
| (1) Fru-2,6-P_2在植物光合组织中的作用 | 第10-11页 |
| (2) Fru-2,6-P_2在植物非光合组织中的作用 | 第11-12页 |
| (3) Fru-2,6-P_2的其他功能 | 第12页 |
| 2.生物体内果糖-2,6-二磷酸含量的改变 | 第12-13页 |
| (二) 果糖6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶 | 第13-18页 |
| 1.动物PFKFB分类 | 第13-14页 |
| 2.植物F2KP结构及其活性调节机制 | 第14-17页 |
| 3.果糖6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶转基因研究 | 第17-18页 |
| 三、本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 第一章 甘蔗F2KP基因的cDNA克隆及序列分析 | 第19-29页 |
| 前言 | 第19页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-21页 |
| ·EST数据库的分析 | 第19-20页 |
| ·蔗叶、蔗茎总RNA的提取 | 第20页 |
| ·RT-PCR反应及其产物的回收 | 第20-21页 |
| ·PCR产物的克隆与转化 | 第21页 |
| ·重组质粒的提取及鉴定 | 第21页 |
| ·目的片段序列分析 | 第21页 |
| ·结果与分析 | 第21-27页 |
| ·甘蔗叶、茎Total RNA的提取 | 第21-22页 |
| ·甘蔗F2KP基因的克隆 | 第22-23页 |
| ·基因测序及其序列分析 | 第23-27页 |
| ·小结与讨论 | 第27-29页 |
| 第二章 甘蔗F2KP基因植物表达载体的构建 | 第29-35页 |
| 前言 | 第29页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·质粒与菌种 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-32页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第29-32页 |
| ·SoF2KP-L、SoF2KP-S2目的片段的扩增 | 第30-31页 |
| ·表达载体的构建 | 第31页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·连接反应产物的转化 | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-33页 |
| ·目的F2KP基因的扩增 | 第32页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·小结与讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 农杆菌介导甘蔗F2KP基因转化模式植物 | 第35-47页 |
| 前言 | 第35页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·菌种、质粒 | 第35页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·主要药品和生化试剂 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-39页 |
| ·植物表达载体35S-F2KP-L、35S-F2KP-S2转化根癌农杆菌 | 第36-38页 |
| ·农杆菌GV3101感受态细胞制备 | 第36页 |
| ·重组质粒转化农杆菌 | 第36页 |
| ·农杆菌Mini-Ti质粒的提取 | 第36-37页 |
| ·质粒PCR检测 | 第37-38页 |
| ·模式植物的遗传转化及抗性苗筛选鉴定 | 第38-39页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第38页 |
| ·拟南芥的遗传转化 | 第38-39页 |
| ·转基因抗性再生植株检测 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-44页 |
| ·35S-F2KP-L、35S-F2KP-S2转化根癌农杆菌 | 第39-40页 |
| ·烟草、拟南芥抗性苗筛选及PCR鉴定 | 第40-44页 |
| ·烟草抗性苗筛选及PCR鉴定 | 第40-42页 |
| ·拟南芥抗性苗筛选及PCR鉴定 | 第42-44页 |
| ·小结与讨论 | 第44-47页 |
| 第四章 结论 | 第47-49页 |
| 附录1 常用试剂或缓冲液配方 | 第49-51页 |
| 附录2 MS培养基配方 | 第51-53页 |
| 附录3 符号缩略表 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
