| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 绪论 | 第9-19页 |
| 一、课题背景 | 第9-11页 |
| 1、水稻胚乳研究进展 | 第9-11页 |
| 2、基因捕获技术 | 第11页 |
| 二、PTR家族蛋白的研究进展 | 第11-17页 |
| 1、ATP—bindingcassette transporters(ABC family) | 第13页 |
| 2、Peptide Transporter family(PTR family) | 第13-15页 |
| 3、Oligopeptide Transporter family(OPT family) | 第15-17页 |
| 三、本课题的研究内容及技术路线 | 第17-19页 |
| 第一章 水稻特异表达启动子捕获系的筛选 | 第19-25页 |
| ·前言 | 第19页 |
| ·材料与方法 | 第19-20页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-20页 |
| ·结果与分析 | 第20-24页 |
| ·突变体植株叶片潮霉素抗性筛选 | 第20页 |
| ·突变体植株PCR检测 | 第20-21页 |
| ·突变体植株的GUS活性检测 | 第21-24页 |
| ·讨论 | 第24-25页 |
| 第二章 水稻胚乳特异表达启动子捕获系w9101的初步分析 | 第25-37页 |
| ·前言 | 第25页 |
| ·材料与方法 | 第25-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·水稻启动子捕获系的GUS表达活性检测 | 第25页 |
| ·水稻DNA的提取 | 第25-26页 |
| ·水稻启动子捕获系的Southern blot分子检测 | 第26页 |
| ·水稻胚乳特异表达捕获系侧翼序列扩增及插入位点的验证 | 第26页 |
| ·水稻RNA的提取 | 第26页 |
| ·水稻胚乳特异表达捕获系候选基因RT-PCR | 第26-27页 |
| ·水稻胚乳特异表达捕获系候选基因生物信息学分析 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-34页 |
| ·胚乳表达GUS活性捕获植株的筛选及遗传分析 | 第27-28页 |
| ·启动子捕获系w9101侧翼序列扩增及插入位点验证 | 第28-29页 |
| ·水稻RNA的提取及检测 | 第29页 |
| ·PTR9101基因的表达特征分析 | 第29-30页 |
| ·PTR9101基因上游调控序列的生物信息学分析 | 第30-32页 |
| ·候选基因PTR9101氮基酸序列基本理化性质分析及序列保守性比对分析 | 第32-34页 |
| ·讨论 | 第34-37页 |
| ·水稻胚乳分子生物学研究的意义 | 第34-35页 |
| ·水稻肽转运蛋白研究意义 | 第35-37页 |
| 第三章 肽转运蛋白PTR9101基因及其启动子功能分析 | 第37-47页 |
| ·材料与方法 | 第37-42页 |
| ·供试水稻品种 | 第37页 |
| ·菌株和质粒 | 第37页 |
| ·PCR引物合成 | 第37-38页 |
| ·水稻DNA的提取 | 第38页 |
| ·PTR9101基因、启动子P1、P2的分离 | 第38-39页 |
| ·PTR9101基因、启动子P1、P2中间载体构建 | 第39-40页 |
| ·PTR9101基因、启动子P1、P2表达载体构建 | 第40-41页 |
| ·农杆菌介导获得PTR9101基因及其启动子P1、P2的转基因水稻植株 | 第41-42页 |
| ·结果及分析 | 第42-45页 |
| ·PTR9101基因及其启动子P1、P2的克隆及其克隆载体的酶切鉴定 | 第42-43页 |
| ·PTR9101基因、启动子P1、P2扩增序列的测序鉴定 | 第43页 |
| ·中间载体的酶切鉴定 | 第43页 |
| ·表达载体的酶切鉴定 | 第43-44页 |
| ·表达载体电击转化农杆菌 | 第44-45页 |
| ·农杆菌介导获得PTR9101基因及其启动子P1、P2的转基因水稻植株 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 结论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录1 实验方法 | 第55-59页 |
| 附录2 水稻启动子捕获系的GUS活性检测 | 第59-63页 |
| 附录3 Southern blotting | 第63-69页 |
| 附录4 PTR9101启动子测序结果比对 | 第69-71页 |
| 附录5 PlantCare预测启动子PTR9101的调控元件 | 第71-75页 |
| 附录6 载体构建流程图 | 第75-76页 |
| 续附录6 载体构建流程图 | 第76-77页 |
| 续附录6 载体构建流程图 | 第77-78页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 个人简历 | 第80页 |
