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河南省部分地区猪弓形虫分离株基因型研究和弓形虫RH株的细胞培养

致谢第1-8页
中文摘要第8-9页
文献综述第9-25页
 引言第9页
 1 弓形虫简介第9-14页
   ·弓形虫形态及其生活史第9-12页
     ·病原形态第9-11页
     ·弓形虫的生活史第11-12页
   ·临床症状第12-13页
   ·病理变化第13页
   ·流行情况第13-14页
   ·弓形虫的治疗第14页
 2 弓形虫病分子诊断技术研究进展第14-20页
   ·核酸分子杂交技术(DNA探针技术)第14-15页
   ·聚合酶链反应(PCR)第15-18页
     ·弓形虫的特异性遗传标记第15-16页
     ·诊断弓形虫的PCR类型第16-18页
   ·弓形虫单克隆抗体第18-19页
   ·基因芯片技术第19-20页
 3 弓形虫速殖子体外培养研究第20-21页
   ·弓形虫体外培养模型第20页
   ·速殖子的纯化第20-21页
 4 弓形虫基因型分类研究进展第21-25页
   ·弓形虫的PCR-RFLP基因分型方法第21-23页
   ·弓形虫的微卫星基因分型方法第23-25页
第一部分 河南省部分地区猪弓形虫病分子流行病学调查第25-33页
 引言第25页
 1 材料与方法第25-28页
   ·样品采集和来源第25页
   ·试剂第25页
   ·仪器设备第25-26页
   ·引物合成第26页
   ·组织病料中基因组DNA的提取第26页
   ·B1基因的扩增第26-27页
   ·反应程序第27页
   ·姬姆萨染色方法第27-28页
     ·姬姆萨溶液配制第27页
     ·姬姆萨方法操作第27-28页
 2 结果第28-32页
   ·组织病料中T.gondii感染情况第28页
   ·阳性猪场的临床资料第28-31页
     ·发病情况第28页
     ·临床症状第28-29页
     ·主要剖检变化第29-31页
   ·姬姆萨染色结果第31-32页
 3 讨论第32-33页
   ·弓形虫病的严重危害第32页
   ·弓形虫病与环境的关系及预防措施第32-33页
第二部分 MDCK细胞培养弓形虫RH株速殖子的实验研究第33-39页
 引言第33页
 1 材料与方法第33-34页
   ·材料第33页
   ·弓形虫速殖子的收集第33页
   ·弓形虫速殖子的纯化与计数第33-34页
   ·MDCK细胞的培养和传代第34页
   ·弓形虫的感染第34页
   ·弓形虫细胞培养液传代小鼠试验第34页
   ·弓形虫细胞培养液传代细胞培养第34页
 2 结果与分析第34-37页
   ·弓形虫侵入MDCK细胞的观察第34-36页
   ·弓形虫致病力的检测第36页
   ·弓形虫虫体形态及数量的变化第36-37页
 3 讨论第37-39页
   ·弓形虫速殖子体外培养结果分析第37页
   ·选择MDCK和BHK21细胞的原因第37页
   ·弓形虫三种保种方法的比较第37-39页
第三部分 河南猪弓形虫分离株基因型研究第39-56页
 引言第39页
 1 材料与方法第39-43页
   ·试验材料第39-40页
     ·弓形虫虫株第39-40页
     ·主要仪器设备与试剂第40页
     ·微卫星引物的合成第40页
   ·试验方法第40-42页
     ·弓形虫RH株速殖子的纯化第40页
     ·弓形虫RH株速殖子DNA的提取及阳性病料基因组DNA的提取第40页
     ·PCR扩增第40-41页
     ·多重PCR扩增第41-42页
     ·单一微卫星PCR产物的测序第42页
   ·种系发育分析第42-43页
 2 结果第43-54页
   ·PCR产物的检测第43-44页
     ·微卫星TUB2PCR产物的检测第43页
     ·多重PCR产物的检测第43-44页
   ·序列分析和基因型鉴定第44-49页
     ·TUB2增结果第44-45页
     ·W35扩增结果第45-46页
     ·TgM-A扩增结果第46-47页
     ·B18扩增结果第47-48页
     ·B17扩增结果第48-49页
   ·基因型分析第49-54页
     ·微卫星重复序列分析第49-51页
     ·弓形虫五个微卫星位点的种系发育分析第51-54页
 3 讨论第54-56页
   ·选择多重PCR方法的原因及该方法的局限性第54页
   ·六个阳性弓形虫虫株的基因型鉴定结果分析第54-56页
参考文献第56-63页
英文摘要第63-65页
个人简历第65页

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