透性化肝素黄杆菌的固定化及其降解肝素的研究
| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 第一章 前言 | 第17-33页 |
| 1 肝素的结构及其生物学功能 | 第17-22页 |
| ·肝素的结构 | 第17-18页 |
| ·肝素的生物学功能 | 第18-22页 |
| 2 LMWH的制备、结构和性质 | 第22-28页 |
| ·LMWH的制备 | 第22-27页 |
| ·LMWH的化学结构与生物活性的关系 | 第27-28页 |
| 3 细胞透性化技术 | 第28-32页 |
| ·细胞透化技术 | 第28-30页 |
| ·透性化细胞的应用 | 第30-32页 |
| 4 本课题拟解决的问题 | 第32-33页 |
| 第二章 肝素黄杆菌的培养及透性化处理 | 第33-48页 |
| 1 实验材料、培养基、试剂与仪器 | 第33-34页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·培养基配方 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| 2 方法 | 第34-40页 |
| ·肝素黄杆菌的培养及诱导 | 第34-35页 |
| ·肝素黄杆菌生长曲线的测定 | 第35页 |
| ·生物量测定 | 第35页 |
| ·肝素黄杆菌的鉴定及验证 | 第35-37页 |
| ·肝素酶粗酶液的制备 | 第37-38页 |
| ·肝素酶活性的测定 | 第38-39页 |
| ·肝素黄杆菌的透性化处理及酶活性测定 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-46页 |
| ·肝素黄杆菌生长曲线的测定 | 第40-41页 |
| ·肝素酶活性的测定 | 第41-43页 |
| ·诱导肝素浓度对产酶的影响 | 第43-44页 |
| ·肝素黄杆菌的PCR筛选鉴定 | 第44页 |
| ·肝素黄杆菌的透性化处理 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 透性化肝素黄杆菌的固定化 | 第48-59页 |
| 1 实验材料、试剂与仪器 | 第48-49页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·主要仪器 | 第48-49页 |
| 2 实验方法 | 第49-52页 |
| ·固定化方法 | 第49-51页 |
| ·固定化细胞理化性质的研究 | 第51-52页 |
| ·固定化细胞酶活性的测定 | 第52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-58页 |
| ·固定化细胞的制备 | 第52-54页 |
| ·固定化细胞理化性质的研究 | 第54-56页 |
| ·固定化细胞酶活性的测定 | 第56页 |
| ·固定化细胞稳定性的测定 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-59页 |
| 第四章 固定化肝素黄杆菌制备肝素寡糖的研究 | 第59-70页 |
| 1 实验材料、试剂与仪器 | 第59-60页 |
| ·实验材料 | 第59页 |
| ·主要试剂 | 第59页 |
| ·主要仪器 | 第59-60页 |
| 2 实验方法 | 第60-64页 |
| ·固定化细胞对肝素的降解 | 第60页 |
| ·降解产物的处理 | 第60-61页 |
| ·肝素寡糖的紫外扫描 | 第61页 |
| ·肝素寡糖的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) | 第61页 |
| ·肝素寡糖的分子量测定 | 第61-62页 |
| ·肝素寡糖抗凝效价的测定 | 第62-63页 |
| ·肝素寡糖抗Xa活性的测定 | 第63-64页 |
| 3 结果与分析 | 第64-69页 |
| ·固定化细胞对肝素的降解 | 第64页 |
| ·紫外扫描图谱 | 第64-66页 |
| ·PAGE结果 | 第66页 |
| ·分子量及其分布的测定 | 第66-68页 |
| ·抗凝效价的测定结果 | 第68页 |
| ·抗Xa活性的测定结果 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-70页 |
| 总结与展望 | 第70-72页 |
| 1 论文主要结论 | 第70-71页 |
| 2 展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第81-82页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第82页 |
