| 本论文的创新性研究工作 | 第1-4页 |
| 中文摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 第一部分 文献综述及选题的目的意义 | 第13-22页 |
| 第一章 鸭瘟病毒的概述及分子特性 | 第13-22页 |
| 1 鸭瘟概述 | 第13-14页 |
| 2 鸭瘟病毒概述 | 第14-16页 |
| ·鸭瘟病毒的分类 | 第14页 |
| ·鸭瘟病毒的形态结构 | 第14页 |
| ·病毒的分子特性 | 第14-16页 |
| 3 疱疹病毒UL32基因及其编码蛋白的研究进展 | 第16-20页 |
| ·疱疹病毒UL32基因及其编码蛋白的特点 | 第16-18页 |
| ·疱疹病毒UL32基因编码蛋白的定位 | 第18-19页 |
| ·疱疹病毒UL32基因编码蛋白的功能 | 第19-20页 |
| ·总结和展望 | 第20页 |
| 4 选题的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二部分 试验研究 | 第22-79页 |
| 第二章 鸭瘟病毒UL32基因序列分子特性分析 | 第22-40页 |
| 1 材料与方法 | 第22-24页 |
| ·基因序列 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-24页 |
| 2 结果 | 第24-38页 |
| ·DPV UL32基因序列的推定和分析 | 第24页 |
| ·DPV UL32基因的分子特性分析 | 第24-33页 |
| ·UL32基因的密码子偏嗜性分析 | 第33-34页 |
| ·DPV UL32基因的密码子与大肠杆菌、酵母及人的密码子偏爱性比较 | 第34-38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| ·DPV UL32基因的推定与生物信息学 | 第38页 |
| ·序列的分子特性分析 | 第38-39页 |
| ·UL32密码子偏爱性对表达的影响 | 第39-40页 |
| 第三章 鸭瘟病毒UL32基因克隆表达及多克隆抗体制备 | 第40-57页 |
| 1 材料 | 第40-42页 |
| ·菌株/载体 | 第40页 |
| ·实验动物 | 第40页 |
| ·主要试剂及配制 | 第40-41页 |
| ·主要仪器设备 | 第41-42页 |
| ·其它 | 第42页 |
| 2 实验方法 | 第42-47页 |
| ·PCR扩增鸭瘟病毒CHv株UL32基因 | 第42-43页 |
| ·UL32基因的T-载体克隆与鉴定 | 第43页 |
| ·表达载体的构建 | 第43页 |
| ·重组蛋白的诱导表达及条件优化 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第44-45页 |
| ·兔高免血清的制备 | 第45-46页 |
| ·琼脂扩散试验检测兔抗UL32抗体效价 | 第46页 |
| ·兔抗UL32 IgG的纯化及鉴定 | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-54页 |
| ·鸭瘟病毒UL32基因的扩增 | 第47页 |
| ·UL32基因的T-克隆与鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组表达质粒pET-32a-UL32的构建 | 第48页 |
| ·重组蛋白的诱导表达及条件优化 | 第48-50页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第50-52页 |
| ·免疫兔血清的Western-blot检测 | 第52页 |
| ·兔抗UL32血清琼脂扩散试验效价的检测 | 第52-53页 |
| ·兔抗UL32蛋白IgG的纯化及SDS-PAGE鉴定 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| ·UL32基因引物的设计和T克隆 | 第54页 |
| ·外源基因融合表达 | 第54-55页 |
| ·诱导表达 | 第55页 |
| ·抗血清的制备及纯化 | 第55-57页 |
| 第四章 鸭瘟病毒UL32基因编码蛋白的亚细胞定位 | 第57-66页 |
| 1 材料 | 第57页 |
| ·毒株/细胞 | 第57页 |
| ·主要试剂及配制 | 第57页 |
| ·主要仪器设备 | 第57页 |
| 2 实验方法 | 第57-59页 |
| ·间接免疫荧光检测DPV UL32细胞定位方法的建立及优化 | 第57-59页 |
| ·DPV UL32基因产物亚细胞定位的动态监测 | 第59页 |
| 3 结果 | 第59-63页 |
| ·间接免疫荧光检测DPV UL32亚细胞定位方法的建立及优化 | 第59-60页 |
| ·DPV UL32基因产物亚细胞定位的动态监测 | 第60-63页 |
| 4 讨论 | 第63-66页 |
| ·关于蛋白定位研究的方法 | 第63-64页 |
| ·DPV UL32蛋白在感染宿主细胞内的定位与功能预测 | 第64页 |
| ·DPV UL32宿主亚细胞定位与病毒增殖相关性的初步探讨 | 第64-66页 |
| 第五章 鸭瘟病毒UL32基因转录及表达时相分析 | 第66-79页 |
| 1 材料 | 第66-67页 |
| ·毒株/细胞 | 第66页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第66-67页 |
| ·主要仪器设备 | 第67页 |
| 2 实验方法 | 第67-70页 |
| ·鸭瘟病毒体外感染宿主细胞UL32转录时相分析 | 第67-69页 |
| ·鸭瘟病毒体外感染宿主细胞UL32基因的表达时相分析 | 第69-70页 |
| 3 结果 | 第70-76页 |
| ·鸭瘟病毒体外感染宿主细胞UL32转录时相分析 | 第70-75页 |
| ·鸭瘟病毒体外感染宿主细胞UL32基因的表达时相分析 | 第75-76页 |
| 4 讨论 | 第76-79页 |
| ·转录时相研究方法的确立 | 第76-77页 |
| ·关于UL32基因转录时相的研究 | 第77-78页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第78页 |
| ·病毒UL32基因表达谱分析 | 第78-79页 |
| 第三部分 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 作者简介 | 第88页 |
