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嗜群血蜱Hc-23基因的克隆与原核表达研究

中文摘要第1-4页
Abstract第4-6页
目录第6-9页
第一章 文献综述 嗜群血蜱研究进展第9-17页
 1 概况第9页
 2 形态学第9-10页
 3 流行病学第10-11页
   ·家畜和家禽感染情况第10页
   ·野生动物感染情况第10页
   ·对人的危害第10-11页
   ·活动季节第11页
   ·活动范围第11页
 4 生活史第11-12页
 5 携带病原第12-14页
   ·螺旋体第12-13页
   ·立克次体第13-14页
 6 分子分类学第14-15页
 7 防治第15-16页
 8 实验目的意义第16-17页
第二章 嗜群血蜱Hc-23基因的克隆与原核表达第17-42页
 1 材料与方法第17-26页
   ·材料第17-19页
     ·虫株、菌株及质粒载体第17页
     ·主要试剂第17页
     ·主要仪器设备第17页
     ·主要溶液的配制第17-19页
     ·主要生物信息数据库和计算机软件第19页
   ·方法第19-26页
     ·Hc-23基因的克隆第19-22页
     ·pET32a-Hc-23原核表达载体构建第22-24页
     ·重组pET-32a(+)-Hc-23质粒在大肠杆菌中的诱导表达第24-25页
     ·重组表达蛋白的纯化与免疫印迹分析第25-26页
 2 试验结果第26-36页
   ·Hc-23基因的克隆质粒的构建第27-28页
     ·Hc-23基因的PCR扩增第27页
     ·重组克隆质粒的PCR鉴定第27页
     ·Hc-23基因在嗜群血蜱不同发育阶段的表达情况第27页
     ·pMD18-T-Hc-23重组质粒的序列鉴定第27-28页
   ·Hc-23基因的亚克隆第28-29页
     ·加酶切位点引物的PCR扩增第28页
     ·重组质粒的PCR与酶切鉴定第28-29页
   ·pET32a-Hc-23重组表达质粒的构建与鉴定第29-34页
     ·重组表达质粒的双酶切鉴定第29页
     ·pET32a-Hc-23原核表达质粒的序列分析第29-31页
     ·Hc-23基因片断的蛋白质生物信息学分析第31-34页
   ·pET32a-Hc-23原核表达产物的SDS-PAGE电泳第34-35页
   ·重组表达蛋白纯化及Western-blot分析第35-36页
 3 讨论第36-40页
   ·关于血蜱RNA的抽提第36-37页
   ·Hc-23基因基因的扩增第37-38页
   ·Hc-23基因在嗜群血蜱不同发育阶段的表达分析第38页
   ·Hc-23基因在原核表达系统pET-32a(+)中的表达第38-39页
   ·包涵体的形成第39-40页
   ·表达产物的免疫印迹第40页
 4 结论第40-42页
参考文献第42-48页
致谢第48-49页
攻读硕士学位期间发表论文第49页

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