中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
目录 | 第6-9页 |
第一章 文献综述 嗜群血蜱研究进展 | 第9-17页 |
1 概况 | 第9页 |
2 形态学 | 第9-10页 |
3 流行病学 | 第10-11页 |
·家畜和家禽感染情况 | 第10页 |
·野生动物感染情况 | 第10页 |
·对人的危害 | 第10-11页 |
·活动季节 | 第11页 |
·活动范围 | 第11页 |
4 生活史 | 第11-12页 |
5 携带病原 | 第12-14页 |
·螺旋体 | 第12-13页 |
·立克次体 | 第13-14页 |
6 分子分类学 | 第14-15页 |
7 防治 | 第15-16页 |
8 实验目的意义 | 第16-17页 |
第二章 嗜群血蜱Hc-23基因的克隆与原核表达 | 第17-42页 |
1 材料与方法 | 第17-26页 |
·材料 | 第17-19页 |
·虫株、菌株及质粒载体 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17页 |
·主要仪器设备 | 第17页 |
·主要溶液的配制 | 第17-19页 |
·主要生物信息数据库和计算机软件 | 第19页 |
·方法 | 第19-26页 |
·Hc-23基因的克隆 | 第19-22页 |
·pET32a-Hc-23原核表达载体构建 | 第22-24页 |
·重组pET-32a(+)-Hc-23质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第24-25页 |
·重组表达蛋白的纯化与免疫印迹分析 | 第25-26页 |
2 试验结果 | 第26-36页 |
·Hc-23基因的克隆质粒的构建 | 第27-28页 |
·Hc-23基因的PCR扩增 | 第27页 |
·重组克隆质粒的PCR鉴定 | 第27页 |
·Hc-23基因在嗜群血蜱不同发育阶段的表达情况 | 第27页 |
·pMD18-T-Hc-23重组质粒的序列鉴定 | 第27-28页 |
·Hc-23基因的亚克隆 | 第28-29页 |
·加酶切位点引物的PCR扩增 | 第28页 |
·重组质粒的PCR与酶切鉴定 | 第28-29页 |
·pET32a-Hc-23重组表达质粒的构建与鉴定 | 第29-34页 |
·重组表达质粒的双酶切鉴定 | 第29页 |
·pET32a-Hc-23原核表达质粒的序列分析 | 第29-31页 |
·Hc-23基因片断的蛋白质生物信息学分析 | 第31-34页 |
·pET32a-Hc-23原核表达产物的SDS-PAGE电泳 | 第34-35页 |
·重组表达蛋白纯化及Western-blot分析 | 第35-36页 |
3 讨论 | 第36-40页 |
·关于血蜱RNA的抽提 | 第36-37页 |
·Hc-23基因基因的扩增 | 第37-38页 |
·Hc-23基因在嗜群血蜱不同发育阶段的表达分析 | 第38页 |
·Hc-23基因在原核表达系统pET-32a(+)中的表达 | 第38-39页 |
·包涵体的形成 | 第39-40页 |
·表达产物的免疫印迹 | 第40页 |
4 结论 | 第40-42页 |
参考文献 | 第42-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第49页 |