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荔枝EC长期继代保持与体胚发生及其蛋白质组学研究

目录第1-10页
缩写词第10-12页
摘要第12-14页
Abstract第14-17页
第一章 引言第17-25页
 1 植物体细胞胚胎发生研究进展第17-18页
 2 植物体胚发生的蛋白质组学研究进展第18-22页
   ·植物蛋白质组学研究第18-19页
   ·植物体胚发生的蛋白质组学研究进展第19-22页
 3 荔枝生物技术研究进展第22-23页
   ·荔枝生物技术研究概况第22页
   ·荔枝体胚发生研究进展第22-23页
     ·荔枝胚性愈伤组织诱导与继代保持第22-23页
     ·荔枝体细胞胚胎发生机理研究第23页
 4 本研究的意义及主要研究内容第23-25页
   ·本研究的意义第23-24页
   ·本研究的主要内容第24-25页
第二章 荔枝不同类型胚性细胞系的长期继代保持及体胚发生第25-42页
 第一节 荔枝胚性愈伤组织的长期继代保持及不同细胞系间的差异第25-29页
  1 材料与方法第26-27页
   ·材料第26页
   ·方法第26-27页
     ·荔枝EC、TREC 和TPEC 的继代保持第26-27页
  2 结果与分析第27-29页
   ·荔枝EC、TREC 和TPEC 的继代保持第27页
   ·荔枝EC 不同细胞系的差异第27页
   ·荔枝TREC 不同细胞系的差异第27-28页
   ·荔枝TPEC 不同细胞系的差异第28-29页
  3 讨论第29页
   ·荔枝不同类型胚性细胞系继代培养中的差异第29页
   ·2,4-D 在荔枝转基因抗性胚性愈伤组织继代保持中的作用第29页
   ·潮霉素在荔枝转基因抗性胚性愈伤组织继代保持中的作用第29页
 第二节 荔枝胚性愈伤组织的体胚发生第29-32页
  1 材料与方法第30-31页
   ·材料第30页
   ·方法第30-31页
     ·荔枝EC、TREC 和TPEC 的继代保持第30页
     ·荔枝EC、TREC 和TPEC 高度同步化培养物的培养第30页
     ·荔枝EC、TREC 和TPEC 的体胚发生第30-31页
  2 结果与分析第31页
   ·ZT 和 KT 对荔枝体胚发生的影响第31页
   ·同步化调控对荔枝TPEC 体胚诱导的影响第31页
  3 讨论第31-32页
   ·荔枝EC、TREC 和TPEC 长期继代保持的关键技术第31页
   ·ZT 促进荔枝体胚发生第31-32页
 第三节 荔枝体胚成熟培养第32-33页
  1 材料与方法第32页
   ·材料第32页
   ·方法第32页
  2 结果与分析第32-33页
   ·荔枝体胚成熟过程的观察第32-33页
   ·不同类型细胞系来源体胚成熟上的差异第33页
  3 讨论第33页
 第四节 荔枝不同细胞系间的RAPD 分析第33-39页
  1 材料与方法第33-36页
   ·材料第33-34页
   ·主要实验设备、实验试剂及所需溶液的配制第34-35页
     ·主要实验设备第34页
     ·主要试验试剂第34页
     ·主要溶液的配制第34-35页
   ·RAPD 分析方法第35-36页
     ·荔枝胚性愈伤组织基因组DNA 的提取第35-36页
     ·荔枝胚性愈伤组织基因组DNA 的检测第36页
     ·DNA 扩增反应第36页
     ·RAPD 反应引物筛选第36页
  2 结果与分析第36-38页
   ·荔枝胚性愈伤组织基因组DNA 的提取质量第36页
   ·RAPD 引物扩增多态性第36页
   ·荔枝不同类型细胞系样品RAPD 标记差异第36-38页
  3 讨论第38-39页
 第五节 荔枝不同类型胚性细胞系长期继代保持过程中的GUS 检测第39-42页
  1 材料与方法第39-40页
   ·材料第39页
   ·方法第39-40页
     ·荔枝转基因抗性愈伤组织的GUS 组织化学检测第39-40页
       ·GUS 组织化学检测的基本原理第39页
       ·试验溶液的配制第39-40页
       ·GUS 组织化学检测步骤第40页
  2 结果与分析第40页
   ·不同抗性愈伤组织GUS 的表达情况第40页
   ·不同转基因原生质体再生胚性愈伤组织GUS 的表达情况第40页
  3 讨论第40-42页
第三章 荔枝体胚发生过程中蛋白质的双向电泳分析第42-62页
 1 材料与方法第42-45页
   ·供试材料第42页
   ·仪器与试剂第42-43页
     ·主要仪器设备第42页
     ·主要试剂第42-43页
   ·方法第43-45页
     ·蛋白质样品的提取第43-44页
     ·蛋白质样品的定量第44页
     ·荔枝体胚发生培养物蛋白质样品双向电泳第44-45页
     ·电泳后检测第45页
 2 结果与分析第45-55页
   ·凝胶软件分析过程中参数的设置第45-46页
   ·荔枝体胚发生过程中凝胶上总蛋白点数目变化第46-47页
   ·荔枝体胚发生过程中凝胶上蛋白点组成变化第47-51页
   ·荔枝体胚发生过程中凝胶上不同pI 值蛋白点数目变化第51-52页
   ·荔枝体胚发生过程中凝胶上不同pI 值蛋白点比例变化第52-53页
   ·荔枝体胚发生过程中不同MW 蛋白点数目变化第53-54页
   ·荔枝体胚发生过程中不同MW 蛋白点比例变化第54-55页
 3 15 KD 以下小分子量蛋白点在荔枝体胚发生过程中变化第55-60页
   ·15 KD 以下小分子量蛋白点数目变化第55页
   ·低于15 KD 小分子量蛋白点荔枝体胚发生过程中等电点组成变化第55-59页
     ·早期愈伤组织20 d 时低于15 KD 小分子量蛋白点等电点组成第55-56页
     ·MS 培养20 d 的荔枝体胚低于15 KD 小分子量蛋白点等电点组成第56页
     ·ZT 培养20 d 的荔枝体胚低于15 KD 小分子量蛋白点等电点组成第56-57页
     ·MS 培养30 d 的荔枝体胚低于15 KD 小分子量蛋白点等电点组成第57页
     ·ZT 培养30 d 的荔枝体胚低于15 KD 小分子量蛋白点等电点组成第57-58页
     ·MS 培养40 d 的荔枝体胚低于15 KD 小分子量蛋白点等电点组成第58页
     ·ZT 培养40 d 的荔枝体胚中低于15 KD 小分子量蛋白点等电点组成第58-59页
   ·低于15 KD 小分子量蛋白点荔枝体胚发生过程中等电点组成变化第59-60页
 4 讨论第60-62页
   ·荔枝胚性愈伤组织经历体胚发生初期总蛋白点变化第60-61页
   ·从ZT 20 d 到ZT 30 d 的体胚发生正常代谢最活跃第61页
   ·荔枝体胚发生晚期特有蛋白增多第61-62页
第四章 荔枝体胚发生过程中相关蛋白的质谱鉴定第62-89页
 1 材料与方法第62页
   ·供试材料第62页
   ·荔枝体胚发生过程的相关蛋白的质谱鉴定第62页
 2 结果与分析第62-82页
   ·质谱鉴定的体胚发生相关蛋白点在双向电泳凝胶上分布第62-63页
   ·荔枝体胚发生过程质谱鉴定的相关蛋白第63-68页
   ·荔枝体胚发生过程中质谱鉴定蛋白表达变化第68-80页
     ·荔枝体胚发生过程中过氧化物酶(CL158)第68页
     ·荔枝体胚发生过程中过氧化物酶(CL222) 表达变化第68-69页
     ·荔枝体胚发生过程中过氧化物酶(CL227) 表达变化第69页
     ·荔枝体胚发生过程中过氧化物酶(CL25) 表达变化第69-70页
     ·荔枝体胚发生过程中氧化还原酶(CH21) 表达变化第70页
     ·荔枝体胚发生过程中细胞色素 c 氧化酶 5B 亚基(CL242)表达变化第70-71页
     ·荔枝体胚发生过程中异黄酮还原酶相关蛋白(CL164) 表达变化第71页
     ·荔枝体胚发生过程中GST22 谷胱甘肽转硫酶(CH76) 表达变化第71-72页
     ·荔枝体胚发生过程中新生多肽相关复合物alpha 亚基类似蛋白(CH4) 表达变化第72页
     ·荔枝体胚发生过程中新生多肽相关复合物alpha 链(CH9)表达变化第72-73页
     ·荔枝体胚发生过程中内肽酶(CH16) 表达变化第73页
     ·荔枝体胚发生过程中核酸结合蛋白GRP2(CH78) 表达变化第73-74页
     ·荔枝体胚发生过程中蛋白酶体贝塔亚基3(CH96) 表达变化第74页
     ·荔枝体胚发生过程中假定贝塔6 亚基蛋白酶(CL237)表达变化第74-75页
     ·荔枝体胚发生过程中温度诱导脂钙蛋白(CL262)表达变化第75页
     ·荔枝体胚发生过程中胞质谷氨酰胺合成酶(CL59)表达变化第75-76页
     ·荔枝体胚发生过程中磷酸丙糖异构酶(CL27)表达变化第76页
     ·荔枝体胚发生过程中烯醇酶(CL85)表达变化第76-77页
     ·荔枝体胚发生过程中贝塔亚基核酮糖二磷酸羧化酶亚基结合蛋白(CL193)表达变化第77-78页
     ·荔枝体胚发生过程中ATP 合酶D 链(CH235)表达变化第78页
     ·荔枝体胚发生过程中尿嘧啶磷酸核糖转移酶(CL166)表达变化第78-79页
     ·荔枝体胚发生过程中Z-box 结合因子3(CL169)表达变化第79页
     ·荔枝体胚发生过程中BTF3 碱性转录因子3(CH183)表达变化第79-80页
   ·质谱鉴定的相关蛋白功能分析第80-82页
     ·质谱鉴定的相关蛋白功能分类第80-82页
 3 讨论第82-89页
   ·能量和碳代谢相关蛋白参与荔枝正常体胚发生过程第82-83页
   ·胁迫应答和氧化还原相关蛋白参与荔枝正常体胚发生过程第83-85页
   ·氨基酸代谢相关蛋白参与荔枝正常体胚发生过程第85页
   ·蛋白质代谢与修复相关蛋白参与荔枝正常体胚发生过程第85-86页
   ·脂类代谢相关蛋白参与荔枝正常体胚发生过程第86-87页
   ·信号转导相关蛋白参与荔枝正常体胚发生过程第87页
   ·核酸代谢相关蛋白参与荔枝正常体胚发生过程第87页
   ·在添加ZT 培养基上荔枝正常体胚发生过程中相关蛋白的表达规律第87页
   ·在添加ZT 和未添加ZT 培养20 d 时荔枝体胚发生过程相关蛋白表达的差异第87-89页
第五章 小结第89-93页
 1 荔枝不同类型细胞系胚性愈伤组织的长期继代保持及差异第89页
 2 荔枝体胚发生过程中总蛋白点数目变化第89-90页
 3 荔枝体胚发生过程中总蛋白点等电点(pI)变化第90页
 4 荔枝体胚发生过程中总蛋白点分子量(MW)变化第90-91页
 5 荔枝体胚发生过程中15KD 小分子量蛋白点数目变化第91页
 6 荔枝体胚发生过程相关蛋白表达变化第91页
 7 荔枝体胚发生过程中相关蛋白的功能分类及其蛋白表达变化第91-93页
参考文献第93-99页
附录第99-138页
致谢第138页

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