| 目录 | 第1-10页 |
| 缩写词 | 第10-12页 |
| 摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-17页 |
| 第一章 引言 | 第17-25页 |
| 1 植物体细胞胚胎发生研究进展 | 第17-18页 |
| 2 植物体胚发生的蛋白质组学研究进展 | 第18-22页 |
| ·植物蛋白质组学研究 | 第18-19页 |
| ·植物体胚发生的蛋白质组学研究进展 | 第19-22页 |
| 3 荔枝生物技术研究进展 | 第22-23页 |
| ·荔枝生物技术研究概况 | 第22页 |
| ·荔枝体胚发生研究进展 | 第22-23页 |
| ·荔枝胚性愈伤组织诱导与继代保持 | 第22-23页 |
| ·荔枝体细胞胚胎发生机理研究 | 第23页 |
| 4 本研究的意义及主要研究内容 | 第23-25页 |
| ·本研究的意义 | 第23-24页 |
| ·本研究的主要内容 | 第24-25页 |
| 第二章 荔枝不同类型胚性细胞系的长期继代保持及体胚发生 | 第25-42页 |
| 第一节 荔枝胚性愈伤组织的长期继代保持及不同细胞系间的差异 | 第25-29页 |
| 1 材料与方法 | 第26-27页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-27页 |
| ·荔枝EC、TREC 和TPEC 的继代保持 | 第26-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-29页 |
| ·荔枝EC、TREC 和TPEC 的继代保持 | 第27页 |
| ·荔枝EC 不同细胞系的差异 | 第27页 |
| ·荔枝TREC 不同细胞系的差异 | 第27-28页 |
| ·荔枝TPEC 不同细胞系的差异 | 第28-29页 |
| 3 讨论 | 第29页 |
| ·荔枝不同类型胚性细胞系继代培养中的差异 | 第29页 |
| ·2,4-D 在荔枝转基因抗性胚性愈伤组织继代保持中的作用 | 第29页 |
| ·潮霉素在荔枝转基因抗性胚性愈伤组织继代保持中的作用 | 第29页 |
| 第二节 荔枝胚性愈伤组织的体胚发生 | 第29-32页 |
| 1 材料与方法 | 第30-31页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-31页 |
| ·荔枝EC、TREC 和TPEC 的继代保持 | 第30页 |
| ·荔枝EC、TREC 和TPEC 高度同步化培养物的培养 | 第30页 |
| ·荔枝EC、TREC 和TPEC 的体胚发生 | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31页 |
| ·ZT 和 KT 对荔枝体胚发生的影响 | 第31页 |
| ·同步化调控对荔枝TPEC 体胚诱导的影响 | 第31页 |
| 3 讨论 | 第31-32页 |
| ·荔枝EC、TREC 和TPEC 长期继代保持的关键技术 | 第31页 |
| ·ZT 促进荔枝体胚发生 | 第31-32页 |
| 第三节 荔枝体胚成熟培养 | 第32-33页 |
| 1 材料与方法 | 第32页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·方法 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-33页 |
| ·荔枝体胚成熟过程的观察 | 第32-33页 |
| ·不同类型细胞系来源体胚成熟上的差异 | 第33页 |
| 3 讨论 | 第33页 |
| 第四节 荔枝不同细胞系间的RAPD 分析 | 第33-39页 |
| 1 材料与方法 | 第33-36页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·主要实验设备、实验试剂及所需溶液的配制 | 第34-35页 |
| ·主要实验设备 | 第34页 |
| ·主要试验试剂 | 第34页 |
| ·主要溶液的配制 | 第34-35页 |
| ·RAPD 分析方法 | 第35-36页 |
| ·荔枝胚性愈伤组织基因组DNA 的提取 | 第35-36页 |
| ·荔枝胚性愈伤组织基因组DNA 的检测 | 第36页 |
| ·DNA 扩增反应 | 第36页 |
| ·RAPD 反应引物筛选 | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-38页 |
| ·荔枝胚性愈伤组织基因组DNA 的提取质量 | 第36页 |
| ·RAPD 引物扩增多态性 | 第36页 |
| ·荔枝不同类型细胞系样品RAPD 标记差异 | 第36-38页 |
| 3 讨论 | 第38-39页 |
| 第五节 荔枝不同类型胚性细胞系长期继代保持过程中的GUS 检测 | 第39-42页 |
| 1 材料与方法 | 第39-40页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-40页 |
| ·荔枝转基因抗性愈伤组织的GUS 组织化学检测 | 第39-40页 |
| ·GUS 组织化学检测的基本原理 | 第39页 |
| ·试验溶液的配制 | 第39-40页 |
| ·GUS 组织化学检测步骤 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40页 |
| ·不同抗性愈伤组织GUS 的表达情况 | 第40页 |
| ·不同转基因原生质体再生胚性愈伤组织GUS 的表达情况 | 第40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 荔枝体胚发生过程中蛋白质的双向电泳分析 | 第42-62页 |
| 1 材料与方法 | 第42-45页 |
| ·供试材料 | 第42页 |
| ·仪器与试剂 | 第42-43页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-45页 |
| ·蛋白质样品的提取 | 第43-44页 |
| ·蛋白质样品的定量 | 第44页 |
| ·荔枝体胚发生培养物蛋白质样品双向电泳 | 第44-45页 |
| ·电泳后检测 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-55页 |
| ·凝胶软件分析过程中参数的设置 | 第45-46页 |
| ·荔枝体胚发生过程中凝胶上总蛋白点数目变化 | 第46-47页 |
| ·荔枝体胚发生过程中凝胶上蛋白点组成变化 | 第47-51页 |
| ·荔枝体胚发生过程中凝胶上不同pI 值蛋白点数目变化 | 第51-52页 |
| ·荔枝体胚发生过程中凝胶上不同pI 值蛋白点比例变化 | 第52-53页 |
| ·荔枝体胚发生过程中不同MW 蛋白点数目变化 | 第53-54页 |
| ·荔枝体胚发生过程中不同MW 蛋白点比例变化 | 第54-55页 |
| 3 15 KD 以下小分子量蛋白点在荔枝体胚发生过程中变化 | 第55-60页 |
| ·15 KD 以下小分子量蛋白点数目变化 | 第55页 |
| ·低于15 KD 小分子量蛋白点荔枝体胚发生过程中等电点组成变化 | 第55-59页 |
| ·早期愈伤组织20 d 时低于15 KD 小分子量蛋白点等电点组成 | 第55-56页 |
| ·MS 培养20 d 的荔枝体胚低于15 KD 小分子量蛋白点等电点组成 | 第56页 |
| ·ZT 培养20 d 的荔枝体胚低于15 KD 小分子量蛋白点等电点组成 | 第56-57页 |
| ·MS 培养30 d 的荔枝体胚低于15 KD 小分子量蛋白点等电点组成 | 第57页 |
| ·ZT 培养30 d 的荔枝体胚低于15 KD 小分子量蛋白点等电点组成 | 第57-58页 |
| ·MS 培养40 d 的荔枝体胚低于15 KD 小分子量蛋白点等电点组成 | 第58页 |
| ·ZT 培养40 d 的荔枝体胚中低于15 KD 小分子量蛋白点等电点组成 | 第58-59页 |
| ·低于15 KD 小分子量蛋白点荔枝体胚发生过程中等电点组成变化 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| ·荔枝胚性愈伤组织经历体胚发生初期总蛋白点变化 | 第60-61页 |
| ·从ZT 20 d 到ZT 30 d 的体胚发生正常代谢最活跃 | 第61页 |
| ·荔枝体胚发生晚期特有蛋白增多 | 第61-62页 |
| 第四章 荔枝体胚发生过程中相关蛋白的质谱鉴定 | 第62-89页 |
| 1 材料与方法 | 第62页 |
| ·供试材料 | 第62页 |
| ·荔枝体胚发生过程的相关蛋白的质谱鉴定 | 第62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-82页 |
| ·质谱鉴定的体胚发生相关蛋白点在双向电泳凝胶上分布 | 第62-63页 |
| ·荔枝体胚发生过程质谱鉴定的相关蛋白 | 第63-68页 |
| ·荔枝体胚发生过程中质谱鉴定蛋白表达变化 | 第68-80页 |
| ·荔枝体胚发生过程中过氧化物酶(CL158) | 第68页 |
| ·荔枝体胚发生过程中过氧化物酶(CL222) 表达变化 | 第68-69页 |
| ·荔枝体胚发生过程中过氧化物酶(CL227) 表达变化 | 第69页 |
| ·荔枝体胚发生过程中过氧化物酶(CL25) 表达变化 | 第69-70页 |
| ·荔枝体胚发生过程中氧化还原酶(CH21) 表达变化 | 第70页 |
| ·荔枝体胚发生过程中细胞色素 c 氧化酶 5B 亚基(CL242)表达变化 | 第70-71页 |
| ·荔枝体胚发生过程中异黄酮还原酶相关蛋白(CL164) 表达变化 | 第71页 |
| ·荔枝体胚发生过程中GST22 谷胱甘肽转硫酶(CH76) 表达变化 | 第71-72页 |
| ·荔枝体胚发生过程中新生多肽相关复合物alpha 亚基类似蛋白(CH4) 表达变化 | 第72页 |
| ·荔枝体胚发生过程中新生多肽相关复合物alpha 链(CH9)表达变化 | 第72-73页 |
| ·荔枝体胚发生过程中内肽酶(CH16) 表达变化 | 第73页 |
| ·荔枝体胚发生过程中核酸结合蛋白GRP2(CH78) 表达变化 | 第73-74页 |
| ·荔枝体胚发生过程中蛋白酶体贝塔亚基3(CH96) 表达变化 | 第74页 |
| ·荔枝体胚发生过程中假定贝塔6 亚基蛋白酶(CL237)表达变化 | 第74-75页 |
| ·荔枝体胚发生过程中温度诱导脂钙蛋白(CL262)表达变化 | 第75页 |
| ·荔枝体胚发生过程中胞质谷氨酰胺合成酶(CL59)表达变化 | 第75-76页 |
| ·荔枝体胚发生过程中磷酸丙糖异构酶(CL27)表达变化 | 第76页 |
| ·荔枝体胚发生过程中烯醇酶(CL85)表达变化 | 第76-77页 |
| ·荔枝体胚发生过程中贝塔亚基核酮糖二磷酸羧化酶亚基结合蛋白(CL193)表达变化 | 第77-78页 |
| ·荔枝体胚发生过程中ATP 合酶D 链(CH235)表达变化 | 第78页 |
| ·荔枝体胚发生过程中尿嘧啶磷酸核糖转移酶(CL166)表达变化 | 第78-79页 |
| ·荔枝体胚发生过程中Z-box 结合因子3(CL169)表达变化 | 第79页 |
| ·荔枝体胚发生过程中BTF3 碱性转录因子3(CH183)表达变化 | 第79-80页 |
| ·质谱鉴定的相关蛋白功能分析 | 第80-82页 |
| ·质谱鉴定的相关蛋白功能分类 | 第80-82页 |
| 3 讨论 | 第82-89页 |
| ·能量和碳代谢相关蛋白参与荔枝正常体胚发生过程 | 第82-83页 |
| ·胁迫应答和氧化还原相关蛋白参与荔枝正常体胚发生过程 | 第83-85页 |
| ·氨基酸代谢相关蛋白参与荔枝正常体胚发生过程 | 第85页 |
| ·蛋白质代谢与修复相关蛋白参与荔枝正常体胚发生过程 | 第85-86页 |
| ·脂类代谢相关蛋白参与荔枝正常体胚发生过程 | 第86-87页 |
| ·信号转导相关蛋白参与荔枝正常体胚发生过程 | 第87页 |
| ·核酸代谢相关蛋白参与荔枝正常体胚发生过程 | 第87页 |
| ·在添加ZT 培养基上荔枝正常体胚发生过程中相关蛋白的表达规律 | 第87页 |
| ·在添加ZT 和未添加ZT 培养20 d 时荔枝体胚发生过程相关蛋白表达的差异 | 第87-89页 |
| 第五章 小结 | 第89-93页 |
| 1 荔枝不同类型细胞系胚性愈伤组织的长期继代保持及差异 | 第89页 |
| 2 荔枝体胚发生过程中总蛋白点数目变化 | 第89-90页 |
| 3 荔枝体胚发生过程中总蛋白点等电点(pI)变化 | 第90页 |
| 4 荔枝体胚发生过程中总蛋白点分子量(MW)变化 | 第90-91页 |
| 5 荔枝体胚发生过程中15KD 小分子量蛋白点数目变化 | 第91页 |
| 6 荔枝体胚发生过程相关蛋白表达变化 | 第91页 |
| 7 荔枝体胚发生过程中相关蛋白的功能分类及其蛋白表达变化 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-99页 |
| 附录 | 第99-138页 |
| 致谢 | 第138页 |