| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 上篇 文献综述 | 第9-31页 |
| 第一章 荧光假单胞菌植物病害生物防治的研究进展 | 第10-20页 |
| 1 植物病害生物防治与拮抗微生物 | 第10-12页 |
| ·植物病害生物防治的概念 | 第10页 |
| ·用于植物病害生物防治的主要拮抗微生物种类 | 第10-12页 |
| 2 荧光假单胞菌的生防机制 | 第12-20页 |
| ·荧光假单胞菌的分类属性 | 第12页 |
| ·竞争作用 | 第12-13页 |
| ·抗生作用 | 第13-18页 |
| ·诱导抗性 | 第18-20页 |
| 第二章 生物膜及双精氨酸蛋白运输系统的研究进展 | 第20-31页 |
| 1 生物膜的研究进展 | 第20-25页 |
| ·什么是生物膜 | 第20页 |
| ·生物膜的组成及形成过程 | 第20-21页 |
| ·生物膜与定殖 | 第21-22页 |
| ·生物膜形成的相关因素 | 第22-25页 |
| 2 双精氨酸蛋白质运输系统的研究进展 | 第25-31页 |
| ·Tat转运系统的组成和遗传学特性 | 第25-27页 |
| ·Tat系统信号肽 | 第27-28页 |
| ·Tat系统的底物蛋白质 | 第28-29页 |
| ·Tat系统的功能 | 第29-31页 |
| 下篇 研究内容 | 第31-72页 |
| 第一章 荧光假单胞菌7-14突变体文库的建立及生物膜形成突变株的筛选 | 第32-54页 |
| 1 试验材料 | 第33-35页 |
| ·供试菌株和质粒 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33-34页 |
| ·菌株的培养条件 | 第34页 |
| ·引物 | 第34-35页 |
| ·引物合成与序列测定 | 第35页 |
| ·酶、抗生素及其它化学试剂 | 第35页 |
| 2 试验方法 | 第35-46页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第36-37页 |
| ·DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算 | 第37页 |
| ·PCR扩增、DNA酶切、连接、回收纯化和TA克隆 | 第37-38页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第38-40页 |
| ·地高辛标记探针Southern杂交试验 | 第40-42页 |
| ·Pf7-14转座子插入文库的构建及验证 | 第42-43页 |
| ·Pf7-14生物膜形成突变株的筛选和测定 | 第43-44页 |
| ·Pf7-14生物膜形成突变株中转座子拷贝数的验证 | 第44页 |
| ·生物膜形成突变株4B5和25C11转座子插入位点的鉴定 | 第44-45页 |
| ·序列分析 | 第45页 |
| ·突变体4B5和25C11转座子插入位点基因的克隆 | 第45页 |
| ·菌体在油菜叶片上的分布情况 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-52页 |
| ·Pf7-14转座子插入文库的构建及验证 | 第46-47页 |
| ·Pf7-14生物膜突变株25C11、4B5的获得 | 第47页 |
| ·mariner转座子的拷贝数鉴定 | 第47-48页 |
| ·转座子在菌株25C11和4B5中的插入位点鉴定 | 第48-50页 |
| ·Pf7-14 mmct基因、lipB基因的克隆 | 第50-52页 |
| ·Pf7-14、25C11和4B5在油菜叶片上的分布情况 | 第52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 第二章 Pf7-14 tatC基因的克隆、突变及功能初析 | 第54-72页 |
| 1 试验材料 | 第55-57页 |
| ·试验菌株、质粒 | 第55页 |
| ·培养基配制 | 第55-56页 |
| ·菌株的培养条件 | 第56页 |
| ·引物 | 第56-57页 |
| ·引物合成和序列测定 | 第57页 |
| ·酶、抗生素及化学试剂 | 第57页 |
| 2 试验方法 | 第57-61页 |
| ·细菌基因组DNA、质粒的提取和质粒DNA的转化 | 第57页 |
| ·DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算 | 第57页 |
| ·PCR扩增、DNA酶切、连接、回收纯化和TA克隆 | 第57页 |
| ·序列分析 | 第57页 |
| ·tatC基因(795bp)的克隆 | 第57-58页 |
| ·Pf7-14 tatC突变株的构建及验证 | 第58页 |
| ·互补菌株CPTATC的构建及验证 | 第58-59页 |
| ·生长速率测定 | 第59页 |
| ·蛋白酶的检测 | 第59-60页 |
| ·嗜铁素产量的检测 | 第60页 |
| ·生物膜测定 | 第60页 |
| ·游动性检测 | 第60页 |
| ·细胞形态观察 | 第60页 |
| ·对病原真菌的平板拮抗试验 | 第60-61页 |
| 3 结果 | 第61-69页 |
| ·Pf7-14 tatC基因的克隆及序列分析 | 第61-62页 |
| ·Pf7-14 tatC基因突变株的构建 | 第62-64页 |
| ·互补菌株CPTATC的构建及验证 | 第64-65页 |
| ·tatC基因的突变不影响Pf7-14正常生长 | 第65-66页 |
| ·tatC基因的突变影响了胞外蛋白酶和嗜铁素的产生 | 第66页 |
| ·tatC基因的突变降低了生物膜的形成 | 第66-67页 |
| ·tatC基因的突变降低了菌体的游动性 | 第67-68页 |
| ·tatC基因的突变没有改变细胞形态 | 第68-69页 |
| ·tatC基因突变不影响Pf-7-14对主要病原真菌的拮抗能力 | 第69页 |
| 4 讨论 | 第69-72页 |
| 附录 | 第72-82页 |
| 参考文献 | 第82-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
