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大肠杆菌F5菌毛胶体金免疫层析试纸条的研制及初步应用

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 引言第11-22页
   ·ETEC主要致病因子第11-16页
     ·菌毛第12-15页
     ·肠毒素第15-16页
   ·F5菌毛的检测方法第16-17页
     ·电子显微镜(EM)检查第16页
     ·甘露糖抵抗血凝反应(MRHA)与血凝抑制反应(HI)第16页
     ·免疫血清学反应第16页
     ·小肠上皮细胞粘附试验第16-17页
     ·核酸探针方法第17页
     ·PCR方法第17页
   ·免疫胶体金技术研究进展第17-21页
     ·免疫胶体金技术第17-18页
     ·免疫胶体金技术的应用第18-20页
     ·免疫胶体金诊断技术的发展趋势第20-21页
   ·研究目的与意义第21-22页
2 材料与方法第22-33页
   ·材料第22-24页
     ·引物、菌株、血清、实验动物及细胞系第22页
     ·主要试剂第22-24页
     ·制备试纸条的材料第24页
     ·主要仪器第24页
   ·实验方法第24-33页
     ·抗F5单抗腹水的制备及其抗体IgG的纯化第24-25页
     ·兔抗F5菌毛血清的制备及其抗体IgG的纯化第25-27页
     ·细菌的培养及F5菌毛的提取第27页
     ·几种常用方法对F5菌毛的检测第27-28页
     ·胶体金的制备第28-29页
     ·免疫胶体金探针的制备第29页
     ·免疫层析反应条件的优化第29-31页
     ·胶体金免疫层析试纸条的组装和检测第31-32页
     ·免疫胶体金试纸条的初步应用第32-33页
3 结果第33-45页
   ·抗F5单抗腹水的制备及其抗体IgG的纯化第33-34页
     ·纯化后腹水单抗蛋白浓度的测定第33页
     ·纯化后腹水单抗效价的测定第33页
     ·纯化后腹水单抗纯度的检测第33-34页
   ·兔抗F5血清制备及其抗体IgG的纯化第34-35页
     ·F5蛋白的诱导表达及其纯化第34页
     ·纯化后兔抗F5血清抗体蛋白的测定第34页
     ·纯化后兔抗F5菌毛血清抗体效价的测定第34页
     ·纯化后血清多抗纯度的检测第34-35页
   ·几种常用方法对F5菌毛的检测第35-37页
     ·间接夹心ELISA检测第35-36页
     ·平板凝集检测第36页
     ·PCR检测第36-37页
   ·胶体金质量的评价第37-38页
   ·免疫胶体金探针的制备第38-40页
     ·胶体金吸附抗体蛋白最佳pH值的确定第38页
     ·抗体结合胶体金最佳蛋白浓度的确定第38-39页
     ·免疫胶体金探针的检测第39-40页
   ·免疫层析反应条件的优化第40-41页
     ·试纸条组装材料的选择第40页
     ·缓冲溶液的优化第40-41页
   ·胶体金免疫层析试纸条的组装第41-45页
     ·组装后试纸条的结果判定说明第41-42页
     ·试纸条性能的测定第42-44页
     ·试纸条的初步应用第44-45页
4 讨论第45-48页
   ·影响胶体金检测试纸条制备的几个关键技术环节第45-47页
     ·胶体金溶液的选择第45页
     ·金标单抗的制备第45-46页
     ·试纸条各组分和材料的选择优化第46-47页
   ·检测样品的选择第47-48页
5 结论第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-57页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第57页

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