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大肠杆菌F4、F5天然菌毛及表达蛋白鸡卵黄抗体的制备及初步应用

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-13页
1 引言第13-28页
   ·大肠杆菌性哺乳仔猪腹泻概述第13-14页
   ·致仔猪腹泻大肠杆菌的主要毒力因子第14-21页
     ·肠毒素性大肠杆菌菌毛第14-19页
     ·肠毒素第19-21页
   ·大肠杆菌性仔猪腹泻的防治第21-22页
     ·疫苗免疫第21页
     ·药物防治第21页
     ·卵黄抗体防治第21-22页
   ·卵黄抗体的研究进展第22-26页
     ·卵黄抗体的结构第22-23页
     ·卵黄抗体的特点第23-24页
     ·卵黄抗体的优越性第24页
     ·卵黄抗体的应用第24-26页
     ·卵黄抗体应用中存在的问题第26页
   ·研究目的与意义第26-28页
2 材料与方法第28-39页
   ·实验材料第28-29页
     ·菌株和实验动物第28页
     ·PCR扩增引物第28页
     ·主要试剂第28-29页
     ·主要仪器第29页
   ·实验方法第29-39页
     ·大肠杆菌K88ab、K99天然菌毛的提取第29-30页
     ·大肠杆菌K88ab及K99菌毛蛋白的表达第30-32页
     ·K88ab蛋白、菌毛Western blot鉴定第32页
     ·K99蛋白、菌毛Western blot鉴定第32-33页
     ·免疫程序设定第33页
     ·卵黄抗体的提取第33-34页
     ·卵黄抗体安全检验第34页
     ·卵黄抗体效价的检测第34-35页
     ·卵黄抗体特异性检验第35-36页
     ·卵黄抗体效力评价第36-38页
     ·保存期实验第38-39页
3 结果第39-55页
   ·K88ab、K99菌毛的鉴定第39-40页
     ·K99菌毛的提取第39页
     ·K99菌毛浓度测定第39页
     ·K88ab菌毛的提取第39-40页
     ·K88ab菌毛浓度测定第40页
   ·K88ab及K99菌毛蛋白的表达与鉴定第40-47页
     ·K88ab、K99基因的克隆第40-41页
     ·K88ab、K99重组质粒的PCR及双酶切鉴定第41-43页
     ·K88ab、K99重组表达质粒的构建和鉴定第43-44页
     ·K88ab、K99重组菌毛蛋白的表达第44-45页
     ·K88ab、K99重组菌毛蛋白的纯化第45-46页
     ·K88ab菌毛和K88ab重组蛋白的Western blot检测第46页
     ·K99菌毛和K99重组蛋白的Western blot检测第46-47页
   ·卵黄抗体效价的检测第47-49页
     ·间接ELISA方法的建立第47-48页
     ·不同方法提取的卵黄抗体效价比较第48-49页
     ·第三次免疫后卵黄抗体效价第49页
   ·卵黄抗体特异性检验第49-50页
   ·卵黄抗体安全检验第50页
     ·物理性状检验第50页
     ·无菌检验第50页
     ·支原体检验第50页
     ·安全检验第50页
   ·体外吸附与吸附抑制实验第50-52页
     ·体外吸附抑制实验第51-52页
   ·预防试验第52-54页
   ·治疗试验第54页
   ·保存期实验第54-55页
4 讨论第55-58页
   ·卵黄抗体在预防仔猪腹泻方面的应用前景第55页
   ·不同免疫原的比较第55-56页
   ·卵黄抗体各种提取方法的优缺点比较第56-57页
   ·高免卵黄液和粗提卵黄抗体比较第57-58页
5 结论第58-59页
致谢第59-60页
参考文献第60-66页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第66页

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