| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-23页 |
| ·发生及危害 | 第12-13页 |
| ·玉米细菌性枯萎病 | 第12页 |
| ·玉米内州萎蔫病 | 第12-13页 |
| ·病原形态及生化性状 | 第13-14页 |
| ·玉米细菌性枯萎病菌 | 第13页 |
| ·玉米内州萎蔫病菌 | 第13-14页 |
| ·主要检测及鉴定方法 | 第14-21页 |
| ·分离培养检测方法 | 第14页 |
| ·免疫学检测方法 | 第14-17页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第17-18页 |
| ·基因芯片技术 | 第18-21页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
| ·建立玉米内州萎蔫病菌的免疫学检测方法 | 第21-22页 |
| ·建立玉米检疫性种传细菌病害及相关病菌基因芯片检测方法 | 第22-23页 |
| 第二章 玉米内州萎蔫病菌DAS-ELISA 检测方法的建立 | 第23-34页 |
| ·实验材料与试剂 | 第23-24页 |
| ·菌株与试剂 | 第23页 |
| ·玉米种子材料 | 第23-24页 |
| ·仪器与设备 | 第24页 |
| ·主要溶液 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-27页 |
| ·细菌悬浮液的制备 | 第24页 |
| ·抗体纯化及亚类鉴定 | 第24-25页 |
| ·抗体碱性磷酸酶(Ap)标记 | 第25-26页 |
| ·ELISA 条件优化及检测方法的建立 | 第26页 |
| ·抗体效价的测定 | 第26-27页 |
| ·抗体特异性及检测灵敏度的测定 | 第27页 |
| ·样品测试 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-31页 |
| ·单克隆抗体蛋白浓度测定 | 第27-28页 |
| ·单克隆抗体亚类鉴定及效价的测定 | 第28-29页 |
| ·抗体的特异性及灵敏度测定 | 第29-30页 |
| ·样品测定 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·间接ELISA 检测方法中包被条件的探讨 | 第31页 |
| ·影响抗原抗体反应的因素 | 第31-32页 |
| ·两种检测方法灵敏度对比 | 第32页 |
| ·DSA-ELISA 检测方法中样品添加方法的探讨 | 第32页 |
| ·本章小结 | 第32-34页 |
| ·两株单克隆抗体亚类、效价等指标的测定 | 第32-33页 |
| ·两种ELISA 检测方法的建立 | 第33页 |
| ·DAS-ELISA 检测方法的特异性 | 第33页 |
| ·两种ELISA 检测方法的灵敏度 | 第33页 |
| ·两种检测方法的样品添加检测 | 第33-34页 |
| 第三章 玉米检疫性种传细菌及相关病菌基因芯片检测方法的建立 | 第34-53页 |
| ·材料与试剂 | 第34-37页 |
| ·供试菌株 | 第34页 |
| ·仪器与设备 | 第34页 |
| ·试剂 | 第34-36页 |
| ·主要溶液 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-42页 |
| ·菌株增菌培养及计数 | 第37页 |
| ·细菌基因组DNA 的提取 | 第37页 |
| ·引物及探针的设计 | 第37-38页 |
| ·PCR 扩增及条件优化 | 第38-39页 |
| ·PCR 检测特异性及灵敏度实验 | 第39-40页 |
| ·基因芯片上反应位点的设计 | 第40-41页 |
| ·基因芯片上的杂交反应 | 第41页 |
| ·杂交反应条件的优化 | 第41页 |
| ·基因芯片检测特异性及灵敏度测试 | 第41页 |
| ·两种及两种以上细菌在芯片上的同时检测 | 第41-42页 |
| ·带菌玉米种子悬浮液的基因芯片的检测 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-50页 |
| ·细菌计数及DNA 浓度测试 | 第42-43页 |
| ·PCR 反应中退火温度测定 | 第43页 |
| ·PCR 检测的特异性测试 | 第43-44页 |
| ·PCR 检测灵敏度测试 | 第44-46页 |
| ·芯片中杂交条件优化结果 | 第46页 |
| ·基因芯片杂交特异性测试结果 | 第46-48页 |
| ·基因芯片检测灵敏度测试结果 | 第48页 |
| ·两种或多种细菌同时检测结果 | 第48-49页 |
| ·玉米种子样品中四种目标菌的基因芯片检测 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·影响基因芯片检测结果的因素 | 第50页 |
| ·影响多重 PCR 检测结果的因素 | 第50页 |
| ·基因芯片检测中引物与探针的设计 | 第50-51页 |
| ·基因芯片杂交反应结果分析 | 第51页 |
| ·本章小结 | 第51-53页 |
| ·玉米检疫性种传细菌多重 PCR 检测方法的建立 | 第51页 |
| ·基因芯片检测方法的建立 | 第51页 |
| ·基因芯片检测方法特异性测定 | 第51-52页 |
| ·基因芯片检测方法灵敏度测试 | 第52页 |
| ·基因芯片在玉米种子样品检测中的应用 | 第52页 |
| ·多种病原菌的同时检测 | 第52-53页 |
| 第四章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第59-60页 |
| 作者简历 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
