摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
绪论 | 第10-17页 |
参考文献 | 第14-17页 |
第一章 含LR基因质粒的构建及细菌体内功能效率的分析 | 第17-36页 |
1.1 实验材料 | 第17-20页 |
1.1.1 主要仪器 | 第17-18页 |
1.1.2 主要试剂 | 第18页 |
1.1.3 细胞与质粒 | 第18页 |
1.1.4 主要试剂配制 | 第18-20页 |
1.2 实验方法 | 第20-31页 |
1.2.1 验证质粒pBCLR的构建 | 第20-27页 |
1.2.2 含LR基因质粒pXis的构建 | 第27-29页 |
1.2.3 LR基因功能验证 | 第29-31页 |
1.3 实验结果 | 第31-34页 |
1.3.1 验证质粒pBCLR的构建结果 | 第31-32页 |
1.3.2 含LR基因质粒pXis的构建结果 | 第32-33页 |
1.3.3 LR基因功能验证结果 | 第33-34页 |
1.4 讨论 | 第34-36页 |
第二章 位点特异整合微环DNA的制备 | 第36-52页 |
2.1 实验材料 | 第36-38页 |
2.1.1 主要仪器 | 第36页 |
2.1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
2.1.3 细胞与质粒 | 第37页 |
2.1.4 主要试剂配制 | 第37-38页 |
2.2 实验方法 | 第38-48页 |
2.2.1 亲本质粒pMF.LA的构建 | 第38-48页 |
2.2.2 微环DNA的制备 | 第48页 |
2.3 实验结果 | 第48-50页 |
2.3.1 载体构建PCR、酶切验证结果 | 第48页 |
2.3.2 点突变测序结果 | 第48-50页 |
2.3.3 微环DNA的制备结果 | 第50页 |
2.4 讨论 | 第50-52页 |
第三章 位点特异整合微环DNA制备的优化 | 第52-66页 |
3.1 实验材料 | 第52-53页 |
3.1.1 主要仪器 | 第52页 |
3.1.2 主要试剂 | 第52-53页 |
3.1.3 主要试剂配制 | 第53页 |
3.2 实验方法 | 第53-59页 |
3.2.1 L-阿拉伯糖最佳诱导浓度的确定 | 第53-54页 |
3.2.2 培养基的确定 | 第54页 |
3.2.3 菌液接种浓度的确定 | 第54页 |
3.2.4 LR重组效率与时间的关系 | 第54-55页 |
3.2.5 体外LR重组反应 | 第55页 |
3.2.6 PCR检测重组反应的发生 | 第55-56页 |
3.2.7 定量PCR分析重组效率 | 第56-58页 |
3.2.8 通过降低诱导物诱导时的培养温度优化重组效率。 | 第58页 |
3.2.9 通过增大诱导物诱导时的培养体系优化重组效率。 | 第58-59页 |
3.2.10 体外LR重组反应重组率检测 | 第59页 |
3.3 实验结果 | 第59-64页 |
3.3.1 酶切鉴定重组效率结果 | 第59页 |
3.3.2 PCR检测重组反应的发生 | 第59-60页 |
3.3.3 定量PCR结果及其重组率 | 第60-64页 |
3.4 讨论 | 第64-66页 |
结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-68页 |
附录1 综述:哺乳动物可变启动子的功能及其与疾病的关系 | 第68-79页 |
参考文献 | 第75-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第80-82页 |