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位点特异整合微环DNA的体内制备及优化

摘要第3-4页
abstract第4-5页
绪论第10-17页
    参考文献第14-17页
第一章 含LR基因质粒的构建及细菌体内功能效率的分析第17-36页
    1.1 实验材料第17-20页
        1.1.1 主要仪器第17-18页
        1.1.2 主要试剂第18页
        1.1.3 细胞与质粒第18页
        1.1.4 主要试剂配制第18-20页
    1.2 实验方法第20-31页
        1.2.1 验证质粒pBCLR的构建第20-27页
        1.2.2 含LR基因质粒pXis的构建第27-29页
        1.2.3 LR基因功能验证第29-31页
    1.3 实验结果第31-34页
        1.3.1 验证质粒pBCLR的构建结果第31-32页
        1.3.2 含LR基因质粒pXis的构建结果第32-33页
        1.3.3 LR基因功能验证结果第33-34页
    1.4 讨论第34-36页
第二章 位点特异整合微环DNA的制备第36-52页
    2.1 实验材料第36-38页
        2.1.1 主要仪器第36页
        2.1.2 主要试剂第36-37页
        2.1.3 细胞与质粒第37页
        2.1.4 主要试剂配制第37-38页
    2.2 实验方法第38-48页
        2.2.1 亲本质粒pMF.LA的构建第38-48页
        2.2.2 微环DNA的制备第48页
    2.3 实验结果第48-50页
        2.3.1 载体构建PCR、酶切验证结果第48页
        2.3.2 点突变测序结果第48-50页
        2.3.3 微环DNA的制备结果第50页
    2.4 讨论第50-52页
第三章 位点特异整合微环DNA制备的优化第52-66页
    3.1 实验材料第52-53页
        3.1.1 主要仪器第52页
        3.1.2 主要试剂第52-53页
        3.1.3 主要试剂配制第53页
    3.2 实验方法第53-59页
        3.2.1 L-阿拉伯糖最佳诱导浓度的确定第53-54页
        3.2.2 培养基的确定第54页
        3.2.3 菌液接种浓度的确定第54页
        3.2.4 LR重组效率与时间的关系第54-55页
        3.2.5 体外LR重组反应第55页
        3.2.6 PCR检测重组反应的发生第55-56页
        3.2.7 定量PCR分析重组效率第56-58页
        3.2.8 通过降低诱导物诱导时的培养温度优化重组效率。第58页
        3.2.9 通过增大诱导物诱导时的培养体系优化重组效率。第58-59页
        3.2.10 体外LR重组反应重组率检测第59页
    3.3 实验结果第59-64页
        3.3.1 酶切鉴定重组效率结果第59页
        3.3.2 PCR检测重组反应的发生第59-60页
        3.3.3 定量PCR结果及其重组率第60-64页
    3.4 讨论第64-66页
结论第66-67页
参考文献第67-68页
附录1 综述:哺乳动物可变启动子的功能及其与疾病的关系第68-79页
    参考文献第75-79页
致谢第79-80页
攻读学位期间发表的学术论文目录第80-82页

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