| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 主要符号对照表 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-30页 |
| 1.1 骨骼肌的发育与再生 | 第15-20页 |
| 1.1.1 胚胎骨骼肌的起源与发育 | 第15-16页 |
| 1.1.2 出生后骨骼肌的生长发育 | 第16-18页 |
| 1.1.3 骨骼肌的再生修复 | 第18-20页 |
| 1.2 骨骼肌生成的调控机制 | 第20-24页 |
| 1.2.1 骨骼肌生成的转录调控 | 第20-23页 |
| 1.2.2 MicroRNAs对骨骼肌生成的调控作用 | 第23-24页 |
| 1.3 MEF2A的研究进展 | 第24-28页 |
| 1.3.1 MEF2 蛋白的基本结构 | 第24页 |
| 1.3.2 MEF2 转录因子参与的重要信号通路 | 第24-27页 |
| 1.3.3 MEF2A对肌生成的调控作用 | 第27-28页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第28页 |
| 1.5 研究内容与技术路线图 | 第28-30页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第28-29页 |
| 1.5.2 研究技术路线图 | 第29-30页 |
| 第二章 骨骼肌成肌细胞分离、体外培养及MEF2 基因表达 | 第30-38页 |
| 2.1 材料与方法 | 第30-32页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第30页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第30-32页 |
| 2.2 结果与分析 | 第32-35页 |
| 2.2.1 秦川牛原代骨骼肌成肌细胞的分离、培养及诱导分化 | 第32-33页 |
| 2.2.2 MYOD1、MYF6、MYOG和 MYH1 随成肌细胞分化的表达谱分析 | 第33页 |
| 2.2.3 MEF2A的表达随秦川牛骨骼肌的发生和成肌细胞的分化逐渐上调 | 第33-34页 |
| 2.2.4 MEF2A与 MEF2B、MEF2C、MEF2D随成肌细胞分化的表达谱相异 | 第34-35页 |
| 2.3 讨论 | 第35-37页 |
| 2.3.1 原代骨骼肌成肌细胞的分离方法 | 第35页 |
| 2.3.2 原代骨骼肌成肌细胞的鉴定 | 第35-36页 |
| 2.3.3 MEF2A表达分析 | 第36-37页 |
| 2.4 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 MEF2A对秦川牛骨骼肌成肌细胞增殖的作用机理研究 | 第38-49页 |
| 3.1 材料与方法 | 第38-39页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第38页 |
| 3.1.2 试验方法 | 第38-39页 |
| 3.2 结果与分析 | 第39-46页 |
| 3.2.1 腺病毒介导的MEF2A过表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 3.2.2 腺病毒介导的RNA干扰载体的构建 | 第40-42页 |
| 3.2.3 MEF2A缩短成肌细胞增殖周期 | 第42-43页 |
| 3.2.4 MEF2A促进成肌细胞DNA的复制 | 第43-44页 |
| 3.2.5 MEF2A促进成肌细胞增殖相关基因和蛋白的表达 | 第44-45页 |
| 3.2.6 MEF2A过表达未引起成肌细胞凋亡 | 第45-46页 |
| 3.3 讨论 | 第46-48页 |
| 3.3.1 应用腺病毒载体系统介导MEF2A的过表达与沉默 | 第46页 |
| 3.3.2 MEF2A过表达促进成肌细胞增殖 | 第46-48页 |
| 3.4 小结 | 第48-49页 |
| 第四章 MEF2A对秦川牛骨骼肌成肌细胞分化的作用机理研究 | 第49-65页 |
| 4.1 材料与方法 | 第49-51页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第49页 |
| 4.1.2 试验方法 | 第49-51页 |
| 4.2 结果与分析 | 第51-61页 |
| 4.2.1 MEF2A干扰抑制秦川牛骨骼肌成肌细胞的分化 | 第51-53页 |
| 4.2.2 MEF2A直接靶向促进MYOZ2 基因的转录 | 第53-55页 |
| 4.2.3 MYOZ2 沉默抑制秦川牛骨骼肌成肌细胞分化 | 第55-57页 |
| 4.2.4 MEF2A过表达抑制秦川牛骨骼肌成肌细胞分化 | 第57-59页 |
| 4.2.5 成肌细胞分化过程中MEF2A过量表达诱发细胞凋亡 | 第59-61页 |
| 4.3 讨论 | 第61-64页 |
| 4.3.1 MEF2A沉默抑制秦川牛骨骼肌成肌细胞分化 | 第61-62页 |
| 4.3.2 MEF2A调控MYOZ2 的表达 | 第62-63页 |
| 4.3.3 MYOZ2 参与调控骨骼肌成肌细胞分化 | 第63页 |
| 4.3.4 MEF2A过表达抑制原代成肌细胞分化并诱发细胞凋亡 | 第63-64页 |
| 4.4 小结 | 第64-65页 |
| 第五章 MEF2A-MEG3/DIO3-PP2A调控网络对秦川牛骨骼肌成肌细胞分化的作用机理研究 | 第65-80页 |
| 5.1 材料与方法 | 第65-66页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第65页 |
| 5.1.2 试验方法 | 第65-66页 |
| 5.2 结果与分析 | 第66-76页 |
| 5.2.1 MEF2A促进MEG3 表达 | 第66-67页 |
| 5.2.2 MEG3/DIO3 位点miRNA簇预测靶向结合PP2A亚基基因 | 第67-69页 |
| 5.2.3 MEF2A干扰后通过激活PP2A信号通路抑制成肌细胞分化 | 第69-71页 |
| 5.2.4 MEG3/DIO3 位点miR-758和miR-543 促进成肌细胞分化 | 第71-73页 |
| 5.2.5 miR-758和miR-543 靶向抑制PPP2R2C的表达 | 第73-76页 |
| 5.3 讨论 | 第76-79页 |
| 5.3.1 MEF2A对 MEG3/DIO3 位点的调控作用 | 第76-77页 |
| 5.3.2 MEG3/DIO3 位点miRNA-mRNA靶向预测分析 | 第77-78页 |
| 5.3.3 MEF2A对 PP2A信号通路的调控作用 | 第78-79页 |
| 5.3.4 MEG3/DIO3 位点miRNAs对 PP2A信号通路的调控作用 | 第79页 |
| 5.4 小结 | 第79-80页 |
| 第六章 结论与创新点 | 第80-81页 |
| 6.1 结论 | 第80页 |
| 6.2 创新点 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-91页 |
| 附录 | 第91-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 个人简历 | 第102-103页 |
