中文摘要 | 第4-6页 |
英文摘要 | 第6-14页 |
第一章 前言 | 第14-29页 |
1.1 circRNA概述 | 第14-22页 |
1.1.1 circRNA特征 | 第14页 |
1.1.2 circRNA的生物合成 | 第14-18页 |
1.1.3 circRNA的功能 | 第18-22页 |
1.1.3.1 circRNA的海绵作用 | 第18-19页 |
1.1.3.2 circRNA转录调控 | 第19-20页 |
1.1.3.3 circRNA编码蛋白 | 第20-22页 |
1.1.4 circRNA在人类癌症中的研究现状 | 第22页 |
1.2 胃癌研究概述 | 第22-26页 |
1.2.1 胃腺癌病理分类 | 第23页 |
1.2.1.1 高分化胃腺癌 | 第23页 |
1.2.1.2 中分化胃腺癌 | 第23页 |
1.2.1.3 低分化胃腺癌 | 第23页 |
1.2.2 胃癌的发病机制 | 第23-25页 |
1.2.3 circRNA在胃癌中的研究现状 | 第25-26页 |
1.3 FNDC3B和IGF2BP3、CD44概述 | 第26-27页 |
1.4 本论文的具体研究工作及其科学意义 | 第27-29页 |
第二章 材料与方法 | 第29-44页 |
2.1 试剂、材料与主要仪器 | 第29-32页 |
2.1.1 试剂和材料 | 第29页 |
2.1.2 生物材料 | 第29-30页 |
2.1.3 常用试剂 | 第30-32页 |
2.1.4 主要仪器 | 第32页 |
2.2 实验方法 | 第32-44页 |
2.2.1 细胞培养 | 第32-33页 |
2.2.2 qRT-PCR | 第33-35页 |
2.2.3 质粒载体的制备 | 第35-37页 |
2.2.4 质粒转化感受态细胞 | 第37页 |
2.2.5 真核细胞转染 | 第37页 |
2.2.6 流式细胞术检测细胞周期 | 第37-38页 |
2.2.7 Western blot分析 | 第38-39页 |
2.2.8 细胞划痕实验 | 第39-40页 |
2.2.9 Transwell实验 | 第40页 |
2.2.10 RIP实验 | 第40-41页 |
2.2.11 RNA pull-down实验 | 第41-43页 |
2.2.12 数据分析 | 第43-44页 |
第三章 实验结果 | 第44-65页 |
3.1 胃癌组织中circFNDC3B表达降低 | 第44-45页 |
3.2 circFNDC3B在胃癌细胞中的表达差异 | 第45-46页 |
3.3 构建circFNDC3B表达载体和设计siRNA实验方法 | 第46-48页 |
3.4 circFNDC3B不影响胃癌细胞的细胞周期 | 第48-49页 |
3.5 过表达和沉默circFNDC3B对细胞迁移和细胞侵袭的影响 | 第49-52页 |
3.5.1 过表达circFNDC3B促进胃癌细胞MGC-803细胞迁移和侵袭 | 第49-51页 |
3.5.2 沉默circFNDC3B抑制胃癌细胞BGC-823细胞迁移和侵袭 | 第51-52页 |
3.6 circFNDC3B不影响FNDC3B表达 | 第52-53页 |
3.7 circFNDC3B降低E-cadherin蛋白的表达 | 第53-55页 |
3.8 circFNDC3B、IGF2BP3和CD44 mRNA形成三体复合物 | 第55-59页 |
3.8.1 RIP证明IGF2BP3结合circFNDC3B和CD44 mRNA | 第56-57页 |
3.8.2 RNA pull-down证明circFNDC3B结合IGF2BP3和CD44 mRNA | 第57-59页 |
3.9 circFNDC3B促进CD44表达 | 第59-60页 |
3.10 circFNDC3B结合IGF2BP3调控CD44表达 | 第60-62页 |
3.11 circFNDC3B翻译蛋白活性 | 第62-65页 |
第四章 讨论 | 第65-72页 |
4.1 circFNDC3B在胃癌中的功能作用 | 第65-66页 |
4.2 胃癌组织与胃癌细胞系circFNDC3B表达水平差异 | 第66-67页 |
4.3 circFNDC3B与FNDC3B mRNA潜在联系 | 第67页 |
4.4 circFNDC3B与EMT转化的关系 | 第67-68页 |
4.5 circFNDC3B与CD44的联系 | 第68-70页 |
4.6 该课题研究的局限性和展望 | 第70-72页 |
第五章 结论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-84页 |
致谢 | 第84页 |