| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11页 |
| 第一章 前言 | 第12-37页 |
| 1.1 RNA聚合酶Ⅱ在启动子附近的暂停与释放 | 第12-19页 |
| 1.1.1 RNA聚合酶Ⅱ调控的基因转录 | 第12-14页 |
| 1.1.2 RNA聚合酶Ⅱ在启动子附近暂停的现象 | 第14-15页 |
| 1.1.3 RNA聚合酶Ⅱ在启动子附近暂停与释放的机制 | 第15-19页 |
| 1.2 BRD4及其小分子抑制剂JQ1 | 第19-28页 |
| 1.2.1 BET家族蛋白 | 第19-21页 |
| 1.2.2 BRD4的结构 | 第21-22页 |
| 1.2.3 BRD4的功能 | 第22-23页 |
| 1.2.4 BRD4——新的癌症治疗靶标 | 第23-24页 |
| 1.2.5 BRD4的小分子抑制剂JQ1 | 第24-28页 |
| 1.3 化疗药物阿霉素 | 第28-30页 |
| 1.3.1 阿霉素的结构与作用机理 | 第28-29页 |
| 1.3.2 阿霉素的心肌毒性 | 第29-30页 |
| 1.4 细胞凋亡与P53 | 第30-35页 |
| 1.4.1 细胞凋亡 | 第30-33页 |
| 1.4.2 肿瘤抑制因子P53 | 第33-34页 |
| 1.4.3 P53参与的细胞凋亡 | 第34-35页 |
| 1.5 本课题研究的内容和意义 | 第35-37页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第35-36页 |
| 1.5.2 研究意义 | 第36-37页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第37-61页 |
| 2.1 实验材料 | 第37-40页 |
| 2.1.1 细胞株、菌株和质粒 | 第37页 |
| 2.1.2 实验试剂和材料 | 第37-39页 |
| 2.1.3 实验仪器和耗材 | 第39-40页 |
| 2.2 常用试剂配方 | 第40-47页 |
| 2.2.1 基因克隆相关试剂 | 第40-43页 |
| 2.2.2 细胞实验相关试剂 | 第43-44页 |
| 2.2.3 蛋白免疫印迹试验相关试剂 | 第44-45页 |
| 2.2.4 染色质免疫共沉淀相关试剂 | 第45-47页 |
| 2.3 实验方法 | 第47-61页 |
| 2.3.1 DH5α和Turbo感受态细胞的制备 | 第47页 |
| 2.3.2 质粒转化 | 第47-48页 |
| 2.3.3 质粒小量提取 | 第48页 |
| 2.3.4 质粒中量提取 | 第48-49页 |
| 2.3.5 DNA酶切 | 第49页 |
| 2.3.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第49页 |
| 2.3.7 玻璃奶法胶回收DNA片段 | 第49-50页 |
| 2.3.8 酚氯仿法提取DNA | 第50页 |
| 2.3.9 DNA连接 | 第50-51页 |
| 2.3.10 聚合酶链式反应 | 第51页 |
| 2.3.11 特异性pLV-shRNA的构建 | 第51-52页 |
| 2.3.12 细胞培养 | 第52页 |
| 2.3.13 细胞瞬时转染 | 第52-53页 |
| 2.3.14 慢病毒包装感染 | 第53页 |
| 2.3.15 细胞的药物处理 | 第53页 |
| 2.3.16 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第53-54页 |
| 2.3.17 蛋白免疫印迹试验 | 第54-55页 |
| 2.3.18 RNA提取 | 第55页 |
| 2.3.19 逆转录PCR | 第55-57页 |
| 2.3.20 即时定量PCR | 第57-58页 |
| 2.3.21 Annexin V法检测细胞凋亡 | 第58页 |
| 2.3.22 染色质免疫共沉淀 | 第58-61页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第61-71页 |
| 3.1 敲低BRD4会增强DOX诱导的细胞凋亡 | 第61-63页 |
| 3.2 JQ1可以增敏DOX诱导细胞凋亡 | 第63-64页 |
| 3.3 JQ1增敏DOX诱导细胞凋亡依赖于P53 | 第64-66页 |
| 3.4 JQ1抑制BCL2/-XL表达&DOX促进PUMA表达 | 第66-67页 |
| 3.5 JQ1抑制BRD4和P-TEFb在BCL-XL启动子区的募集 | 第67-68页 |
| 3.6 讨论与展望 | 第68-71页 |
| 参考文献 | 第71-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
