| 摘要 | 第10-11页 |
| ABSTRACT | 第11页 |
| 第一章 前言 | 第12-30页 |
| 1.1 TIP60相关研究进展 | 第12-23页 |
| 1.1.1 TIP60乙酰转移酶简介 | 第12-14页 |
| 1.1.2 TIP60和转录调控 | 第14-16页 |
| 1.1.3 IP60参与DNA损伤应答和修复 | 第16-19页 |
| 1.1.4 IP60和疾病 | 第19-20页 |
| 1.1.5 TIP60的其他功能 | 第20-22页 |
| 1.1.6 TIP60的调控 | 第22-23页 |
| 1.2 脂肪分解 | 第23-26页 |
| 1.2.1 脂肪分解概述 | 第23-24页 |
| 1.2.2 甘油三酯水解酶 | 第24-25页 |
| 1.2.3 脂肪分解的调控 | 第25-26页 |
| 1.3 HSL(Hormone Sensitive Lipase) | 第26-30页 |
| 1.3.1 HSL的分子及蛋白结构 | 第26-27页 |
| 1.3.2 HSL酶活性的调节 | 第27-29页 |
| 1.3.3 HSL在脂代谢中的作用 | 第29-30页 |
| 第二章 材料和方法 | 第30-54页 |
| 2.1 常用试剂与耗材 | 第30-31页 |
| 2.2 实验仪器 | 第31-32页 |
| 2.3 DNA相关实验方法 | 第32-42页 |
| 2.3.1 质粒载体 | 第32-35页 |
| 2.3.2 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| 2.3.3 DNA转化 | 第36页 |
| 2.3.4 质粒DNA的提取 | 第36-39页 |
| 2.3.5 克隆方法及策略 | 第39-42页 |
| 2.4 Tip60~(S86A/S86A)小鼠模型构建和基因型鉴定 | 第42-43页 |
| 2.5 细胞相关实验方法 | 第43-47页 |
| 2.5.1 细胞培养 | 第43-44页 |
| 2.5.2 小鼠胚胎成纤维细胞的分离和培养 | 第44页 |
| 2.5.3 瞬时转染 | 第44-45页 |
| 2.5.4 慢病毒感染 | 第45页 |
| 2.5.5 细胞免疫荧光实验 | 第45-46页 |
| 2.5.6 脂肪细胞的诱导分化 | 第46页 |
| 2.5.7 脂滴分离实验 | 第46-47页 |
| 2.6 蛋白质相关实验方法 | 第47-50页 |
| 2.6.1 原核表达蛋白 | 第47页 |
| 2.6.2 免疫共沉淀 | 第47-48页 |
| 2.6.3 体外乙酰化反应 | 第48-49页 |
| 2.6.4 蛋白质的浓度的测定 | 第49页 |
| 2.6.5 蛋白质的SDS-PAGE电泳与Western blotting分析 | 第49-50页 |
| 2.7 动物相关实验 | 第50-53页 |
| 2.7.1 甘油三酯含量的测定 | 第50-51页 |
| 2.7.2 游离脂肪酸含量的测定 | 第51-52页 |
| 2.7.3 甘油含量的测定 | 第52页 |
| 2.7.4 葡萄糖含量的测定 | 第52-53页 |
| 2.7.5 组织样品蛋白总裂解液的提取 | 第53页 |
| 2.8 统计分析 | 第53-54页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第54-75页 |
| 3.1 结果 | 第54-73页 |
| 3.1.1 Tip60~(S86A/S86A)小鼠饥饿处理后脂解水平下降 | 第54-59页 |
| 3.1.2 TIP60能和HSL发生相互作用 | 第59-60页 |
| 3.1.3 TIP60能直接乙酰化HSL | 第60-62页 |
| 3.1.4 HSL的乙酰化是依赖TIP60的 | 第62-63页 |
| 3.1.5 TIP60-S86A对HSL的乙酰化明显减弱 | 第63-64页 |
| 3.1.6 脂解条件下TIP60能增强对HSL的乙酰化 | 第64-65页 |
| 3.1.7 TIP60活性受到抑制的3T3-L1脂肪细胞饥饿处理后脂解水平也下降 | 第65-67页 |
| 3.1.8 TIP60可以影响HSL磷酸化水平 | 第67-69页 |
| 3.1.9 TIP60会影响HSL从胞质向脂滴的转运过程 | 第69-73页 |
| 3.2 讨论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 图表索引 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 在学期间发表论文 | 第87页 |
