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应用重组表达的SELENOF和基因敲除鼠研究SELENOF的生物学功能

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第1章 文献综述第11-18页
    1.1 硒与硒蛋白第11-12页
        1.1.1 硒第11页
        1.1.2 硒蛋白第11-12页
    1.2 硒蛋白F(SELENOF)第12-14页
        1.2.1 SELENOF的结构第12-13页
        1.2.2 SELENOF可能的生物学功能第13-14页
        1.2.3 SELENOF与疾病的关系第14页
    1.3 硫氧还蛋白相关活性第14页
    1.4 硒蛋白与糖脂代谢第14-16页
        1.4.1 糖代谢第14-15页
        1.4.2 硒蛋白与糖代谢第15页
        1.4.3 脂代谢第15页
        1.4.4 硒蛋白与脂代谢第15-16页
    1.5 前沿技术第16-18页
        1.5.1 CRISPR-Cas9基因编辑技术第16页
        1.5.2 iTRAQ技术第16-17页
        1.5.3 PET/CT技术研究葡萄糖摄取情况第17-18页
第2章 材料与方法第18-41页
    2.1 .实验材料第18-25页
        2.1.1 菌株第18页
        2.1.2 载体,质粒第18-19页
        2.1.3 细胞株第19页
        2.1.4 小鼠模型第19页
        2.1.5 引物第19-20页
        2.1.6 实验主要试剂及溶液配方第20-23页
        2.1.7 实验所用主要仪器和设备第23-24页
        2.1.8 结果统计分析软件及网址第24-25页
    2.2 实验方法第25-41页
        2.2.1 SELENOF表达质粒构建第25-26页
        2.2.2 纯化第26-30页
        2.2.3 硫氧还蛋白相关活性检测第30页
        2.2.4 Pull-down实验第30-33页
        2.2.5 基因敲除鼠的鉴定第33-35页
        2.2.6 血糖耐受性实验第35页
        2.2.7 PET/CT技术第35-36页
        2.2.8 小鼠解剖第36页
        2.2.9 海马及肝脏iTRAQ第36-38页
        2.2.10 组学结果WB验证第38页
        2.2.11 肝脏组织,脂肪染色(油红O,HE)第38-39页
        2.2.12 肝脏NADPH/NADP活性检测第39-40页
        2.2.13 肝脏ATP活性检测第40-41页
第3章 结果与分析第41-76页
    3.1 体外实验第41-51页
        3.1.1 蛋白纯化第41-42页
        3.1.2 质谱鉴定第42页
        3.1.3 SELENOF蛋白活性检测第42-44页
        3.1.4 Pull-down实验及质谱结果分析第44-51页
    3.2 体内实验第51-76页
        3.2.1 敲除模型小鼠鉴定第51-53页
        3.2.2 糖耐实验第53页
        3.2.3 海马,肝脏iTRAQ实验第53-56页
        3.2.4 海马iTRAQ组学分析第56-61页
        3.2.5 肝脏iTRAQ组学分析第61-67页
        3.2.6 SELENOF敲除鼠大脑及全身PET/CT成像及分析第67-70页
        3.2.7 WB检测第70-72页
        3.2.8 肝脏染色第72-74页
        3.2.9 肝脏NADPH活性检测第74-75页
        3.2.10 肝脏ATP活性检测第75-76页
第4章 讨论第76-78页
第5章 结论第78-79页
参考文献第79-84页
附录第84-91页
致谢第91-92页
攻读硕士学位期间的研究成果第92页

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