| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 技术路线 | 第14-15页 |
| 第一部分 产铁载体菌株的筛选及相关菌株次生代谢产物初步研究 | 第15-51页 |
| 第一章 活性菌株的筛选 | 第15-27页 |
| 第一节 高PH培养与CAS法结合的菌株筛选 | 第15-23页 |
| 1 实验材料 | 第15-16页 |
| 1.1 菌株来源 | 第15页 |
| 1.2 培养基 | 第15页 |
| 1.3 实验仪器 | 第15-16页 |
| 2 实验方法 | 第16-18页 |
| 2.1 菌株活化 | 第16页 |
| 2.2 菌株筛选方法 | 第16-17页 |
| 2.3 高pH液体培养基配制 | 第17页 |
| 2.4 CAS显色液的配制 | 第17-18页 |
| 2.5 复筛菌株铁载体初步定量测定 | 第18页 |
| 2.6 复筛菌株铁载体化学结构初步检测 | 第18页 |
| 3 实验结果 | 第18-22页 |
| 3.1 菌株初筛结果 | 第18-20页 |
| 3.2 菌株复筛结果 | 第20-21页 |
| 3.3 复筛菌株铁载体初步定量测定 | 第21-22页 |
| 3.4 复筛菌株铁载体类型初步判断 | 第22页 |
| 4 讨论 | 第22-23页 |
| 第二节 复筛菌株小样固体发酵预实验 | 第23-27页 |
| 1 实验材料 | 第23页 |
| 1.1 使用菌株 | 第23页 |
| 1.2 培养基及试剂 | 第23页 |
| 1.3 试剂 | 第23页 |
| 1.4 实验仪器 | 第23页 |
| 2. 实验方法 | 第23-25页 |
| 2.1 菌株活化 | 第23-24页 |
| 2.2 培养基配制及优化 | 第24-25页 |
| 3 实验结果 | 第25-26页 |
| 3.1 培养基优化结果 | 第25页 |
| 3.2 6株真菌发酵粗提物CAS活性检测结果 | 第25-26页 |
| 4 讨论 | 第26-27页 |
| 第二章 产铁载体真菌的初步鉴定 | 第27-33页 |
| 1 实验材料 | 第27页 |
| 1.1 实验菌株 | 第27页 |
| 1.2 培养基 | 第27页 |
| 1.3 仪器及试剂 | 第27页 |
| 2 实验方法 | 第27-28页 |
| 2.1 菌株显微结构观察 | 第27-28页 |
| 2.2 菌株ITS序列的系统发育分析 | 第28页 |
| 3 基于菌株的ITS基因序列的构建的系统发育树分析结果 | 第28-32页 |
| 3.1 复筛菌株的排重 | 第28页 |
| 3.2 FECH-050鉴定结果 | 第28-29页 |
| 3.3 FEDT-092鉴定结果 | 第29-30页 |
| 3.4 FECH-031鉴定结果 | 第30-31页 |
| 3.5 FECH-074鉴定结果 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 相关真菌的次级代谢产物初步研究 | 第33-51页 |
| 第一节 FECH-031真菌的次级代谢产物分离及结构预判 | 第33-44页 |
| 1 实验材料 | 第33-34页 |
| 1.1 菌株来源 | 第33页 |
| 1.2 培养基 | 第33页 |
| 1.3 主要的仪器及试剂 | 第33-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-37页 |
| 2.1 菌株扩大发酵 | 第34-35页 |
| 2.2 发酵物提取分离 | 第35-37页 |
| 2.3 化合物结构预判 | 第37页 |
| 3 结果与讨论 | 第37-44页 |
| 3.1 化合物的获得 | 第37-38页 |
| 3.2 化合物结构数据库检索预判 | 第38-43页 |
| 3.3 讨论 | 第43-44页 |
| 第二节 FECH-050真菌的次级代谢产物的分离分离及结构预判 | 第44-51页 |
| 1 实验材料 | 第44页 |
| 1.1 实验菌株 | 第44页 |
| 1.2 培养基 | 第44页 |
| 1.3 仪器及试剂 | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-46页 |
| 2.1 发酵物提取分离 | 第44-45页 |
| 2.2 粗提物分离 | 第45-46页 |
| 3 结果与讨论 | 第46-51页 |
| 3.1 化合物的获得 | 第46-47页 |
| 3.2 化合物结构数据库检索预判 | 第47-50页 |
| 3.3 讨论 | 第50-51页 |
| 第二部分 铁载体活性化合物对微生物群落结构影响初步研究 | 第51-109页 |
| 1 背景简介 | 第51页 |
| 2 微生物群落研究的重要性 | 第51页 |
| 3 铁载体对微生物群落构成影响分析 | 第51-53页 |
| 第四章 纯培养模型下铁载体活性化合物对微生物群落结构影响分析 | 第53-67页 |
| 第一节 纯培养预备实验1-培养基和土样稀释条件筛选 | 第53-55页 |
| 1 土样来源 | 第53页 |
| 2 材料和方法 | 第53-54页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第53页 |
| 2.2 培养基组成 | 第53页 |
| 2.3 各培养基上菌落生长情况初步考察 | 第53-54页 |
| 3 实验结果 | 第54-55页 |
| 第二节 纯培养预备实验2-CAS双层平板法 | 第55-56页 |
| 1 土样来源 | 第55页 |
| 2 材料和方法 | 第55页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第55页 |
| 2.2 CAS双层平板培养基及其配制方法 | 第55页 |
| 2.3 实验方法 | 第55页 |
| 3 结果与讨论 | 第55-56页 |
| 第三节 纯培养预备实验3-单层平板法 | 第56-59页 |
| 1 土样来源 | 第56页 |
| 2 材料和方法 | 第56页 |
| 3 试剂与仪器 | 第56页 |
| 4 单层平板实验方法 | 第56-59页 |
| 第四节 纯培养模型下铁载体化合物对程海土样中微生物群落结构影响分析 | 第59-67页 |
| 1 样品来源 | 第59页 |
| 2 试剂与仪器 | 第59页 |
| 3 实验方法 | 第59-61页 |
| 3.1 纯培养样的获取 | 第59页 |
| 3.2 基因组DNA提取 | 第59-60页 |
| 3.3 PCR扩增体系组成 | 第60页 |
| 3.4 PCR反应条件 | 第60页 |
| 3.5 生物信息分析流程 | 第60-61页 |
| 4 结果分析 | 第61-67页 |
| 4.1 样本序列质量分析 | 第61页 |
| 4.2 Alpha多样性分析结果 | 第61-62页 |
| 4.3 所有读取OTU大概归类分析 | 第62-66页 |
| 4.4 纯培养模型结果总结 | 第66-67页 |
| 第五章 免培模型下铁载体活性化合物对微生物群落结构的影响分析 | 第67-109页 |
| 第一节 免培养模型下铁载体活性化合物对两种土样中微生物群落的影响 | 第67-105页 |
| 1 各模型组铁载体活性化合物浓度的选择 | 第67-70页 |
| 1.1 浓度实验设计 | 第67-68页 |
| 1.2 浓度实验结果 | 第68-70页 |
| 2 免培养实验设计 | 第70-72页 |
| 3 程海土样免培养模型组分析结果(原核微生物类群) | 第72-88页 |
| 3.1 样本序列质量分析 | 第72-74页 |
| 3.2 各样本间差异性初步判断 | 第74-88页 |
| 4 锡尾矿土样免培养模型组分析结果(原核微生物类群) | 第88-102页 |
| 4.1 样本序列质量分析 | 第88-89页 |
| 4.2 各样本间差异性初步判断 | 第89-102页 |
| 5 分泌性铁载体对两种不同来源土样原核微生物群落的影响比较分析 | 第102-105页 |
| 第二节 基于分泌型铁载体对微生物群落结构影响结果进行选择性抑菌活性考察 | 第105-109页 |
| 1 材料和方法 | 第105-107页 |
| 1.1 测试病原菌来源 | 第105页 |
| 1.2 培养基 | 第105页 |
| 1.3 分泌型铁载体实验模型设计 | 第105-107页 |
| 2 实验方法 | 第107页 |
| 3 结果和讨论 | 第107-109页 |
| 第三部分 文献综述 | 第109-126页 |
| 1 研究背景 | 第109-126页 |
| 1.1 铁的化学特性和生物学功能 | 第109页 |
| 1.2 铁载体的概念 | 第109-110页 |
| 1.3 铁载体的发现和研究现状 | 第110-113页 |
| 1.4 铁载体的分类和检测方法 | 第113-115页 |
| 1.5 铁载体介导的铁离子吸收 | 第115-118页 |
| 1.6 几种真菌中的铁载体 | 第118-119页 |
| 1.7 铁载体的应用 | 第119-126页 |
| 全文总结 | 第126-128页 |
| 1 产铁载体活性真菌筛选 | 第126-127页 |
| 2 铁载体化合物对微生物群落的影响 | 第127-128页 |
| 参考文献 | 第128-136页 |
| 附录 | 第136-152页 |
| 1 菌株ITS序列测序结果 | 第136-139页 |
| 2 化合物碳谱图 | 第139-151页 |
| 3 培养基配方 | 第151-152页 |
| 致谢 | 第152页 |
