摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 文献综述 | 第9-20页 |
1.1 黄芪简介 | 第9-11页 |
1.1.1 黄芪的植物形态、生长环境 | 第9-10页 |
1.1.2 黄芪的分类 | 第10页 |
1.1.3 黄芪中的化学成分 | 第10-11页 |
1.2 黄芪的药理作用 | 第11-14页 |
1.2.1 增强机体免疫功能 | 第11-12页 |
1.2.2 保肝脏、促进机体代谢 | 第12-14页 |
1.2.3 抑菌及抑制病毒作用 | 第14页 |
1.3 黄芪皂苷的结构特点 | 第14-17页 |
1.4 黄芪皂苷糖苷酶的研究进展 | 第17-18页 |
1.5 本论文的主要研究内容 | 第18-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-33页 |
2.1 实验材料 | 第20页 |
2.1.1 菌种 | 第20页 |
2.1.2 培养基 | 第20页 |
2.1.3 试剂与仪器 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-28页 |
2.2.1 菌种培养 | 第20-21页 |
2.2.2 黄芪皂苷糖苷酶粗酶液的提取 | 第21页 |
2.2.3 粗酶液中黄芪皂苷糖苷酶活力测定 | 第21-22页 |
2.2.4 黄芪皂苷糖苷酶的分离纯化 | 第22-23页 |
2.2.4.1 DEAE-Cellocuse DE52柱的处理与装柱 | 第22-23页 |
2.2.4.2 酶的上柱与分离 | 第23页 |
2.2.5 黄芪皂苷糖苷酶性质研究 | 第23-24页 |
2.2.6 黄芪皂苷酶纯度检测及分子量测定 | 第24-28页 |
2.2.6.1 SDS-聚丙酰胺凝胶电泳的基本原理 | 第24-27页 |
2.2.6.2 SDS-聚丙酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量 | 第27-28页 |
2.2.7 黄芪皂苷含量测定方法 | 第28页 |
2.3 酶反应产物的制备与分离提取 | 第28-33页 |
2.3.1 酶反应产物的制备 | 第28页 |
2.3.2 酶解产物的AB-8大孔吸附树脂的纯化 | 第28-29页 |
2.3.3 酶解产物的D280树脂的处理 | 第29页 |
2.3.4 黄芪皂苷酶解产物纯化分离 | 第29-31页 |
2.3.5 高效液相色谱(HPLC)检测 | 第31-32页 |
2.3.6 酶反应原理初步确定 | 第32-33页 |
第三章 结果与讨论 | 第33-55页 |
3.1 产黄芪皂苷糖苷酶的提取与鉴定 | 第33-39页 |
3.1.1 DEAE-Cellulose DE52柱分离纯化粗酶液 | 第34-37页 |
3.1.1.1 HAc-NaAc缓冲液体系初步分离粗酶液 | 第34-35页 |
3.1.1.2 HAc-NaAc缓冲液体系进一步分离粗酶液 | 第35-37页 |
3.1.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测提纯酶纯度 | 第37页 |
3.1.3 黄芪皂苷糖苷酶的分子量测定 | 第37-39页 |
3.2 酶反应底物制备 | 第39页 |
3.3 黄芪皂苷糖苷酶活力测定 | 第39-40页 |
3.3.1 标准品黄芪甲苷标准曲线绘制 | 第39-40页 |
3.3.2 样品中黄芪甲苷含量测定 | 第40页 |
3.4 黄芪皂苷糖苷酶性质研究 | 第40-45页 |
3.4.1 酶反应的最佳底物浓度 | 第41页 |
3.4.2 酶反应最佳时间 | 第41-42页 |
3.4.3 酶反应的最适pH | 第42-43页 |
3.4.4 酶反应的pH稳定性 | 第43-44页 |
3.4.5 酶反应的最适温度 | 第44页 |
3.4.6 酶反应的温度稳定性 | 第44-45页 |
3.5 酶反应产物的分离纯化 | 第45-52页 |
3.5.1 D280树脂的脱色处理 | 第46页 |
3.5.2 AB-8大孔吸附树脂的脱糖及产物初步分离 | 第46页 |
3.5.3 酶反应产物的硅胶柱法分离提纯 | 第46-51页 |
3.5.4 黄芪皂苷糖苷酶的酶反应原理初步分析 | 第51-52页 |
3.6 HPLC检测 | 第52-55页 |
第四章 结论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
致谢 | 第59页 |