| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 纤维素酶的研究进展 | 第9-13页 |
| 1.1 纤维素酶的作用机理 | 第9-11页 |
| 1.2 纤维素酶基因的克隆与表达 | 第11-13页 |
| 2 枯草芽孢杆菌115突变菌株的构建及纤维素酶的表达 | 第13-39页 |
| 2.1 材料与方法 | 第13-29页 |
| 2.1.1 材料 | 第13-18页 |
| 2.1.1.1 菌株 | 第13页 |
| 2.1.1.2 载体 | 第13页 |
| 2.1.1.3 培养基 | 第13页 |
| 2.1.1.4 试剂 | 第13-14页 |
| 2.1.1.5 引物 | 第14页 |
| 2.1.1.6 常用溶液及配方 | 第14-17页 |
| 2.1.1.7 仪器设备 | 第17-18页 |
| 2.1.2 方法 | 第18-29页 |
| 2.1.2.1 突变菌株质粒的构建 | 第18-24页 |
| 2.1.2.2 本实验所用的分子生物学方法 | 第24-27页 |
| 2.1.2.3 突变纤维素酶DNA序列测定及蛋白空间结构预测 | 第27-28页 |
| 2.1.2.4 6种突变的纤维素酶在大肠杆菌中的诱导表达 | 第28页 |
| 2.1.2.5 突变纤维素酶的纯化及活性检测 | 第28-29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-37页 |
| 2.2.1 PCR扩增获得目的片段 | 第29页 |
| 2.2.2 目的片段的连接 | 第29-30页 |
| 2.2.3 鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.4 测序与蛋白质序列分析 | 第31-35页 |
| 2.2.6 突变纤维素酶的表达及纯化 | 第35-36页 |
| 2.2.7 突变的纤维素酶活性的粗检测 | 第36-37页 |
| 2.3 讨论 | 第37-39页 |
| 3 突变的纤维素酶部分酶学性质的研究 | 第39-56页 |
| 3.1 材料与方法 | 第39-44页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第39-41页 |
| 3.1.1.1 菌株 | 第39页 |
| 3.1.1.2 培养基 | 第39页 |
| 3.1.1.3 主要试剂 | 第39-40页 |
| 3.1.1.4 常用溶液及配制方法 | 第40页 |
| 3.1.1.5 仪器设备 | 第40-41页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第41-44页 |
| 3.1.2.1 突变纤维素酶的米氏常数测定方法 | 第41-42页 |
| 3.1.2.2 突变纤维素酶活性的测定方法 | 第42页 |
| 3.1.2.3 突变纤维素酶的最适温度和热稳定性的测定方法 | 第42-43页 |
| 3.1.2.4 突变纤维素酶最适pH和pH稳定性的测定方法 | 第43页 |
| 3.1.2.5 突变纤维素酶吸附性的测定方法 | 第43页 |
| 3.1.2.6 突变纤维素酶灵活性的测定方法 | 第43-44页 |
| 3.2 结果与分析 | 第44-53页 |
| 3.2.1 突变纤维素酶的动力学特性 | 第44-46页 |
| 3.2.2 六种突变纤维素酶的比活力 | 第46-47页 |
| 3.2.3 突变的纤维素酶的最适温度和热稳定性的比较 | 第47-49页 |
| 3.2.4 突变的纤维素酶的最适pH和pH的稳定性比较 | 第49-51页 |
| 3.2.5 突变纤维素酶的吸附性比较 | 第51-52页 |
| 3.2.6 突变纤维素酶的灵活性(Flexibility)比较 | 第52-53页 |
| 3.3 讨论 | 第53-56页 |
| 3.3.1 纤维素酶连接区域对其催化模块和吸附模块的影响 | 第53-55页 |
| 3.3.2 连接区域(LR)对纤维素酶的影响 | 第55-56页 |
| 4 总结及展望 | 第56-58页 |
| 4.1 总结 | 第56页 |
| 4.2 展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 个人简介 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
