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坛紫菜碳酸酐酶家族基因的克隆及表达分析

摘要第4-5页
abstract第5-6页
主要符号表第10-11页
第1章 引言第11-25页
    1.1 大型海藻的光合固碳第12-14页
        1.1.1 大型海藻的光合固碳特征与机制第12-13页
        1.1.2 大型海藻光合固碳在海洋碳循环中的作用第13页
        1.1.3 大型海藻光合固碳与海洋酸化的关系第13-14页
    1.2 藻类对无机碳的利用及碳浓缩机制(CCM)研究进展第14-19页
        1.2.1 水体中无机碳的理化性质第15-16页
        1.2.2 藻类对无机碳利用的方式及其机制第16-17页
        1.2.3 坛紫菜对无机碳的利用第17页
        1.2.4 藻类碳浓缩机制(CCM)研究进展第17-19页
    1.3 碳酸酐酶研究概况第19-24页
        1.3.1 碳酸酐酶的种类第19-20页
        1.3.2 碳酸酐酶催化的反应及原理第20-21页
        1.3.3 碳酸酐酶在无机碳利用中的作用第21页
        1.3.4 藻类碳酸酐酶基因的克隆与表达研究进展第21-24页
    1.4 本研究的目的和意义第24-25页
第2章 材料与方法第25-37页
    2.1 实验材料第25-26页
    2.2 实验仪器第26页
    2.3 主要实验试剂第26-27页
        2.3.1 坛紫菜培养母液第26-27页
        2.3.2 琼脂糖凝胶电泳试剂第27页
        2.3.3 LB培养基配制第27页
        2.3.4 碳酸酐酶基因克隆及表达定量分析相关试剂第27页
        2.3.5 碳酸酐酶提取液的配制第27页
        2.3.6 饱和CO_2蒸馏水的制备第27页
    2.4 实验引物第27-29页
    2.5 实验方法第29-37页
        2.5.1 坛紫菜总RNA的提取第29-30页
        2.5.2 总RNA的质量检测第30页
        2.5.3 基因克隆第30-34页
        2.5.4 实时荧光定量PCR第34-35页
        2.5.5 基因序列的生物信息学分析第35页
        2.5.6 坛紫菜pH补偿点及碳酸酐酶活性的测定第35-37页
第3章 实验结果第37-67页
    3.1 各样品总RNA的制备及质量检测第37页
    3.2 坛紫菜碳酸酐酶基因家族的克隆第37-54页
        3.2.1 坛紫菜α-CA基因家族的克隆及分析第38-44页
        3.2.2 坛紫菜β-CA基因家族的克隆及分析第44-51页
        3.2.3 PhγCA1基因的全长克隆及序列分析第51-54页
    3.3 坛紫菜碳酸酐酶家族基因的进化分析第54-55页
    3.4 坛紫菜碳酸酐酶家族基因转录表达水平的qRT-PCR分析第55-63页
        3.4.1 坛紫菜碳酸酐酶家族基因在不同发育世代的表达分析第56页
        3.4.2 坛紫菜碳酸酐酶家族基因的表达水平在不同CO_2浓度下的日变化第56-59页
        3.4.3 坛紫菜碳酸酐酶家族基因在失水胁迫条件下的定量表达分析第59-61页
        3.4.4 坛紫菜碳酸酐酶家族基因在高温胁迫条件下的表达定量分析第61-63页
    3.5 坛紫菜pH补偿点及碳酸酐酶活性的测定第63-67页
        3.5.1 坛紫菜pH补偿点的测定第63-65页
        3.5.2 坛紫菜碳酸酐酶在失水胁迫下的酶活力变化第65-66页
        3.5.3 坛紫菜碳酸酐酶在高温胁迫下的酶活力变化第66-67页
第4章 讨论第67-73页
    4.1 坛紫菜碳酸酐酶家族基因的进化分析第67-68页
    4.2 坛紫菜碳酸酐酶家族各基因表达水平的相对定量分析第68-71页
        4.2.1 坛紫菜碳酸酐酶家族各基因在生活史不同世代中的表达分析第68-69页
        4.2.2 坛紫菜碳酸酐酶家族各基因在不同CO_2浓度条件的日变化分析第69-70页
        4.2.3 坛紫菜碳酸酐酶家族基因在不同逆境胁迫条件下的表达分析第70-71页
    4.3 坛紫菜的pH补偿点及碳酸酐酶在逆境胁迫下的活力变化分析第71-73页
结论与展望第73-74页
致谢第74-75页
参考文献第75-84页
在学期间发表的学术论文第84页

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