摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
主要符号表 | 第10-11页 |
第1章 引言 | 第11-25页 |
1.1 大型海藻的光合固碳 | 第12-14页 |
1.1.1 大型海藻的光合固碳特征与机制 | 第12-13页 |
1.1.2 大型海藻光合固碳在海洋碳循环中的作用 | 第13页 |
1.1.3 大型海藻光合固碳与海洋酸化的关系 | 第13-14页 |
1.2 藻类对无机碳的利用及碳浓缩机制(CCM)研究进展 | 第14-19页 |
1.2.1 水体中无机碳的理化性质 | 第15-16页 |
1.2.2 藻类对无机碳利用的方式及其机制 | 第16-17页 |
1.2.3 坛紫菜对无机碳的利用 | 第17页 |
1.2.4 藻类碳浓缩机制(CCM)研究进展 | 第17-19页 |
1.3 碳酸酐酶研究概况 | 第19-24页 |
1.3.1 碳酸酐酶的种类 | 第19-20页 |
1.3.2 碳酸酐酶催化的反应及原理 | 第20-21页 |
1.3.3 碳酸酐酶在无机碳利用中的作用 | 第21页 |
1.3.4 藻类碳酸酐酶基因的克隆与表达研究进展 | 第21-24页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
第2章 材料与方法 | 第25-37页 |
2.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.2 实验仪器 | 第26页 |
2.3 主要实验试剂 | 第26-27页 |
2.3.1 坛紫菜培养母液 | 第26-27页 |
2.3.2 琼脂糖凝胶电泳试剂 | 第27页 |
2.3.3 LB培养基配制 | 第27页 |
2.3.4 碳酸酐酶基因克隆及表达定量分析相关试剂 | 第27页 |
2.3.5 碳酸酐酶提取液的配制 | 第27页 |
2.3.6 饱和CO_2蒸馏水的制备 | 第27页 |
2.4 实验引物 | 第27-29页 |
2.5 实验方法 | 第29-37页 |
2.5.1 坛紫菜总RNA的提取 | 第29-30页 |
2.5.2 总RNA的质量检测 | 第30页 |
2.5.3 基因克隆 | 第30-34页 |
2.5.4 实时荧光定量PCR | 第34-35页 |
2.5.5 基因序列的生物信息学分析 | 第35页 |
2.5.6 坛紫菜pH补偿点及碳酸酐酶活性的测定 | 第35-37页 |
第3章 实验结果 | 第37-67页 |
3.1 各样品总RNA的制备及质量检测 | 第37页 |
3.2 坛紫菜碳酸酐酶基因家族的克隆 | 第37-54页 |
3.2.1 坛紫菜α-CA基因家族的克隆及分析 | 第38-44页 |
3.2.2 坛紫菜β-CA基因家族的克隆及分析 | 第44-51页 |
3.2.3 PhγCA1基因的全长克隆及序列分析 | 第51-54页 |
3.3 坛紫菜碳酸酐酶家族基因的进化分析 | 第54-55页 |
3.4 坛紫菜碳酸酐酶家族基因转录表达水平的qRT-PCR分析 | 第55-63页 |
3.4.1 坛紫菜碳酸酐酶家族基因在不同发育世代的表达分析 | 第56页 |
3.4.2 坛紫菜碳酸酐酶家族基因的表达水平在不同CO_2浓度下的日变化 | 第56-59页 |
3.4.3 坛紫菜碳酸酐酶家族基因在失水胁迫条件下的定量表达分析 | 第59-61页 |
3.4.4 坛紫菜碳酸酐酶家族基因在高温胁迫条件下的表达定量分析 | 第61-63页 |
3.5 坛紫菜pH补偿点及碳酸酐酶活性的测定 | 第63-67页 |
3.5.1 坛紫菜pH补偿点的测定 | 第63-65页 |
3.5.2 坛紫菜碳酸酐酶在失水胁迫下的酶活力变化 | 第65-66页 |
3.5.3 坛紫菜碳酸酐酶在高温胁迫下的酶活力变化 | 第66-67页 |
第4章 讨论 | 第67-73页 |
4.1 坛紫菜碳酸酐酶家族基因的进化分析 | 第67-68页 |
4.2 坛紫菜碳酸酐酶家族各基因表达水平的相对定量分析 | 第68-71页 |
4.2.1 坛紫菜碳酸酐酶家族各基因在生活史不同世代中的表达分析 | 第68-69页 |
4.2.2 坛紫菜碳酸酐酶家族各基因在不同CO_2浓度条件的日变化分析 | 第69-70页 |
4.2.3 坛紫菜碳酸酐酶家族基因在不同逆境胁迫条件下的表达分析 | 第70-71页 |
4.3 坛紫菜的pH补偿点及碳酸酐酶在逆境胁迫下的活力变化分析 | 第71-73页 |
结论与展望 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-84页 |
在学期间发表的学术论文 | 第84页 |