| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一部分 Notch3对乳腺肿瘤干细胞的调控研究 | 第11-67页 |
| 第一章 绪论 | 第13-27页 |
| 1.1 肿瘤干细胞学说 | 第13-23页 |
| 1.1.1 肿瘤干细胞学说的提出以及发展 | 第13-14页 |
| 1.1.2 乳腺肿瘤干细胞标记物及局限性 | 第14-16页 |
| 1.1.3 乳腺肿瘤干细胞的调控 | 第16-23页 |
| 1.2 Notch泛抑制剂疗效不佳原因的思考及探究 | 第23-27页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第27-37页 |
| 2.1 实验材料、试剂和仪器 | 第27-29页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第27页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-37页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第29页 |
| 2.2.2 Notch抑制剂配制 | 第29-30页 |
| 2.2.3 shRNA的获取及构建稳定转染细胞系 | 第30页 |
| 2.2.4 过表达质粒构建及构建稳定转染细胞系 | 第30-31页 |
| 2.2.5 Western Blot实验 | 第31-32页 |
| 2.2.6 MTT细胞增殖实验 | 第32页 |
| 2.2.7 微球培养实验 | 第32页 |
| 2.2.8 荧光定量PCR(qRT-PCR)实验 | 第32-33页 |
| 2.2.9 染色质免疫共沉淀(ChIP)实验 | 第33-34页 |
| 2.2.10 酶联免疫吸附测定实验(ELISA) | 第34页 |
| 2.2.11 免疫组化实验 | 第34-35页 |
| 2.2.12 流式细胞术实验 | 第35页 |
| 2.2.13 小鼠体内成瘤实验 | 第35-36页 |
| 2.2.14 数据分析 | 第36-37页 |
| 第三章 实验结果 | 第37-63页 |
| 3.1 Notch信号通路抑制剂抑制Notch信号通路的活化 | 第37-38页 |
| 3.2 Notch信号通路抑制剂抑制乳腺癌细胞增殖 | 第38-39页 |
| 3.3 Notch信号通路抑制剂富集乳腺肿瘤干细胞 | 第39-42页 |
| 3.4 Notch信号通路抑制剂诱导IL6的表达 | 第42-43页 |
| 3.5 抑制Notch3受体上调IL6的表达 | 第43-44页 |
| 3.6 敲低Notch3受体上调乳腺肿瘤干细胞 | 第44-47页 |
| 3.7 敲低Notch3受体激活IL6通路进而上调乳腺肿瘤干细胞 | 第47-49页 |
| 3.8 Notch3通过上调Hey2抑制IL6的表达 | 第49-51页 |
| 3.9 MK-0752联合TCZ用药有效抑制乳腺肿瘤的生长以及减少乳腺肿瘤干细胞 | 第51-53页 |
| 3.10 低氧通过HIF1α直接调控Notch3的转录 | 第53-57页 |
| 3.11 低氧上调Notch3进而下调IL6的表达和乳腺肿瘤干细胞的比例 | 第57-63页 |
| 第四章 讨论 | 第63-67页 |
| 第二部分 Notch4对乳腺肿瘤干细胞的调控作用 | 第67-81页 |
| 第一章 绪论 | 第69-71页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第71-73页 |
| 2.1 实验材料、试剂和仪器 | 第71页 |
| 2.2 实验方法 | 第71-73页 |
| 2.2.1 细胞小室侵袭实验 | 第71页 |
| 2.2.2 细胞转录组测序 | 第71-73页 |
| 第三章 实验结果 | 第73-79页 |
| 3.1 Notch4相对高表达于三阴性乳腺癌中 | 第73-74页 |
| 3.2 Notch4阳性细胞表现出乳腺肿瘤干细胞的特征 | 第74-75页 |
| 3.3 Notch4联合CD24~-CD44~+更精确的标记三阴性乳腺肿瘤干细胞 | 第75-79页 |
| 第四章 讨论 | 第79-81页 |
| 总结 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-95页 |
| 附录 | 第95-103页 |
| 致谢 | 第103-105页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第105-106页 |
