| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略词 | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22页 |
| 1.1 支链氨基酸在医药领域中的重要性 | 第11页 |
| 1.2 支链氨基酸生物合成途径 | 第11-13页 |
| 1.3 乙酰乳酸/羟酸合酶概述 | 第13-18页 |
| 1.3.2 ALS/AHAS的作用机制 | 第14-15页 |
| 1.3.3 ALS/AHAS底物偏好性研究 | 第15-18页 |
| 1.4 枯草芽孢杆菌源的ALS/AHAS研究 | 第18页 |
| 1.5 AHAS/ALS活性测定的方法 | 第18-20页 |
| 1.6 1,2-二氨基-4,5-亚甲二氧基苯 | 第20页 |
| 1.7 本课题意义 | 第20-22页 |
| 第二章 枯草芽孢杆菌ALS的诱导表达及纯化 | 第22-30页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.1 菌种 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-26页 |
| 2.2.1 重组ALS的诱导表达 | 第23页 |
| 2.2.2 重组ALS的纯化 | 第23-25页 |
| 2.2.3 重组ALS的浓度测定 | 第25页 |
| 2.2.4 重组ALS的活性测定 | 第25-26页 |
| 2.2.5 乙偶姻的标准曲线 | 第26页 |
| 2.3 实验结果和讨论 | 第26-29页 |
| 2.3.1 重组ALS的诱导表达及纯化结果 | 第26-27页 |
| 2.3.2 重组ALS的浓度测定结果 | 第27页 |
| 2.3.3 ALS活性测定的结果 | 第27-29页 |
| 2.4 本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 柱前衍生-HPLC法测定ALS活性新方法建立 | 第30-48页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第30页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第30页 |
| 3.1.3 主要溶液配方 | 第30-31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-35页 |
| 3.2.1 HPLC检测波长的确定 | 第31页 |
| 3.2.2 HPLC法分离、纯化与检测四种化合物的条件优化 | 第31-32页 |
| 3.2.3 线性考察 | 第32页 |
| 3.2.4 GC法检测乙偶姻及3-羟基-2-戊酮 | 第32-33页 |
| 3.2.5 测定ALS活性的两种方法的比较 | 第33-35页 |
| 3.3 实验结果 | 第35-47页 |
| 3.3.1 检测波长的确定 | 第35-36页 |
| 3.3.2 HPLC检测条件的优化 | 第36-37页 |
| 3.3.3 四种标准品的的标准曲线 | 第37-38页 |
| 3.3.4 GC法检测乙偶姻及3-羟基-2-戊酮的结果 | 第38-39页 |
| 3.3.5 测定ALS活性的两种方法的比较 | 第39-47页 |
| 3.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 枯草芽孢杆菌ALS的稳态动力学参数测定及底物偏好性研究 | 第48-60页 |
| 4.1 实验材料 | 第48页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第48页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48-52页 |
| 4.2.1 酶催化反应条件的优化 | 第48-50页 |
| 4.2.2 ALS稳态动力学参数测定 | 第50-51页 |
| 4.2.3 ALS的底物偏好性测定 | 第51-52页 |
| 4.3 实验结果 | 第52-59页 |
| 4.3.1 酶催化反应条件的优化结果 | 第52-54页 |
| 4.3.2 DMB衍生-HPLC法测定ALS的稳态动力学参数 | 第54-56页 |
| 4.3.3 底物偏好性研究结果 | 第56-59页 |
| 4.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 全文总结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 科研成果 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
