| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第10-30页 |
| 1.1 蛋白质组学 | 第10-11页 |
| 1.2 蛋白质翻译后修饰 | 第11-24页 |
| 1.2.1 蛋白质糖基化研究 | 第11-24页 |
| 1.3 蛋白质磷酸化研究 | 第24-28页 |
| 1.3.1 磷酸化蛋白质组分常用富集方法 | 第25-28页 |
| 1.4 本文选题意义及研究内容 | 第28-30页 |
| 第2章 TMT-Staudinger试剂结合TMT固定化抗体对O-GlcNAc修饰肽段的标记及富集鉴定策略 | 第30-46页 |
| 2.1 引言 | 第30页 |
| 2.2 实验部分 | 第30-32页 |
| 2.2.1 实验药品 | 第30-31页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第31-32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-37页 |
| 2.3.1 TMT-Staudinger试剂的合成 | 第32页 |
| 2.3.2 用标准肽段对实验可行性评估 | 第32-33页 |
| 2.3.3 Hela细胞体内代谢标记 | 第33页 |
| 2.3.4 荧光标记Hela细胞内代谢标记的荧光检测 | 第33页 |
| 2.3.5 TMT固定化抗体对TMT-Staudinger标记的O-GlcNAc修饰蛋白的富集 | 第33-34页 |
| 2.3.6 SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳分析 | 第34-36页 |
| 2.3.7 质谱分析 | 第36-37页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第37-45页 |
| 2.4.1 TMT-Staudinger试剂的合成表征 | 第37-39页 |
| 2.4.2 对TMT-Staudinger试剂标记效果的考察 | 第39-41页 |
| 2.4.3 Hela细胞内代谢标记的荧光检测 | 第41-43页 |
| 2.4.4 TMT固定化抗体富集TMT-Staudinger标记的O-GlcNAc修饰蛋白的SDS-聚丙烯酰胺( SDS-PAGE)凝胶电泳分析 | 第43-44页 |
| 2.4.5 TMT固定化抗体对TMT-Staudinger标记的O-GlcNAc修饰蛋白的富集及QE质谱检测分析 | 第44-45页 |
| 2.5 小结 | 第45-46页 |
| 第3章 蛋白质酪氨酸磷酸化的规模化富集研究 | 第46-56页 |
| 3.1 引言 | 第46页 |
| 3.2 实验部分 | 第46-47页 |
| 3.2.1 实验药品 | 第46-47页 |
| 3.2.2 仪器设备 | 第47页 |
| 3.3 实验方法 | 第47-50页 |
| 3.3.1 制备C57BL/6J小鼠肝脏蛋白 | 第47-48页 |
| 3.3.2 小鼠肝脏蛋白的FASP酶切 | 第48页 |
| 3.3.3 C18柱的制备以及TiO_2的预处理 | 第48页 |
| 3.3.4 Ti_O2颗粒富集C57BL/6J小鼠肝脏蛋白酶切后的磷酸化肽段 | 第48-49页 |
| 3.3.5 高pH反相分离磷酸化肽段 | 第49页 |
| 3.3.6 TiO_2结合酪氨酸抗体富集酪氨酸磷酸化肽段 | 第49页 |
| 3.3.7 质谱鉴定磷酸化蛋白质 | 第49-50页 |
| 3.3.8 分析质谱数据 | 第50页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第50-53页 |
| 3.4.1 对于TiO_2与酶解肽段的最佳混合比例的研究分析 | 第50-51页 |
| 3.4.2 酶切肽段起始用量的优化 | 第51页 |
| 3.4.3 预分离方式的研究 | 第51-52页 |
| 3.4.4 色谱最佳分离时间的考察 | 第52-53页 |
| 3.4.5 优化后质谱鉴定分析 | 第53页 |
| 3.5 小结 | 第53-56页 |
| 参考文献 | 第56-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
