中文摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
英文缩写词表 | 第16-17页 |
引言 | 第17-19页 |
第一篇 文献综述 | 第19-37页 |
第1章 新孢子虫病原学研究进展 | 第19-23页 |
1 新孢子虫分类地位 | 第19页 |
2 新孢子虫形态学 | 第19-21页 |
2.1 速殖子 | 第20页 |
2.2 组织包囊 | 第20页 |
2.3 卵囊 | 第20-21页 |
3 犬新孢子虫生活史 | 第21-23页 |
第2章 新孢子虫病流行病学研究进展 | 第23-29页 |
1 新孢子虫病流行病学调查 | 第23-24页 |
2 新孢子虫宿主范围 | 第24-29页 |
2.1 哺乳动物 | 第24-27页 |
2.2 后兽亚纲类哺乳动物 | 第27-29页 |
第3章 新孢子虫病诊断与防治研究进展 | 第29-37页 |
1 新孢子虫病诊断 | 第29-34页 |
1.1 病原学检查 | 第29页 |
1.2 病理学检查 | 第29-31页 |
1.3 血清学诊断 | 第31-33页 |
1.4 分子生物学方法 | 第33-34页 |
2 新孢子虫的预防和治疗 | 第34-37页 |
2.1 预防 | 第34页 |
2.2 治疗 | 第34-37页 |
第二篇 研究内容 | 第37-89页 |
第1章 抗NcP40单克隆抗体的制备与NcP40蛋白亚细胞定位 | 第37-51页 |
1 材料与方法 | 第37-42页 |
1.1 试验材料 | 第37-38页 |
1.2 试验试剂 | 第38-39页 |
1.3 试验方法 | 第39-42页 |
2 试验结果 | 第42-48页 |
2.1 NcP40的原核表达 | 第42-43页 |
2.2 小鼠免疫结果测定 | 第43-44页 |
2.3 阳性杂交瘤细胞株筛选 | 第44-45页 |
2.4 犬新孢子虫重组蛋白检测阳性杂交瘤细胞单克隆株 | 第45页 |
2.5 单克隆抗体亚类鉴定 | 第45页 |
2.6 小鼠腹水纯化 | 第45-46页 |
2.7 小鼠腹水抗体效价的检测 | 第46-47页 |
2.8 NcP40蛋白亚细胞定位 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-49页 |
4 小结 | 第49-51页 |
第2章 牛新孢子虫感染双抗夹心ELISA检测方法的建立 | 第51-61页 |
1 试验材料 | 第51-52页 |
1.1 主要材料 | 第51页 |
1.2 主要仪器 | 第51页 |
1.3 主要试剂 | 第51-52页 |
2 试验方法 | 第52-54页 |
2.1 抗体及血清稀释度的确定 | 第52页 |
2.2 最佳封闭剂的选择 | 第52页 |
2.3 HRP标记的新孢子虫抗体工作浓度确定 | 第52-53页 |
2.4 底物反应时间的确定 | 第53页 |
2.5 双抗夹心ELISA阴性和阳性判断标准确定 | 第53页 |
2.6 敏感性试验 | 第53页 |
2.7 特异性试验 | 第53页 |
2.8 重复性试验 | 第53页 |
2.9 样品检测 | 第53-54页 |
3 试验结果 | 第54-58页 |
3.1 抗体及血清稀释度 | 第54页 |
3.2 最佳封闭剂 | 第54-55页 |
3.3 HRP标记的新孢子虫抗体工作浓度确定 | 第55页 |
3.4 底物反应时间的确定 | 第55-56页 |
3.5 临界值的判断 | 第56页 |
3.6 敏感性试验 | 第56页 |
3.7 特异性试验 | 第56-57页 |
3.8 重复性试验 | 第57-58页 |
3.9 样品检测 | 第58页 |
4 讨论 | 第58-59页 |
5 小结 | 第59-61页 |
第3章 牛新孢子虫感染间接ELISA检测方法的建立 | 第61-69页 |
1 试验材料 | 第61-62页 |
1.1 材料及仪器 | 第61页 |
1.2 主要试剂 | 第61-62页 |
2 试验方法 | 第62-64页 |
2.1 抗原及血清稀释度的确定 | 第62页 |
2.2 HRP标记的鼠抗牛IgG工作浓度确定 | 第62页 |
2.3 最佳封闭剂的选择 | 第62-63页 |
2.4 底物反应时间的确定 | 第63页 |
2.5 间接ELISA阴性和阳性判断标准确定 | 第63页 |
2.6 敏感性试验 | 第63页 |
2.7 特异性试验 | 第63页 |
2.8 重复性试验 | 第63页 |
2.9 样品检测 | 第63-64页 |
3 试验结果 | 第64-66页 |
3.1 抗原及血清稀释度 | 第64页 |
3.2 最佳封闭剂 | 第64-65页 |
3.3 HRP标记的鼠抗牛IgG工作浓度确定 | 第65页 |
3.4 底物反应时间的确定 | 第65页 |
3.5 临界值的判断 | 第65页 |
3.6 敏感性试验 | 第65-66页 |
3.7 特异性试验 | 第66页 |
3.8 重复性试验 | 第66页 |
3.9 样品检测 | 第66页 |
4 讨论 | 第66-67页 |
5 小结 | 第67-69页 |
第4章 牛新孢子虫感染Dot-ELISA检测方法的建立 | 第69-77页 |
1 试验材料 | 第69-70页 |
1.1 主要材料 | 第69页 |
1.2 主要仪器 | 第69页 |
1.3 主要试剂 | 第69-70页 |
2 试验方法 | 第70-71页 |
2.1 Dot-ELISA操作步骤 | 第70页 |
2.2 血清最佳稀释倍数的确定 | 第70-71页 |
2.3 HRP标记的鼠抗牛IgG最佳工作浓度的确定 | 第71页 |
2.4 包被抗原工作浓度的确定 | 第71页 |
2.5 敏感性试验 | 第71页 |
2.6 特异性试验 | 第71页 |
2.7 重复性试验 | 第71页 |
2.8 样品检测 | 第71页 |
3 试验结果 | 第71-74页 |
3.1 血清最佳稀释倍数的确定 | 第71-72页 |
3.2 HRP标记的鼠抗牛IgG最佳工作浓度的确定 | 第72页 |
3.3 包被抗原最佳工作浓度的确定 | 第72-73页 |
3.4 敏感性试验 | 第73页 |
3.5 特异性试验 | 第73页 |
3.6 重复性试验 | 第73-74页 |
3.7 样品检测 | 第74页 |
4 讨论 | 第74-75页 |
5 小结 | 第75-77页 |
第5章 牛新孢子虫感染胶体金免疫试纸条的研制 | 第77-89页 |
1 试验材料 | 第77-78页 |
1.1 主要材料 | 第77页 |
1.2 主要仪器 | 第77页 |
1.3 主要试剂 | 第77-78页 |
2 试验方法 | 第78-81页 |
2.1 胶体金的烧制 | 第78-79页 |
2.2 胶体金颗粒的鉴定 | 第79页 |
2.3 胶体金最佳pH的确定 | 第79页 |
2.4 SPA标记量的确定 | 第79页 |
2.5 金标SPA的制备 | 第79页 |
2.6 样品垫的处理 | 第79页 |
2.7 试纸条的组装 | 第79-80页 |
2.8 试纸条最佳反应条件的确定 | 第80页 |
2.9 试纸条性能试验 | 第80-81页 |
2.10 临床样品检测 | 第81页 |
3 试验结果 | 第81-86页 |
3.1 胶体金溶液的烧制 | 第81页 |
3.2 透射电镜鉴定 | 第81-82页 |
3.3 胶体金最佳pH的确定 | 第82页 |
3.4 最佳抗体标记量的确定 | 第82-83页 |
3.5 硝酸纤维素(NC)膜的选择 | 第83页 |
3.6 检测线(T)包被浓度的确定 | 第83-84页 |
3.7 质控线(C)包被浓度的确定 | 第84页 |
3.8 特异性试验 | 第84-85页 |
3.9 敏感性试验 | 第85页 |
3.10 重复性试验 | 第85-86页 |
3.11 保存期试验 | 第86页 |
3.12 临床样品检测 | 第86页 |
4 讨论 | 第86-88页 |
5 小结 | 第88-89页 |
结论 | 第89-91页 |
参考文献 | 第91-109页 |
导师简介 | 第109-111页 |
作者简介及文章发表情况 | 第111-112页 |
致谢 | 第112页 |