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抗NcP40单抗制备及牛新孢子虫感染ELISA和胶体金检测方法的建立

中文摘要第5-7页
abstract第7-9页
英文缩写词表第16-17页
引言第17-19页
第一篇 文献综述第19-37页
    第1章 新孢子虫病原学研究进展第19-23页
        1 新孢子虫分类地位第19页
        2 新孢子虫形态学第19-21页
            2.1 速殖子第20页
            2.2 组织包囊第20页
            2.3 卵囊第20-21页
        3 犬新孢子虫生活史第21-23页
    第2章 新孢子虫病流行病学研究进展第23-29页
        1 新孢子虫病流行病学调查第23-24页
        2 新孢子虫宿主范围第24-29页
            2.1 哺乳动物第24-27页
            2.2 后兽亚纲类哺乳动物第27-29页
    第3章 新孢子虫病诊断与防治研究进展第29-37页
        1 新孢子虫病诊断第29-34页
            1.1 病原学检查第29页
            1.2 病理学检查第29-31页
            1.3 血清学诊断第31-33页
            1.4 分子生物学方法第33-34页
        2 新孢子虫的预防和治疗第34-37页
            2.1 预防第34页
            2.2 治疗第34-37页
第二篇 研究内容第37-89页
    第1章 抗NcP40单克隆抗体的制备与NcP40蛋白亚细胞定位第37-51页
        1 材料与方法第37-42页
            1.1 试验材料第37-38页
            1.2 试验试剂第38-39页
            1.3 试验方法第39-42页
        2 试验结果第42-48页
            2.1 NcP40的原核表达第42-43页
            2.2 小鼠免疫结果测定第43-44页
            2.3 阳性杂交瘤细胞株筛选第44-45页
            2.4 犬新孢子虫重组蛋白检测阳性杂交瘤细胞单克隆株第45页
            2.5 单克隆抗体亚类鉴定第45页
            2.6 小鼠腹水纯化第45-46页
            2.7 小鼠腹水抗体效价的检测第46-47页
            2.8 NcP40蛋白亚细胞定位第47-48页
        3 讨论第48-49页
        4 小结第49-51页
    第2章 牛新孢子虫感染双抗夹心ELISA检测方法的建立第51-61页
        1 试验材料第51-52页
            1.1 主要材料第51页
            1.2 主要仪器第51页
            1.3 主要试剂第51-52页
        2 试验方法第52-54页
            2.1 抗体及血清稀释度的确定第52页
            2.2 最佳封闭剂的选择第52页
            2.3 HRP标记的新孢子虫抗体工作浓度确定第52-53页
            2.4 底物反应时间的确定第53页
            2.5 双抗夹心ELISA阴性和阳性判断标准确定第53页
            2.6 敏感性试验第53页
            2.7 特异性试验第53页
            2.8 重复性试验第53页
            2.9 样品检测第53-54页
        3 试验结果第54-58页
            3.1 抗体及血清稀释度第54页
            3.2 最佳封闭剂第54-55页
            3.3 HRP标记的新孢子虫抗体工作浓度确定第55页
            3.4 底物反应时间的确定第55-56页
            3.5 临界值的判断第56页
            3.6 敏感性试验第56页
            3.7 特异性试验第56-57页
            3.8 重复性试验第57-58页
            3.9 样品检测第58页
        4 讨论第58-59页
        5 小结第59-61页
    第3章 牛新孢子虫感染间接ELISA检测方法的建立第61-69页
        1 试验材料第61-62页
            1.1 材料及仪器第61页
            1.2 主要试剂第61-62页
        2 试验方法第62-64页
            2.1 抗原及血清稀释度的确定第62页
            2.2 HRP标记的鼠抗牛IgG工作浓度确定第62页
            2.3 最佳封闭剂的选择第62-63页
            2.4 底物反应时间的确定第63页
            2.5 间接ELISA阴性和阳性判断标准确定第63页
            2.6 敏感性试验第63页
            2.7 特异性试验第63页
            2.8 重复性试验第63页
            2.9 样品检测第63-64页
        3 试验结果第64-66页
            3.1 抗原及血清稀释度第64页
            3.2 最佳封闭剂第64-65页
            3.3 HRP标记的鼠抗牛IgG工作浓度确定第65页
            3.4 底物反应时间的确定第65页
            3.5 临界值的判断第65页
            3.6 敏感性试验第65-66页
            3.7 特异性试验第66页
            3.8 重复性试验第66页
            3.9 样品检测第66页
        4 讨论第66-67页
        5 小结第67-69页
    第4章 牛新孢子虫感染Dot-ELISA检测方法的建立第69-77页
        1 试验材料第69-70页
            1.1 主要材料第69页
            1.2 主要仪器第69页
            1.3 主要试剂第69-70页
        2 试验方法第70-71页
            2.1 Dot-ELISA操作步骤第70页
            2.2 血清最佳稀释倍数的确定第70-71页
            2.3 HRP标记的鼠抗牛IgG最佳工作浓度的确定第71页
            2.4 包被抗原工作浓度的确定第71页
            2.5 敏感性试验第71页
            2.6 特异性试验第71页
            2.7 重复性试验第71页
            2.8 样品检测第71页
        3 试验结果第71-74页
            3.1 血清最佳稀释倍数的确定第71-72页
            3.2 HRP标记的鼠抗牛IgG最佳工作浓度的确定第72页
            3.3 包被抗原最佳工作浓度的确定第72-73页
            3.4 敏感性试验第73页
            3.5 特异性试验第73页
            3.6 重复性试验第73-74页
            3.7 样品检测第74页
        4 讨论第74-75页
        5 小结第75-77页
    第5章 牛新孢子虫感染胶体金免疫试纸条的研制第77-89页
        1 试验材料第77-78页
            1.1 主要材料第77页
            1.2 主要仪器第77页
            1.3 主要试剂第77-78页
        2 试验方法第78-81页
            2.1 胶体金的烧制第78-79页
            2.2 胶体金颗粒的鉴定第79页
            2.3 胶体金最佳pH的确定第79页
            2.4 SPA标记量的确定第79页
            2.5 金标SPA的制备第79页
            2.6 样品垫的处理第79页
            2.7 试纸条的组装第79-80页
            2.8 试纸条最佳反应条件的确定第80页
            2.9 试纸条性能试验第80-81页
            2.10 临床样品检测第81页
        3 试验结果第81-86页
            3.1 胶体金溶液的烧制第81页
            3.2 透射电镜鉴定第81-82页
            3.3 胶体金最佳pH的确定第82页
            3.4 最佳抗体标记量的确定第82-83页
            3.5 硝酸纤维素(NC)膜的选择第83页
            3.6 检测线(T)包被浓度的确定第83-84页
            3.7 质控线(C)包被浓度的确定第84页
            3.8 特异性试验第84-85页
            3.9 敏感性试验第85页
            3.10 重复性试验第85-86页
            3.11 保存期试验第86页
            3.12 临床样品检测第86页
        4 讨论第86-88页
        5 小结第88-89页
结论第89-91页
参考文献第91-109页
导师简介第109-111页
作者简介及文章发表情况第111-112页
致谢第112页

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