中文摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
前言 | 第17-21页 |
第一篇 文献综述 | 第21-45页 |
第1章 禽腺病毒(FAdV)引发疾病全球研究现状 | 第21-31页 |
1.1 包涵体肝炎 | 第23-25页 |
1.1.1 发病与病因 | 第23页 |
1.1.2 实验室研究 | 第23-24页 |
1.1.3 病理学变化 | 第24-25页 |
1.2 肝炎-心包积水综合征 | 第25-26页 |
1.2.1 发病与病因 | 第25页 |
1.2.2 实验室研究 | 第25-26页 |
1.2.3 临床病理学方面 | 第26页 |
1.3 肌胃糜烂(GE) | 第26-28页 |
1.3.1 发病与病因 | 第26-27页 |
1.3.2 实验室研究 | 第27-28页 |
1.4 机体对FAdV感染的免疫保护应答 | 第28-30页 |
1.5 发展与展望 | 第30-31页 |
第2章 禽腺病毒检测方法研究进展 | 第31-39页 |
2.1 病毒的分离 | 第31-32页 |
2.2 血清学方法 | 第32-34页 |
2.2.1 血清中和试验 | 第32页 |
2.2.2 琼脂凝胶扩散试验 | 第32-33页 |
2.2.3 ELISA检测方法 | 第33-34页 |
2.2.4 间接免疫荧光试验 | 第34页 |
2.3 分子生物学方法 | 第34-39页 |
2.3.1 PCR法检测 | 第34-35页 |
2.3.2 Real-timePCR检测法 | 第35-36页 |
2.3.3 探针检测法 | 第36-37页 |
2.3.4 环介导等温核酸扩增技术 | 第37-39页 |
第3章 禽腺病毒疫苗研究现状 | 第39-45页 |
3.1 疫苗研发现状 | 第39-40页 |
3.2 全病毒灭活疫苗 | 第40-42页 |
3.3 弱毒活疫苗 | 第42页 |
3.4 亚单位疫苗 | 第42-43页 |
3.5 小结 | 第43-45页 |
第二篇 研究内容 | 第45-113页 |
第1章 FAdV分离鉴定、通用PCR检测与血清型定位研究 | 第45-63页 |
1.1 材料和方法 | 第46-50页 |
1.1.1 主要仪器与试剂 | 第46-47页 |
1.1.2 引物设计与合成 | 第47页 |
1.1.3 病毒株的分离鉴定 | 第47-48页 |
1.1.4 病毒理化特性分析 | 第48-49页 |
1.1.4.1 热敏感性试验 | 第48页 |
1.1.4.2 酸碱度敏感性试验 | 第48页 |
1.1.4.3 有机溶剂敏感性试验 | 第48-49页 |
1.1.5 动物回归感染试验 | 第49页 |
1.1.6 通用PCR检测方法的建立 | 第49-50页 |
1.2 结果与分析 | 第50-58页 |
1.2.1 病毒分离及鸡胚病变观察 | 第50-51页 |
1.2.2 病毒的血凝性检测 | 第51-52页 |
1.2.3 分离毒株动物回归试验 | 第52-53页 |
1.2.4 病毒理化特性分析 | 第53页 |
1.2.5 FAdV通用PCR检测方法建立 | 第53-58页 |
1.3 讨论 | 第58-60页 |
1.4 小结 | 第60-63页 |
第2章 FAdV-4变异分析及其疫苗制备毒株筛选 | 第63-75页 |
2.1 材料与方法 | 第64-67页 |
2.1.1 主要仪器设备 | 第64页 |
2.1.2 载体、细菌与鸡胚 | 第64页 |
2.1.3 主要试剂 | 第64页 |
2.1.4 引物设计 | 第64-65页 |
2.1.5 病毒基因组DNA的提取 | 第65页 |
2.1.6 FAdV-4Hexon蛋白ORF克隆 | 第65页 |
2.1.7 Hexon基因克隆与鉴定 | 第65-66页 |
2.1.8 FAdV-4Hexon蛋白基因序列分析 | 第66页 |
2.1.9 FAdV-4分离株动物回归攻毒试验 | 第66页 |
2.1.10 FAdV-4疫苗株筛选 | 第66-67页 |
2.2 结果与分析 | 第67-72页 |
2.2.1 Hexon基因PCR结果 | 第67页 |
2.2.2 Hexon蛋白基因重组质粒的鉴定 | 第67-68页 |
2.2.3 Hexon基因序列与进化树分析 | 第68-69页 |
2.2.4 分离株回归攻毒试验 | 第69-70页 |
2.2.5 FAdV-4疫苗候选毒株筛选 | 第70-72页 |
2.3 讨论 | 第72-73页 |
2.4 小结 | 第73-75页 |
第3章 FAdV-4毒种种子批的检定 | 第75-93页 |
3.1 材料与方法 | 第75-82页 |
3.1.1 实验材料 | 第75-76页 |
3.1.2 实验方法 | 第76-82页 |
3.2 结果与分析 | 第82-90页 |
3.2.1 毒种传代培养结果 | 第82-83页 |
3.2.2 基础种子批病毒含量测定结果 | 第83-85页 |
3.2.3 种子批30日龄SPF鸡半数致死量(LD50)含量测定结果 | 第85页 |
3.2.4 免疫原性检测结果 | 第85-86页 |
3.2.5 基础种子批无菌检验结果 | 第86页 |
3.2.6 基础种子批支原体检验 | 第86-87页 |
3.2.7 基础种子批的纯净性检测 | 第87-88页 |
3.2.8 基础种子批外源病毒常规检测结果 | 第88-90页 |
3.3 讨论 | 第90-92页 |
3.4 小结 | 第92-93页 |
第4章 FAdV-4油乳剂疫苗生产工艺研究 | 第93-103页 |
4.1 材料与方法 | 第93-97页 |
4.1.1 实验材料 | 第93-94页 |
4.1.2 实验方法 | 第94-97页 |
4.2 结果与分析 | 第97-100页 |
4.2.1 生产毒种的毒价(力)检验 | 第97-98页 |
4.2.2 灭活及灭活后检验结果 | 第98-100页 |
4.3 讨论 | 第100-101页 |
4.4 小结 | 第101-103页 |
第5章 FAdV-4油乳剂疫苗的保存期、安全性与效力评价 | 第103-113页 |
5.1 材料与方法 | 第103-106页 |
5.1.1 实验材料 | 第103页 |
5.1.2 实验方法 | 第103-106页 |
5.2 结果与分析 | 第106-111页 |
5.2.1 安全性检验结果 | 第106-107页 |
5.2.2 半数保护量PD50及免疫剂量试验结果 | 第107-108页 |
5.2.3 免疫攻毒后排毒试验 | 第108-109页 |
5.2.4 效力检验 | 第109页 |
5.2.5 免疫抗体监测结果 | 第109-110页 |
5.2.6 疫苗的保存期试验 | 第110-111页 |
5.3 讨论 | 第111-112页 |
5.3.1 疫苗的安全性 | 第111页 |
5.3.2 免疫剂量的确定 | 第111页 |
5.3.3 效力评价 | 第111-112页 |
5.3.4 保存期研究 | 第112页 |
5.4 小结 | 第112-113页 |
结论 | 第113-115页 |
参考文献 | 第115-131页 |
作者简介及博士期间科研成果 | 第131-134页 |
致谢 | 第134页 |