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Ⅰ群禽腺病毒分离鉴定与通用PCR检测及FAdV-4油乳剂灭活疫苗的研制

中文摘要第5-7页
abstract第7-9页
前言第17-21页
第一篇 文献综述第21-45页
    第1章 禽腺病毒(FAdV)引发疾病全球研究现状第21-31页
        1.1 包涵体肝炎第23-25页
            1.1.1 发病与病因第23页
            1.1.2 实验室研究第23-24页
            1.1.3 病理学变化第24-25页
        1.2 肝炎-心包积水综合征第25-26页
            1.2.1 发病与病因第25页
            1.2.2 实验室研究第25-26页
            1.2.3 临床病理学方面第26页
        1.3 肌胃糜烂(GE)第26-28页
            1.3.1 发病与病因第26-27页
            1.3.2 实验室研究第27-28页
        1.4 机体对FAdV感染的免疫保护应答第28-30页
        1.5 发展与展望第30-31页
    第2章 禽腺病毒检测方法研究进展第31-39页
        2.1 病毒的分离第31-32页
        2.2 血清学方法第32-34页
            2.2.1 血清中和试验第32页
            2.2.2 琼脂凝胶扩散试验第32-33页
            2.2.3 ELISA检测方法第33-34页
            2.2.4 间接免疫荧光试验第34页
        2.3 分子生物学方法第34-39页
            2.3.1 PCR法检测第34-35页
            2.3.2 Real-timePCR检测法第35-36页
            2.3.3 探针检测法第36-37页
            2.3.4 环介导等温核酸扩增技术第37-39页
    第3章 禽腺病毒疫苗研究现状第39-45页
        3.1 疫苗研发现状第39-40页
        3.2 全病毒灭活疫苗第40-42页
        3.3 弱毒活疫苗第42页
        3.4 亚单位疫苗第42-43页
        3.5 小结第43-45页
第二篇 研究内容第45-113页
    第1章 FAdV分离鉴定、通用PCR检测与血清型定位研究第45-63页
        1.1 材料和方法第46-50页
            1.1.1 主要仪器与试剂第46-47页
            1.1.2 引物设计与合成第47页
            1.1.3 病毒株的分离鉴定第47-48页
            1.1.4 病毒理化特性分析第48-49页
                1.1.4.1 热敏感性试验第48页
                1.1.4.2 酸碱度敏感性试验第48页
                1.1.4.3 有机溶剂敏感性试验第48-49页
            1.1.5 动物回归感染试验第49页
            1.1.6 通用PCR检测方法的建立第49-50页
        1.2 结果与分析第50-58页
            1.2.1 病毒分离及鸡胚病变观察第50-51页
            1.2.2 病毒的血凝性检测第51-52页
            1.2.3 分离毒株动物回归试验第52-53页
            1.2.4 病毒理化特性分析第53页
            1.2.5 FAdV通用PCR检测方法建立第53-58页
        1.3 讨论第58-60页
        1.4 小结第60-63页
    第2章 FAdV-4变异分析及其疫苗制备毒株筛选第63-75页
        2.1 材料与方法第64-67页
            2.1.1 主要仪器设备第64页
            2.1.2 载体、细菌与鸡胚第64页
            2.1.3 主要试剂第64页
            2.1.4 引物设计第64-65页
            2.1.5 病毒基因组DNA的提取第65页
            2.1.6 FAdV-4Hexon蛋白ORF克隆第65页
            2.1.7 Hexon基因克隆与鉴定第65-66页
            2.1.8 FAdV-4Hexon蛋白基因序列分析第66页
            2.1.9 FAdV-4分离株动物回归攻毒试验第66页
            2.1.10 FAdV-4疫苗株筛选第66-67页
        2.2 结果与分析第67-72页
            2.2.1 Hexon基因PCR结果第67页
            2.2.2 Hexon蛋白基因重组质粒的鉴定第67-68页
            2.2.3 Hexon基因序列与进化树分析第68-69页
            2.2.4 分离株回归攻毒试验第69-70页
            2.2.5 FAdV-4疫苗候选毒株筛选第70-72页
        2.3 讨论第72-73页
        2.4 小结第73-75页
    第3章 FAdV-4毒种种子批的检定第75-93页
        3.1 材料与方法第75-82页
            3.1.1 实验材料第75-76页
            3.1.2 实验方法第76-82页
        3.2 结果与分析第82-90页
            3.2.1 毒种传代培养结果第82-83页
            3.2.2 基础种子批病毒含量测定结果第83-85页
            3.2.3 种子批30日龄SPF鸡半数致死量(LD50)含量测定结果第85页
            3.2.4 免疫原性检测结果第85-86页
            3.2.5 基础种子批无菌检验结果第86页
            3.2.6 基础种子批支原体检验第86-87页
            3.2.7 基础种子批的纯净性检测第87-88页
            3.2.8 基础种子批外源病毒常规检测结果第88-90页
        3.3 讨论第90-92页
        3.4 小结第92-93页
    第4章 FAdV-4油乳剂疫苗生产工艺研究第93-103页
        4.1 材料与方法第93-97页
            4.1.1 实验材料第93-94页
            4.1.2 实验方法第94-97页
        4.2 结果与分析第97-100页
            4.2.1 生产毒种的毒价(力)检验第97-98页
            4.2.2 灭活及灭活后检验结果第98-100页
        4.3 讨论第100-101页
        4.4 小结第101-103页
    第5章 FAdV-4油乳剂疫苗的保存期、安全性与效力评价第103-113页
        5.1 材料与方法第103-106页
            5.1.1 实验材料第103页
            5.1.2 实验方法第103-106页
        5.2 结果与分析第106-111页
            5.2.1 安全性检验结果第106-107页
            5.2.2 半数保护量PD50及免疫剂量试验结果第107-108页
            5.2.3 免疫攻毒后排毒试验第108-109页
            5.2.4 效力检验第109页
            5.2.5 免疫抗体监测结果第109-110页
            5.2.6 疫苗的保存期试验第110-111页
        5.3 讨论第111-112页
            5.3.1 疫苗的安全性第111页
            5.3.2 免疫剂量的确定第111页
            5.3.3 效力评价第111-112页
            5.3.4 保存期研究第112页
        5.4 小结第112-113页
结论第113-115页
参考文献第115-131页
作者简介及博士期间科研成果第131-134页
致谢第134页

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