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内蒙古绒山羊精液冷冻保存方法优化及精液稀释液主要成份的作用机制研究

摘要第3-5页
abstract第5-7页
1 引言第14-33页
    1.1 精液冷冻保存的意义第14页
    1.2 山羊精液的冷冻保存发展第14-15页
    1.3 山羊精液的特征第15-17页
        1.3.1 山羊精液的季节性特征第15-16页
        1.3.2 精子质膜的特征第16-17页
    1.4 冷冻和解冻速率的影响第17-18页
    1.5 精液冷冻保存稀释液第18-22页
        1.5.1 冷冻保护剂第19-20页
        1.5.2 糖类第20-21页
        1.5.3 胆固醇第21-22页
    1.6 精子冷冻损伤第22-26页
        1.6.1 精子结构第22-23页
        1.6.2 活性氧第23-24页
        1.6.3 钙离子第24-25页
        1.6.4 蛋白质酪氨酸磷酸化第25-26页
    1.7 精子代谢调节第26-28页
        1.7.1 糖酵解第26-27页
        1.7.2 氧化磷酸化第27-28页
    1.8 腺苷酸激活蛋白激酶第28-31页
        1.8.1 腺苷酸激活蛋白激酶的表达第29页
        1.8.2 精子中腺苷酸激活蛋白激酶的功能第29-31页
    1.9 研究目的和意义第31-32页
    1.10 实验设计第32-33页
研究一 2 绒山羊精液冷冻保存方法优化第33-50页
    2.1 材料与方法第33-34页
        2.1.1 主要试剂与仪器第33页
        2.1.2 试验动物第33页
        2.1.3 精液采集与稀释液配制第33-34页
    2.2 精液冷冻保存第34页
    2.3 精子质量检测第34-38页
        2.3.1 精子运动性能检测第34-35页
        2.3.2 精子结构检测第35-38页
        2.3.3 丙二醛含量检测第38页
        2.3.4 数据分析第38页
    2.4 结果第38-45页
        2.4.1 液氮熏蒸高度对绒山羊精子质量的影响第38-40页
        2.4.2 精清对绒山羊精子质量的影响第40-43页
        2.4.3 卵黄和大豆卵磷脂对绒山羊精子质量影响第43-45页
    2.5 讨论第45-49页
        2.5.1 顶体完整性分析方法第45-46页
        2.5.2 冷冻速率对精液冷冻保存的影响第46页
        2.5.3 精清对精液冷冻保存的影响第46-47页
        2.5.4 卵黄与卵磷脂对精液冷冻保存的影响第47-49页
    2.6 小结第49-50页
研究二 3 氧化磷酸化和糖酵解对绒山羊精液冷冻保存的影响第50-70页
    3.1 材料与方法第50页
        3.1.1 主要试剂与仪器第50页
        3.1.2 试验动物第50页
        3.1.3 精液采集与冷冻液配制第50页
    3.2 精液冷冻保存第50-51页
    3.3 精子质量检测第51页
        3.3.1 精子运动性能检测第51页
        3.3.2 精子结构完整性检测第51页
    3.4 精子代谢的检测第51-52页
        3.4.1 精子线粒体膜电位检测第51-52页
        3.4.2 活性氧水平检测第52页
        3.4.3 丙二醛含量检测第52页
        3.4.4 数据分析第52页
    3.5 结果第52-66页
        3.5.1 氧化磷酸化对绒山羊精子冷冻保存后质量的影响第52-54页
        3.5.2 氧化磷酸化对绒山羊精子冷冻保存后代谢的影响第54-56页
        3.5.3 糖酵解对绒山羊精子冷冻保存后质量的影响第56-58页
        3.5.4 糖酵解对绒山羊精子冷冻保存后代谢的影响第58-60页
        3.5.5 氧化磷酸化对解冻后绒山羊精子质量的影响第60-62页
        3.5.6 糖酵解对解冻后绒山羊精子质量的影响第62-66页
    3.6 讨论第66-69页
        3.6.1 氧化磷酸化和糖酵解对精液冷冻保存的影响第66-68页
        3.6.2 氧化磷酸化和糖酵解对解冻后精液的影响第68-69页
    3.7 结论第69-70页
研究三 4 葡萄糖和海藻糖对绒山羊精液冷冻保存的影响第70-89页
    4.1 材料与方法第70页
        4.1.1 主要试剂与仪器第70页
        4.1.2 试验动物第70页
        4.1.3 精液采集与稀释液配制第70页
    4.2 精液冷冻保存第70-71页
    4.3 精子质量检测第71页
        4.3.1 精子运动性能检测第71页
        4.3.2 精子结构完整性检测第71页
    4.4 精子代谢检测第71-73页
        4.4.1 ATP含量检测第71页
        4.4.2 丙酮酸含量检测第71-72页
        4.4.3 乳酸含量检测第72页
        4.4.4 活性氧和Ca~(2+)水平检测第72-73页
    4.5 AMPK的检测第73-74页
        4.5.1 westernblot第73页
        4.5.2 免疫荧光和免疫组化第73-74页
    4.6 数据分析第74页
    4.7 结果第74-82页
        4.7.1 葡萄糖对绒山羊精子冷冻保存的影响第74-75页
        4.7.2 葡萄糖对精子冷冻保存后代谢的影响第75-78页
        4.7.3 海藻糖对绒山羊精子冷冻保存的影响第78-79页
        4.7.4 海藻糖对精子冷冻保存后代谢的影响第79-81页
        4.7.5 AMPK蛋白的表达与定位第81-82页
    4.8 讨论第82-88页
        4.8.1 葡萄糖对绒山羊精液冷冻保存的作用第82-85页
        4.8.2 海藻糖对绒山羊精液冷冻保存的作用第85-88页
    4.9 小结第88-89页
研究四 5 β-环糊精胆固醇对绒山羊精液冷冻保护机制的研究第89-99页
    5.1 试验材料第89-90页
        5.1.1 试验试剂和仪器第89页
        5.1.2 试验动物第89页
        5.1.3 精液采集与试剂配制第89-90页
    5.2 精液冷冻保存第90页
    5.3 精子质量检测第90页
        5.3.1 精子运动性能检测第90页
        5.3.2 精子结构完整性检测第90页
    5.4 精子代谢检测第90页
    5.5 精子获能第90页
    5.6 蛋白酪氨酸磷酸第90-91页
        5.6.1 Westernblot第90页
        5.6.2 免疫荧光第90-91页
    5.7 数据分析第91页
    5.8 结果第91-96页
        5.8.1 CLC对绒山羊精子冷冻保存后质量的影响第91-92页
        5.8.2 CLC对绒山羊精子冷冻保存后代谢的影响第92-94页
        5.8.4 CLC对绒山羊精子冷冻保存后蛋白酪氨酸磷酸的影响第94页
        5.8.5 CLC对解冻后绒山羊精子质量影响第94-96页
        5.8.6 CLC对A23187诱导精子顶体反应的作用第96页
    5.9 讨论第96-98页
    5.10 小结第98-99页
6 结论第99-100页
致谢第100-101页
参考文献第101-123页
作者简介第123页

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