摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-7页 |
1 引言 | 第14-33页 |
1.1 精液冷冻保存的意义 | 第14页 |
1.2 山羊精液的冷冻保存发展 | 第14-15页 |
1.3 山羊精液的特征 | 第15-17页 |
1.3.1 山羊精液的季节性特征 | 第15-16页 |
1.3.2 精子质膜的特征 | 第16-17页 |
1.4 冷冻和解冻速率的影响 | 第17-18页 |
1.5 精液冷冻保存稀释液 | 第18-22页 |
1.5.1 冷冻保护剂 | 第19-20页 |
1.5.2 糖类 | 第20-21页 |
1.5.3 胆固醇 | 第21-22页 |
1.6 精子冷冻损伤 | 第22-26页 |
1.6.1 精子结构 | 第22-23页 |
1.6.2 活性氧 | 第23-24页 |
1.6.3 钙离子 | 第24-25页 |
1.6.4 蛋白质酪氨酸磷酸化 | 第25-26页 |
1.7 精子代谢调节 | 第26-28页 |
1.7.1 糖酵解 | 第26-27页 |
1.7.2 氧化磷酸化 | 第27-28页 |
1.8 腺苷酸激活蛋白激酶 | 第28-31页 |
1.8.1 腺苷酸激活蛋白激酶的表达 | 第29页 |
1.8.2 精子中腺苷酸激活蛋白激酶的功能 | 第29-31页 |
1.9 研究目的和意义 | 第31-32页 |
1.10 实验设计 | 第32-33页 |
研究一 2 绒山羊精液冷冻保存方法优化 | 第33-50页 |
2.1 材料与方法 | 第33-34页 |
2.1.1 主要试剂与仪器 | 第33页 |
2.1.2 试验动物 | 第33页 |
2.1.3 精液采集与稀释液配制 | 第33-34页 |
2.2 精液冷冻保存 | 第34页 |
2.3 精子质量检测 | 第34-38页 |
2.3.1 精子运动性能检测 | 第34-35页 |
2.3.2 精子结构检测 | 第35-38页 |
2.3.3 丙二醛含量检测 | 第38页 |
2.3.4 数据分析 | 第38页 |
2.4 结果 | 第38-45页 |
2.4.1 液氮熏蒸高度对绒山羊精子质量的影响 | 第38-40页 |
2.4.2 精清对绒山羊精子质量的影响 | 第40-43页 |
2.4.3 卵黄和大豆卵磷脂对绒山羊精子质量影响 | 第43-45页 |
2.5 讨论 | 第45-49页 |
2.5.1 顶体完整性分析方法 | 第45-46页 |
2.5.2 冷冻速率对精液冷冻保存的影响 | 第46页 |
2.5.3 精清对精液冷冻保存的影响 | 第46-47页 |
2.5.4 卵黄与卵磷脂对精液冷冻保存的影响 | 第47-49页 |
2.6 小结 | 第49-50页 |
研究二 3 氧化磷酸化和糖酵解对绒山羊精液冷冻保存的影响 | 第50-70页 |
3.1 材料与方法 | 第50页 |
3.1.1 主要试剂与仪器 | 第50页 |
3.1.2 试验动物 | 第50页 |
3.1.3 精液采集与冷冻液配制 | 第50页 |
3.2 精液冷冻保存 | 第50-51页 |
3.3 精子质量检测 | 第51页 |
3.3.1 精子运动性能检测 | 第51页 |
3.3.2 精子结构完整性检测 | 第51页 |
3.4 精子代谢的检测 | 第51-52页 |
3.4.1 精子线粒体膜电位检测 | 第51-52页 |
3.4.2 活性氧水平检测 | 第52页 |
3.4.3 丙二醛含量检测 | 第52页 |
3.4.4 数据分析 | 第52页 |
3.5 结果 | 第52-66页 |
3.5.1 氧化磷酸化对绒山羊精子冷冻保存后质量的影响 | 第52-54页 |
3.5.2 氧化磷酸化对绒山羊精子冷冻保存后代谢的影响 | 第54-56页 |
3.5.3 糖酵解对绒山羊精子冷冻保存后质量的影响 | 第56-58页 |
3.5.4 糖酵解对绒山羊精子冷冻保存后代谢的影响 | 第58-60页 |
3.5.5 氧化磷酸化对解冻后绒山羊精子质量的影响 | 第60-62页 |
3.5.6 糖酵解对解冻后绒山羊精子质量的影响 | 第62-66页 |
3.6 讨论 | 第66-69页 |
3.6.1 氧化磷酸化和糖酵解对精液冷冻保存的影响 | 第66-68页 |
3.6.2 氧化磷酸化和糖酵解对解冻后精液的影响 | 第68-69页 |
3.7 结论 | 第69-70页 |
研究三 4 葡萄糖和海藻糖对绒山羊精液冷冻保存的影响 | 第70-89页 |
4.1 材料与方法 | 第70页 |
4.1.1 主要试剂与仪器 | 第70页 |
4.1.2 试验动物 | 第70页 |
4.1.3 精液采集与稀释液配制 | 第70页 |
4.2 精液冷冻保存 | 第70-71页 |
4.3 精子质量检测 | 第71页 |
4.3.1 精子运动性能检测 | 第71页 |
4.3.2 精子结构完整性检测 | 第71页 |
4.4 精子代谢检测 | 第71-73页 |
4.4.1 ATP含量检测 | 第71页 |
4.4.2 丙酮酸含量检测 | 第71-72页 |
4.4.3 乳酸含量检测 | 第72页 |
4.4.4 活性氧和Ca~(2+)水平检测 | 第72-73页 |
4.5 AMPK的检测 | 第73-74页 |
4.5.1 westernblot | 第73页 |
4.5.2 免疫荧光和免疫组化 | 第73-74页 |
4.6 数据分析 | 第74页 |
4.7 结果 | 第74-82页 |
4.7.1 葡萄糖对绒山羊精子冷冻保存的影响 | 第74-75页 |
4.7.2 葡萄糖对精子冷冻保存后代谢的影响 | 第75-78页 |
4.7.3 海藻糖对绒山羊精子冷冻保存的影响 | 第78-79页 |
4.7.4 海藻糖对精子冷冻保存后代谢的影响 | 第79-81页 |
4.7.5 AMPK蛋白的表达与定位 | 第81-82页 |
4.8 讨论 | 第82-88页 |
4.8.1 葡萄糖对绒山羊精液冷冻保存的作用 | 第82-85页 |
4.8.2 海藻糖对绒山羊精液冷冻保存的作用 | 第85-88页 |
4.9 小结 | 第88-89页 |
研究四 5 β-环糊精胆固醇对绒山羊精液冷冻保护机制的研究 | 第89-99页 |
5.1 试验材料 | 第89-90页 |
5.1.1 试验试剂和仪器 | 第89页 |
5.1.2 试验动物 | 第89页 |
5.1.3 精液采集与试剂配制 | 第89-90页 |
5.2 精液冷冻保存 | 第90页 |
5.3 精子质量检测 | 第90页 |
5.3.1 精子运动性能检测 | 第90页 |
5.3.2 精子结构完整性检测 | 第90页 |
5.4 精子代谢检测 | 第90页 |
5.5 精子获能 | 第90页 |
5.6 蛋白酪氨酸磷酸 | 第90-91页 |
5.6.1 Westernblot | 第90页 |
5.6.2 免疫荧光 | 第90-91页 |
5.7 数据分析 | 第91页 |
5.8 结果 | 第91-96页 |
5.8.1 CLC对绒山羊精子冷冻保存后质量的影响 | 第91-92页 |
5.8.2 CLC对绒山羊精子冷冻保存后代谢的影响 | 第92-94页 |
5.8.4 CLC对绒山羊精子冷冻保存后蛋白酪氨酸磷酸的影响 | 第94页 |
5.8.5 CLC对解冻后绒山羊精子质量影响 | 第94-96页 |
5.8.6 CLC对A23187诱导精子顶体反应的作用 | 第96页 |
5.9 讨论 | 第96-98页 |
5.10 小结 | 第98-99页 |
6 结论 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
参考文献 | 第101-123页 |
作者简介 | 第123页 |