摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-7页 |
缩略语表 | 第15-16页 |
1 前言 | 第16-42页 |
1.1 骨骼肌卫星细胞概述 | 第17-24页 |
1.1.1 成体组织来源的干细胞 | 第17-18页 |
1.1.2 骨骼肌卫星细胞概述 | 第18-20页 |
1.1.3 骨骼肌卫星细胞相关研究概述 | 第20-23页 |
1.1.4 骨骼肌卫星细胞的应用前景 | 第23-24页 |
1.2 MRFs基因概述 | 第24-28页 |
1.2.1 Myf5基因概述 | 第24-25页 |
1.2.2 Myf6基因概述 | 第25-26页 |
1.2.3 MyoD基因概述 | 第26-27页 |
1.2.4 MyoG基因概述 | 第27-28页 |
1.3 MSTN基因概述 | 第28-31页 |
1.3.1 MSTN的基因特性 | 第28-29页 |
1.3.2 MSTN的表达特性与作用实效 | 第29-30页 |
1.3.3 MSTN的生物学作用 | 第30页 |
1.3.4 MSTN研究现状和应用前景 | 第30-31页 |
1.4 肌内脂肪相关基因概述 | 第31-33页 |
1.4.1 FAS基因 | 第31-32页 |
1.4.2 PPARγ基因 | 第32-33页 |
1.5 国内外肉羊产业生产情况概述 | 第33-37页 |
1.5.1 国内外肉羊生产概况及其特点 | 第33-35页 |
1.5.2 家畜资源多样性保护 | 第35-36页 |
1.5.3 我国家畜资源多样性保护与地方品种羊的利用情况概述 | 第36-37页 |
1.6 乌珠穆沁羊概述 | 第37-39页 |
1.6.1 乌珠穆沁羊草原及其饲草特征 | 第37页 |
1.6.2 乌珠穆沁羊及其研究进展 | 第37-39页 |
1.7 研究目的及意义 | 第39-40页 |
1.8 技术路线 | 第40-42页 |
2 乌珠穆沁羊骨骼肌卫星细胞的分离与纯化 | 第42-48页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第42-43页 |
2.1.1 实验材料及采样方法 | 第42页 |
2.1.2 实验试剂 | 第42页 |
2.1.3 实验设备 | 第42-43页 |
2.2 实验方法 | 第43页 |
2.2.1 分离采用改良原代外植块培养法(Primaryexplantsculture) | 第43页 |
2.2.2 纯化采用差速贴壁法(改良) | 第43页 |
2.2.3 原代细胞的传代 | 第43页 |
2.3 结果与分析 | 第43-45页 |
2.3.1 原代细胞的分离与纯化 | 第43-44页 |
2.3.2 传代后的卫星细胞形态 | 第44-45页 |
2.4 小结 | 第45-48页 |
3 乌珠穆沁羊骨骼肌卫星细胞的鉴定 | 第48-60页 |
3.1 乌珠穆沁羊骨骼肌卫星细胞的蛋白标记物鉴定 | 第48-52页 |
3.1.1 实验材料与试剂 | 第48-49页 |
3.1.2 实验方法 | 第49页 |
3.1.3 结果与分析 | 第49-52页 |
3.2 乌珠穆沁羊骨骼肌卫星细胞的RT-PCR鉴定 | 第52-57页 |
3.2.1 实验材料与试剂 | 第52-53页 |
3.2.2 实验方法 | 第53-56页 |
3.2.3 结果与分析 | 第56-57页 |
3.3 小结 | 第57-60页 |
4 乌珠穆沁羊骨骼肌卫星细胞的培养特性研究 | 第60-69页 |
4.1 乌珠穆沁羊骨骼肌卫星细胞的生长曲线绘制 | 第60-61页 |
4.1.1 实验材料、试剂与设备 | 第60-61页 |
4.1.2 实验方法 | 第61页 |
4.1.3 结果与分析 | 第61页 |
4.2 乌珠穆沁羊骨骼肌卫星细胞的存活率测定 | 第61-64页 |
4.2.1 实验材料、试剂与设备 | 第61-62页 |
4.2.2 实验方法 | 第62-63页 |
4.2.3 结果与分析 | 第63-64页 |
4.3 乌珠穆沁羊骨骼肌卫星细胞的核染色分析 | 第64-66页 |
4.3.1 实验材料、试剂与设备 | 第64-65页 |
4.3.2 实验方法 | 第65页 |
4.3.3 结果与分析 | 第65-66页 |
4.4 小结 | 第66-69页 |
5 乌珠穆沁羊骨骼肌卫星细胞成肌诱导及该过程中相关基因的表达变化 | 第69-86页 |
5.1 实验材料与试剂 | 第69-71页 |
5.1.1 实验材料 | 第69-70页 |
5.1.2 实验试剂 | 第70-71页 |
5.1.3 实验设备 | 第71页 |
5.2 实验方法 | 第71-73页 |
5.2.1 骨骼肌卫星细胞的成肌诱导 | 第71页 |
5.2.2 成肌诱导后成肌细胞的鉴定 | 第71页 |
5.2.3 成肌细胞比例分析 | 第71-72页 |
5.2.4 成肌诱导后相关基因表达分析 | 第72页 |
5.2.5 数据分析 | 第72-73页 |
5.3 结果与分析 | 第73-83页 |
5.3.1 成肌诱导后的骨骼肌卫星细胞形态变化分析 | 第73-74页 |
5.3.2 成肌细胞的鉴定及占有比例的分析 | 第74-75页 |
5.3.3 肌管形成初期形态变化及其对快肌肌球蛋白的表达分析 | 第75-76页 |
5.3.4 多核肌管对MSTN标记蛋白的表达分析 | 第76-77页 |
5.3.5 成肌诱导前后骨骼肌卫星细胞相关基因的表达量分析 | 第77-83页 |
5.4 小结 | 第83-86页 |
6 乌珠穆沁羊骨骼肌卫星细胞的成脂诱导及该过程中相关基因的表达变化 | 第86-97页 |
6.1 实验材料与试剂 | 第86-87页 |
6.1.1 实验材料 | 第86页 |
6.1.2 实验试剂 | 第86-87页 |
6.1.3 实验设备 | 第87页 |
6.2 实验方法 | 第87-88页 |
6.2.1 骨骼肌卫星细胞的成脂诱导 | 第87页 |
6.2.2 成脂诱导后脂肪细胞的染色 | 第87页 |
6.2.3 成脂诱导后相关基因表达分析 | 第87-88页 |
6.2.4 数据分析 | 第88页 |
6.3 结果与分析 | 第88-95页 |
6.3.1 成脂诱导后骨骼肌卫星细胞的形态变化分析 | 第88-89页 |
6.3.2 成脂诱导后脂肪细胞的染色结果与分析 | 第89-90页 |
6.3.3 成脂诱导前后骨骼肌卫星细胞相关基因的表达变化分析 | 第90-95页 |
6.4 小结 | 第95-97页 |
7 乌珠穆沁羊骨骼肌卫星细胞分化过程中肌肉与肌内脂肪相关基因的表达变化及相关性分析 | 第97-107页 |
7.1 实验材料与试剂 | 第97页 |
7.2 实验方法 | 第97页 |
7.3 结果与分析 | 第97-105页 |
7.3.1 成肌分化中肌肉相关基因与脂肪相关基因的表达变化及相关性 | 第98-100页 |
7.3.2 成脂分化中肌肉相关基因与脂肪相关基因的表达变化及相关性 | 第100-101页 |
7.3.3 不同月龄个体SMSCs分化前后肌肉与脂肪相关基因的表达相关性分析 | 第101-105页 |
7.4 小结 | 第105-107页 |
8 结论 | 第107-108页 |
9 创新点 | 第108-109页 |
参考文献 | 第109-123页 |
附录 | 第123-127页 |
作者简介 | 第127-128页 |