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ENST00000501520鉴定及在恶性转化BEAS-2B细胞中的作用

摘要第4-7页
Abstract第7-9页
英文缩略词汇表Abbreviations table第14-16页
1 引言第16-18页
2 材料与方法第18-31页
    2.1 材料第18-20页
        2.1.1 细胞株第18页
        2.1.2 煤焦沥青烟提取物第18页
        2.1.3 实验仪器第18-19页
        2.1.4 实验试剂第19-20页
        2.1.5 主要试剂配制第20页
            2.1.5.1 BEAS-2B细胞培养所用试剂配制第20页
            2.1.5.2 MTT溶液配置第20页
            2.1.5.3 Real time-PCR试剂配制第20页
    2.2 实验方法第20-31页
        2.2.1 细胞培养第20-21页
        2.2.2 细胞RNA的核质分离第21-22页
        2.2.3 qRT PCR检测各基因相对表达量第22-25页
            2.2.3.1 细胞总RNA提取,RNA完整性和纯度检测第22-23页
            2.2.3.2 RNA逆转录第23页
            2.2.3.3 引物合成处理第23-24页
            2.2.3.4 Real-time PCR反应第24-25页
        2.2.4 ENST00000501520的siRNA干扰处理第25-26页
        2.2.5 细胞划痕实验第26页
        2.2.6 MTT实验第26页
        2.2.7 平板克隆实验第26页
        2.2.8 细胞凋亡检测第26-27页
        2.2.9 细胞周期检测第27页
        2.2.10 Western-blot蛋白检测第27-30页
            2.2.10.1 细胞总蛋白提取第27-28页
            2.2.10.2 细胞总蛋白浓度测定第28页
            2.2.10.3 蛋白表达水平检测第28-30页
        2.2.11 数据统计分析第30-31页
3 实验结果第31-48页
    3.1 ENST00000501520的基本信息和蛋白编码能力预测第31-32页
        3.1.1 UCSC数据库检索ENST00000501520转录基因第31页
        3.1.2 CPC和CPAT软件对ENST00000501520的蛋白质编码能力预测第31-32页
    3.2 ENST00000501520的亚细胞定位和细胞代数间的表达量第32-34页
        3.2.1 ENST00000501520的亚细胞定位第32-33页
        3.2.2 各组CTPE染毒细胞中ENST00000501520表达情况第33-34页
    3.3 ENST00000501520干扰浓度确定第34-36页
    3.4 ENST00000501520干扰后细胞功能改变第36-41页
        3.4.1 划痕实验检测细胞迁移能力第36-37页
        3.4.2 MTT实验检测细胞增殖能力第37-38页
        3.4.3 流式细胞仪检测细胞周期第38-40页
        3.4.4 流式细胞仪检测细胞凋亡第40-41页
    3.5 ENST00000501520干扰后对靶向基因的影响第41-45页
        3.5.1 ENST00000501520的CNC网络分析第41-42页
        3.5.2 靶向基因的mRNAs相对表达量第42-43页
        3.5.3 SBK1、SOCS3的蛋白质相对表达量第43-45页
    3.6 SBK1与SOCS3在肺癌中的表达量及与肺癌的生存分析第45-48页
        3.6.1 SBK1在LUAD和LUSC病人中表达情况及生存分析第45-46页
        3.6.2 SOCS3在LUAD和LUSC病人中表达情况及预后分析第46-48页
4 讨论第48-54页
    4.1 ENST00000501520的基本信息与蛋白编码能力预测第48-49页
    4.2 ENST00000501520在细胞内的亚定位第49页
    4.3 ENST00000501520随恶性转化细胞代数增加的表达量变化第49-50页
    4.4 干扰ENST00000501520后细胞增殖能力和迁移能力的变化第50-51页
    4.5 干扰ENST00000501520后细胞的周期和凋亡情况的变化第51-52页
    4.6 干扰ENST00000501520后对靶向基因的影响第52页
    4.7 SBK1与SOCS3在肺癌中的表达量及与肺癌的生存关系第52-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-58页
综述第58-72页
    参考文献第68-72页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第72-73页
致谢第73页

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