摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩略词汇表Abbreviations table | 第14-16页 |
1 引言 | 第16-18页 |
2 材料与方法 | 第18-31页 |
2.1 材料 | 第18-20页 |
2.1.1 细胞株 | 第18页 |
2.1.2 煤焦沥青烟提取物 | 第18页 |
2.1.3 实验仪器 | 第18-19页 |
2.1.4 实验试剂 | 第19-20页 |
2.1.5 主要试剂配制 | 第20页 |
2.1.5.1 BEAS-2B细胞培养所用试剂配制 | 第20页 |
2.1.5.2 MTT溶液配置 | 第20页 |
2.1.5.3 Real time-PCR试剂配制 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-31页 |
2.2.1 细胞培养 | 第20-21页 |
2.2.2 细胞RNA的核质分离 | 第21-22页 |
2.2.3 qRT PCR检测各基因相对表达量 | 第22-25页 |
2.2.3.1 细胞总RNA提取,RNA完整性和纯度检测 | 第22-23页 |
2.2.3.2 RNA逆转录 | 第23页 |
2.2.3.3 引物合成处理 | 第23-24页 |
2.2.3.4 Real-time PCR反应 | 第24-25页 |
2.2.4 ENST00000501520的siRNA干扰处理 | 第25-26页 |
2.2.5 细胞划痕实验 | 第26页 |
2.2.6 MTT实验 | 第26页 |
2.2.7 平板克隆实验 | 第26页 |
2.2.8 细胞凋亡检测 | 第26-27页 |
2.2.9 细胞周期检测 | 第27页 |
2.2.10 Western-blot蛋白检测 | 第27-30页 |
2.2.10.1 细胞总蛋白提取 | 第27-28页 |
2.2.10.2 细胞总蛋白浓度测定 | 第28页 |
2.2.10.3 蛋白表达水平检测 | 第28-30页 |
2.2.11 数据统计分析 | 第30-31页 |
3 实验结果 | 第31-48页 |
3.1 ENST00000501520的基本信息和蛋白编码能力预测 | 第31-32页 |
3.1.1 UCSC数据库检索ENST00000501520转录基因 | 第31页 |
3.1.2 CPC和CPAT软件对ENST00000501520的蛋白质编码能力预测 | 第31-32页 |
3.2 ENST00000501520的亚细胞定位和细胞代数间的表达量 | 第32-34页 |
3.2.1 ENST00000501520的亚细胞定位 | 第32-33页 |
3.2.2 各组CTPE染毒细胞中ENST00000501520表达情况 | 第33-34页 |
3.3 ENST00000501520干扰浓度确定 | 第34-36页 |
3.4 ENST00000501520干扰后细胞功能改变 | 第36-41页 |
3.4.1 划痕实验检测细胞迁移能力 | 第36-37页 |
3.4.2 MTT实验检测细胞增殖能力 | 第37-38页 |
3.4.3 流式细胞仪检测细胞周期 | 第38-40页 |
3.4.4 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第40-41页 |
3.5 ENST00000501520干扰后对靶向基因的影响 | 第41-45页 |
3.5.1 ENST00000501520的CNC网络分析 | 第41-42页 |
3.5.2 靶向基因的mRNAs相对表达量 | 第42-43页 |
3.5.3 SBK1、SOCS3的蛋白质相对表达量 | 第43-45页 |
3.6 SBK1与SOCS3在肺癌中的表达量及与肺癌的生存分析 | 第45-48页 |
3.6.1 SBK1在LUAD和LUSC病人中表达情况及生存分析 | 第45-46页 |
3.6.2 SOCS3在LUAD和LUSC病人中表达情况及预后分析 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-54页 |
4.1 ENST00000501520的基本信息与蛋白编码能力预测 | 第48-49页 |
4.2 ENST00000501520在细胞内的亚定位 | 第49页 |
4.3 ENST00000501520随恶性转化细胞代数增加的表达量变化 | 第49-50页 |
4.4 干扰ENST00000501520后细胞增殖能力和迁移能力的变化 | 第50-51页 |
4.5 干扰ENST00000501520后细胞的周期和凋亡情况的变化 | 第51-52页 |
4.6 干扰ENST00000501520后对靶向基因的影响 | 第52页 |
4.7 SBK1与SOCS3在肺癌中的表达量及与肺癌的生存关系 | 第52-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-58页 |
综述 | 第58-72页 |
参考文献 | 第68-72页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |