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过表达嗜热毛壳菌Cu/Zn-SOD基因提高转基因水稻对三种病害的抗性

符号说明第4-8页
中文摘要第8-9页
Abstract第9-10页
1 前言第11-29页
    1.1 水稻白叶枯病、水稻细菌性条斑病和水稻纹枯病研究现状第11-14页
        1.1.1 发生和分布第11-12页
        1.1.2 危害症状第12-13页
        1.1.3 病原分化第13-14页
        1.1.4 传播途径和发生条件第14页
    1.2 植物免疫系统第14-22页
        1.2.1 植物先天免疫系统第14-18页
        1.2.2 植物后天免疫系统第18-19页
        1.2.3 水稻白叶枯病、细菌性条斑病和水稻纹枯病的抗性研究进展第19-22页
            1.2.3.1 水稻白叶枯病的抗性遗传基础研究第19-20页
            1.2.3.2 水稻条斑病抗性遗传研究第20-21页
            1.2.3.3 水稻纹枯病抗性遗传研究第21-22页
    1.3 超氧化物歧化酶概述第22-28页
        1.3.1 SOD的种类和分布第22-24页
        1.3.2 SOD的结构和理化特性第24-25页
            1.3.2.1 SOD的结构第24-25页
            1.3.2.2 SOD的理化特性第25页
        1.3.3 SOD基因的克隆和功能研究第25-27页
        1.3.4 SOD的应用第27-28页
    1.4 目的意义第28-29页
2 材料和方法第29-34页
    2.1 CtSOD的扩增与载体构建第29-30页
        2.1.1 CtSOD的扩增第29页
        2.1.2 目的产物的切胶回收和酶切第29页
        2.1.3 空载体和目的片段的酶切产物纯化和连接第29页
        2.1.4 连接产物的热激转化第29-30页
        2.1.5 质粒的提取第30页
        2.1.6 质粒的酶切检测第30页
        2.1.7 重组质粒的电击转化第30页
    2.2 转基因阳性水稻的获得第30-31页
        2.2.1 农杆菌介导的遗传转化第30页
        2.2.2 转基因水稻阳性检测第30-31页
            2.2.2.1 水稻基因组DNA提取第30-31页
            2.2.2.2 PCR阳性检测第31页
            2.2.2.3 GUS组织化学染色第31页
    2.3 SOD酶活性测定第31-32页
    2.4 水稻材料接种鉴定第32页
        2.4.1 PXO99接种水稻植株第32页
        2.4.2 水稻条斑病菌RS105接种水稻植株第32页
        2.4.3 水稻纹枯病菌YWK196接种水稻植株第32页
    2.5 RNA的操作第32-34页
        2.5.1 反转录第33页
        2.5.2 荧光定量PCR第33-34页
3 结果与分析第34-44页
    3.1 超量表达载体P~(Ubi):CtSOD的构建和T_0代转基因植株获得第34-35页
    3.2 T_0代转基因植株的PCR阳性鉴定和组织化学染色第35页
    3.3 T_0代转基因植株的酶活检测第35-37页
    3.4 超量表达CtSOD显著增加了T_0代水稻对细菌性条斑病的抗性第37-38页
    3.5 超量表达CtSOD显著增加了水稻对白叶枯病的抗性第38-42页
    3.6 超量表达CtSOD显著增加了T_0代水稻对纹枯病的抗性第42-43页
    3.7 超量表达CtSOD T_2代水稻的病程相关基因表达第43-44页
4 讨论第44-46页
    4.1 CtSOD的过表达提高增强水稻三种主要病害的抵抗能力第44-45页
    4.2 CtSOD的过量表达影响了水稻中病程相关基因的表达第45页
    4.3 转CtSOD水稻可能提高耐高温能力,还有多层面的功能有待发掘第45-46页
5 结论第46-47页
6 参考文献第47-61页
7 附录第61-71页
8 致谢第71-72页
9 攻读学位期间发表论文情况第72页

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