符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-29页 |
1.1 水稻白叶枯病、水稻细菌性条斑病和水稻纹枯病研究现状 | 第11-14页 |
1.1.1 发生和分布 | 第11-12页 |
1.1.2 危害症状 | 第12-13页 |
1.1.3 病原分化 | 第13-14页 |
1.1.4 传播途径和发生条件 | 第14页 |
1.2 植物免疫系统 | 第14-22页 |
1.2.1 植物先天免疫系统 | 第14-18页 |
1.2.2 植物后天免疫系统 | 第18-19页 |
1.2.3 水稻白叶枯病、细菌性条斑病和水稻纹枯病的抗性研究进展 | 第19-22页 |
1.2.3.1 水稻白叶枯病的抗性遗传基础研究 | 第19-20页 |
1.2.3.2 水稻条斑病抗性遗传研究 | 第20-21页 |
1.2.3.3 水稻纹枯病抗性遗传研究 | 第21-22页 |
1.3 超氧化物歧化酶概述 | 第22-28页 |
1.3.1 SOD的种类和分布 | 第22-24页 |
1.3.2 SOD的结构和理化特性 | 第24-25页 |
1.3.2.1 SOD的结构 | 第24-25页 |
1.3.2.2 SOD的理化特性 | 第25页 |
1.3.3 SOD基因的克隆和功能研究 | 第25-27页 |
1.3.4 SOD的应用 | 第27-28页 |
1.4 目的意义 | 第28-29页 |
2 材料和方法 | 第29-34页 |
2.1 CtSOD的扩增与载体构建 | 第29-30页 |
2.1.1 CtSOD的扩增 | 第29页 |
2.1.2 目的产物的切胶回收和酶切 | 第29页 |
2.1.3 空载体和目的片段的酶切产物纯化和连接 | 第29页 |
2.1.4 连接产物的热激转化 | 第29-30页 |
2.1.5 质粒的提取 | 第30页 |
2.1.6 质粒的酶切检测 | 第30页 |
2.1.7 重组质粒的电击转化 | 第30页 |
2.2 转基因阳性水稻的获得 | 第30-31页 |
2.2.1 农杆菌介导的遗传转化 | 第30页 |
2.2.2 转基因水稻阳性检测 | 第30-31页 |
2.2.2.1 水稻基因组DNA提取 | 第30-31页 |
2.2.2.2 PCR阳性检测 | 第31页 |
2.2.2.3 GUS组织化学染色 | 第31页 |
2.3 SOD酶活性测定 | 第31-32页 |
2.4 水稻材料接种鉴定 | 第32页 |
2.4.1 PXO99接种水稻植株 | 第32页 |
2.4.2 水稻条斑病菌RS105接种水稻植株 | 第32页 |
2.4.3 水稻纹枯病菌YWK196接种水稻植株 | 第32页 |
2.5 RNA的操作 | 第32-34页 |
2.5.1 反转录 | 第33页 |
2.5.2 荧光定量PCR | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-44页 |
3.1 超量表达载体P~(Ubi):CtSOD的构建和T_0代转基因植株获得 | 第34-35页 |
3.2 T_0代转基因植株的PCR阳性鉴定和组织化学染色 | 第35页 |
3.3 T_0代转基因植株的酶活检测 | 第35-37页 |
3.4 超量表达CtSOD显著增加了T_0代水稻对细菌性条斑病的抗性 | 第37-38页 |
3.5 超量表达CtSOD显著增加了水稻对白叶枯病的抗性 | 第38-42页 |
3.6 超量表达CtSOD显著增加了T_0代水稻对纹枯病的抗性 | 第42-43页 |
3.7 超量表达CtSOD T_2代水稻的病程相关基因表达 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-46页 |
4.1 CtSOD的过表达提高增强水稻三种主要病害的抵抗能力 | 第44-45页 |
4.2 CtSOD的过量表达影响了水稻中病程相关基因的表达 | 第45页 |
4.3 转CtSOD水稻可能提高耐高温能力,还有多层面的功能有待发掘 | 第45-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
6 参考文献 | 第47-61页 |
7 附录 | 第61-71页 |
8 致谢 | 第71-72页 |
9 攻读学位期间发表论文情况 | 第72页 |