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葡萄根瘤蚜翅型分化相关基因的克隆及其影响因素研究

英文縮写符号及其中英文对照表第5-6页
目录第6-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-12页
1 前言第13-23页
    1.1 葡萄根瘤蚜的生活史和生活习性第13-14页
        1.1.1 葡萄根瘤蚜的生活史第13-14页
        1.1.2 葡萄根瘤蚜的生活习性第14页
    1.2 蚜虫翅型分化研究进展第14-21页
        1.2.1 有翅蚜产生与环境因素的关系第15-17页
        1.2.2 有翅蚜产生与激素的关系第17-18页
        1.2.3 生物因素对有翅蚜发生的影响第18-19页
        1.2.4 昆虫翅多型的遗传机制第19-21页
    1.3 本研究的目的和意义第21-22页
    1.4 技术路线第22-23页
2 材料与方法第23-33页
    2.1 试验材料第23-24页
        2.1.1 供试蚜虫及培养方法第23页
        2.1.2 菌株及载体、酶、试剂盒、生化试剂、PCR引物等第23-24页
        2.1.3 所需仪器与设备第24页
    2.2 葡萄根瘤蚜翅型分化相关基因三磷酸腺苷双磷酸酶Apyrase的克隆第24-31页
        2.2.1 葡萄根瘤蚜总RNA的提取、含量与纯度检测第24-25页
        2.2.2 反转录cDNA第一链的合成第25-26页
        2.2.3 cDNA末端加尾反应第26页
        2.2.4 用3'RACE方法获得3'端序列第26页
        2.2.5 用5'RACE方法获得5'序列第26-27页
        2.2.6 全长cDNA序列的获得第27页
        2.2.7 目的片段的回收第27-28页
        2.2.8 连接反应第28页
        2.2.9 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第28-29页
        2.2.10 菌落PCR鉴定阳性克隆、序列测定第29页
        2.2.11 DvApyrase基因序列分析第29-30页
        2.2.12 DvApyrase基因在葡萄根瘤蚜不同龄期表达量分析第30-31页
    2.3 环境因子对葡萄根瘤蚜翅型分化的影响第31页
        2.3.1 虫口密度对翅型分化的影响第31页
        2.3.2 培养温度对翅型分化的影响第31页
        2.3.3 寄主对翅型分化的影响第31页
    2.4 激素对葡萄根瘤蚜翅型分化的影响第31-33页
        2.4.1 保幼激素Ⅲ对翅型分化的影响第31-32页
        2.4.2 早熟素Ⅱ对翅型分化的影响第32页
        2.4.3 处理方法第32-33页
3 结果分析第33-47页
    3.1 葡萄根瘤蚜翅型分化相关基因三磷酸腺苷双磷酸酶DvApyrase的分析第33-43页
        3.1.1 总RNA的提取及反转录第33页
        3.1.2 DvApyrase基因3'端的分离第33页
        3.1.3 DvApyrase基因5'端的分离第33-34页
        3.1.4 DvApyrase基因全长cDNA的分离第34页
        3.1.5 葡萄根瘤蚜DvApyrase基因序列分析第34-36页
        3.1.6 DvApyrase基因特征第36-37页
        3.1.7 氨基酸的疏水性和跨膜区分析第37-38页
        3.1.8 蛋白质结构预测第38-39页
        3.1.9 葡萄根瘤蚜DvApyrase序列同源性和系统进化分析第39-40页
        3.1.10 荧光定量PCR检测DvApyrase基因在有翅蚜中的表达模式第40-43页
    3.2 环境因子对葡萄根瘤蚜翅型分化的影响第43-45页
        3.2.1 虫口密度与翅型分化第43页
        3.2.2 培养温度与翅型分化第43-44页
        3.2.3 寄主与翅型分化第44-45页
    3.3 激素对葡萄根瘤蚜翅型分化的影响第45-47页
        3.3.1 保幼激素Ⅲ与翅型分化第45-46页
        3.3.2 早熟素Ⅱ与翅型分化第46-47页
4 讨论第47-51页
    4.1 葡萄根瘤蚜翅型分化相关基因DvApryase的分析第47-48页
    4.2 激素对葡萄根瘤蚜翅型分化的影响第48-49页
    4.3 环境因子对葡萄根瘤蚜翅型分化的影响第49-51页
5 结论第51-52页
参考文献第52-60页
致谢第60-61页
攻读硕士学位期间发表论文情况第61页

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