| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第9-25页 |
| 1.1 冠状病毒简介 | 第9-17页 |
| 1.1.1 冠状病毒简史 | 第9-10页 |
| 1.1.2 冠状病毒分类 | 第10-12页 |
| 1.1.3 冠状病毒基因组结构 | 第12-13页 |
| 1.1.4 冠状病毒复制过程 | 第13-15页 |
| 1.1.5 冠状病毒危害和研究冠状病毒的意义 | 第15-17页 |
| 1.2 冠状病毒主蛋白酶 | 第17-22页 |
| 1.2.1 主蛋白酶研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2.2 针对主蛋白酶的抑制剂设计 | 第18-20页 |
| 1.2.3 主蛋白酶活性和抑制剂N3抑制活性的测定 | 第20-21页 |
| 1.2.4 主蛋白酶的结构研究 | 第21-22页 |
| 1.3 犬呼吸道冠状病毒(CRCoV) | 第22-23页 |
| 1.4 研究内容与意义 | 第23-25页 |
| 第2章 材料和方法 | 第25-47页 |
| 2.1 仪器与试剂 | 第25-31页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.2 实验材料及试剂 | 第26-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-47页 |
| 2.2.1 原核表达载体构建 | 第32-35页 |
| 2.2.2 目的蛋白在原核表达系统的表达与纯化 | 第35-40页 |
| 2.2.3 结晶条件的初步筛选 | 第40-44页 |
| 2.2.4 结晶条件的优化 | 第44-47页 |
| 第3章 犬呼吸道病毒主蛋白酶的晶体学研究 | 第47-71页 |
| 3.1 主蛋白酶晶体学研究实验原理 | 第47-50页 |
| 3.1.1 X射线的产生及衍射原理 | 第47-49页 |
| 3.1.2 X射线衍射蛋白质晶体学结构解析原理(分子置换法为主) | 第49-50页 |
| 3.2 主蛋白酶晶体学研究实验步骤 | 第50-56页 |
| 3.2.1 分子克隆步骤 | 第50-51页 |
| 3.2.2 主蛋白酶表达和纯化步骤 | 第51-52页 |
| 3.2.3 主蛋白酶与抑制剂复合物结晶筛选步骤 | 第52页 |
| 3.2.4 主蛋白酶与抑制剂复合物结晶优化步骤 | 第52-54页 |
| 3.2.5 X射线衍射数据收集和处理步骤 | 第54-55页 |
| 3.2.6 X射线衍射蛋白质晶体学结构解析实验步骤 | 第55-56页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第56-71页 |
| 3.3.1 分子克隆实验结果与基本理化性质预测 | 第56-58页 |
| 3.3.2 主蛋白酶纯化实验结果和讨论 | 第58-63页 |
| 3.3.3 主蛋白酶与抑制剂复合物结晶实验结果 | 第63-67页 |
| 3.3.4 X射线衍射数据收集和处理结果 | 第67-69页 |
| 3.3.5 X射线衍射蛋白质晶体学结构解析实验结果与讨论 | 第69-71页 |
| 第4章 CRCoV主蛋白酶活性测定和抑制剂N3抑制活性测定 | 第71-83页 |
| 4.1 CRCoV主蛋白酶的活性检测原理 | 第71-72页 |
| 4.2 CRCoV主蛋白酶活性测定和抑制剂N3抑制活性测定步骤 | 第72-74页 |
| 4.2.1 CRCoV主蛋白酶活性测定步骤 | 第72-73页 |
| 4.2.2 抑制剂N3对CRCoV主蛋白酶的抑制活性测定步骤 | 第73-74页 |
| 4.3 CRCoV主蛋白酶活性测定和抑制剂N3抑制活性测定结果 | 第74-83页 |
| 4.3.1 CRCoV主蛋白酶活性测定结果 | 第74-77页 |
| 4.3.2 抑制剂N3对CRCoV主蛋白酶的抑制活性测定结果 | 第77-83页 |
| 第5章 总结与讨论 | 第83-85页 |
| 5.1 实验结果讨论 | 第83页 |
| 5.2 总结 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-91页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
