| 目录 | 第4-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 硬骨鱼免疫球蛋白的结构与分布 | 第12-14页 |
| 1.1.1 IgM | 第12-13页 |
| 1.1.2 IgD | 第13页 |
| 1.1.3 IgT/IgZ | 第13-14页 |
| 1.2 单克隆抗体在鱼类Ig研究中的应用 | 第14-16页 |
| 1.2.1 单克隆抗体在鱼类免疫球蛋白结构研究中的应用 | 第14-15页 |
| 1.2.2 单克隆抗体在鱼类血清Ig检测中应用 | 第15页 |
| 1.2.3 单克隆抗体在鱼类血清Ig纯化中的应用 | 第15-16页 |
| 1.3 单克隆抗体在鱼类B淋巴细胞研究中的应用 | 第16-17页 |
| 1.3.1 单克隆抗体在鱼类B淋巴细胞异质性研究中的应用 | 第16页 |
| 1.3.2 单克隆抗体在鱼类B淋巴细胞免疫活性研究中的应用 | 第16-17页 |
| 1.3.3 单克隆抗体在鱼类B细胞个体发育研究中的应用 | 第17页 |
| 1.4 单克隆抗体在鱼类T细胞研究中的应用 | 第17-18页 |
| 1.5 单克隆抗体在鱼类疾病防治中的应用 | 第18-20页 |
| 第二章 绪论 | 第20-24页 |
| 2.1 选题背景及意义 | 第20页 |
| 2.2 研究目标和研究内容 | 第20-21页 |
| 2.2.1 研究目标 | 第20页 |
| 2.2.2 研究内容 | 第20-21页 |
| 2.3 技术路线 | 第21-22页 |
| 2.4 创新之处 | 第22-24页 |
| 第三章 胭脂鱼血清免疫球蛋白的纯化及理化性质初步鉴定 | 第24-30页 |
| 3.1 引言 | 第24页 |
| 3.2 材料与方法 | 第24-26页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第24页 |
| 3.2.2 胭脂鱼血清制备 | 第24-25页 |
| 3.2.3 Protein A亲和层析纯化胭脂鱼血清Ig | 第25页 |
| 3.2.4 MBP亲和层析纯化胭脂鱼血清Ig | 第25-26页 |
| 3.2.5 Sepharose-4B凝胶层析纯化胭脂鱼血清Ig | 第26页 |
| 3.2.6 SDS-PAGE检测蛋白纯度及分子量 | 第26页 |
| 3.2.7 蛋白含量测定 | 第26页 |
| 3.3 实验结果 | 第26-28页 |
| 3.3.1 SDS-PAGE检测三种纯化方法结果 | 第26-27页 |
| 3.3.2 纯化产物蛋白含量测定结果 | 第27-28页 |
| 3.4 讨论 | 第28-30页 |
| 3.4.1 MBP亲和层析纯化胭脂鱼血清Ig | 第28-29页 |
| 3.4.2 Sepharose-4B凝胶层析纯化胭脂鱼血清Ig | 第29页 |
| 3.4.3 Protein A亲和层析纯化胭脂鱼血清Ig | 第29-30页 |
| 第四章 胭脂鱼血清免疫球蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定 | 第30-46页 |
| 4.1 引言 | 第30页 |
| 4.2 实验材料 | 第30-31页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第30页 |
| 4.2.2 主要试剂和仪器 | 第30-31页 |
| 4.3 实验方法 | 第31-37页 |
| 4.3.1 免疫Balb/c小鼠 | 第31页 |
| 4.3.2 抗血清效价检测 | 第31页 |
| 4.3.3 小鼠骨髓瘤细胞的复苏和培养 | 第31-32页 |
| 4.3.4 饲养细胞的制备 | 第32页 |
| 4.3.5 细胞融合 | 第32-33页 |
| 4.3.6 阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第33页 |
| 4.3.7 阳性杂交瘤细胞亚克隆 | 第33页 |
| 4.3.8 阳性杂交瘤细胞的冻存及扩大培养 | 第33-34页 |
| 4.3.9 阳性杂交瘤细胞染色体的鉴定 | 第34页 |
| 4.3.10 单克隆抗体亚类的鉴定 | 第34页 |
| 4.3.11 间接ELISA检测单克隆抗体的特异性 | 第34-35页 |
| 4.3.12 Western-blotting分析单克隆抗体的特性 | 第35-36页 |
| 4.3.13 间接ELISA检测单克隆抗体的效价 | 第36页 |
| 4.3.14 间接ELISA分析单克隆抗体识别表位性质 | 第36页 |
| 4.3.15 叠加ELISA分析单克隆抗体识别表位 | 第36-37页 |
| 4.4 实验结果 | 第37-42页 |
| 4.4.1 抗血清效价检测结果 | 第37页 |
| 4.4.2 阳性杂交瘤细胞筛选的结果 | 第37页 |
| 4.4.3 阳性杂交瘤细胞的染色体鉴定的结果 | 第37-38页 |
| 4.4.4 单克隆抗体亚类和效价鉴定的结果 | 第38-39页 |
| 4.4.5 间接ELISA检测单克隆抗体特异性的结果 | 第39页 |
| 4.4.6 Western-blotting分析单克隆抗体的特性结果 | 第39-40页 |
| 4.4.7 间接ELISA分析单克隆抗体识别的抗原表位性质的结果 | 第40-41页 |
| 4.4.8 叠加ELISA分析单克隆抗体识别表位的结果 | 第41-42页 |
| 4.5 讨论 | 第42-46页 |
| 4.5.1 制备单克隆抗体的影响因素 | 第42页 |
| 4.5.2 阳性杂交瘤细胞筛选及克隆化分析 | 第42-43页 |
| 4.5.3 间接ELISA检测单克隆抗体特异性结果分析 | 第43-44页 |
| 4.5.4 Western-blotting分析单克隆抗体特性的结果分析 | 第44-46页 |
| 第五章 胭脂鱼血清免疫球蛋白单克隆抗体的应用 | 第46-56页 |
| 5.1 引言 | 第46页 |
| 5.2 实验材料 | 第46页 |
| 5.2.1 实验动物 | 第46页 |
| 5.2.2 主要试剂和仪器 | 第46页 |
| 5.3 实验方法 | 第46-49页 |
| 5.3.1 胭脂鱼白细胞的制备 | 第46-47页 |
| 5.3.2 免疫沉淀 | 第47页 |
| 5.3.3 胭脂鱼外周血白细胞细胞流式 | 第47-48页 |
| 5.3.4 胭脂鱼外周血细胞涂片的免疫组化 | 第48页 |
| 5.3.5 胭脂鱼外周血白细胞甩片的免疫组化 | 第48-49页 |
| 5.4 实验结果 | 第49-52页 |
| 5.4.1 免疫沉淀结果 | 第49页 |
| 5.4.2 胭脂鱼外周血自细胞细胞流式的结果 | 第49-50页 |
| 5.4.3 胭脂鱼外周血血涂片的免疫组化结果 | 第50-51页 |
| 5.4.4 胭脂鱼外周血白细胞甩片的免疫组化结果 | 第51-52页 |
| 5.5 讨论 | 第52-56页 |
| 5.5.1 免疫沉淀 | 第52-53页 |
| 5.5.2 外周血流式细胞术检测结果分析 | 第53页 |
| 5.5.3 胭脂鱼外周血免疫组化的结果分析 | 第53-56页 |
| 第六章 全文结论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-68页 |
| 附录 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
